蝇蛆粉替代鱼粉对锦鲤生长、体组成、体色和非特异性免疫的影响

孟素宣　史东杰　秦佳　毕鹏飞　林诚丽　白东清　梁拥军

摘要：研究了蠅蛆粉替代鱼粉对锦鲤（Cyprinus carpio L.）生长、体组成、体色和血清免疫指标的影响。选用360尾初始体重为（120.24±4.36） g的锦鲤随机分为6组，每组20尾，3个重复，以基础饲料为对照组，用蝇蛆粉替代基础饲料中20%、40%、60%、80%和100%的鱼粉，配置6种试验饲料（G0、G20、G40、G60、G80、G100），养殖周期60 d。结果表明，蝇蛆粉替代鱼粉对试验鱼成活率、肌肉水分、粗灰分、钙、总磷、血清碱性磷酸酶（AKP）无显著差异（P>0.05）。蝇蛆粉替代鱼粉G20组-G60组试验鱼的终末体重、WGR、SGR无显著差异（P>0.05），而G80组、G100组显著降低（P<0.05）。G20组、G40组试验鱼的FCR较对照组无显著差异（P>0.05），G60组-G100组试验鱼FCR显著升高（P<0.05）。蝇蛆粉替代组试验鱼的肌肉粗蛋白含量随替代水平的增加而逐渐升高，G20组-G60组与对照组相比差异不显著（P>0.05），而G80组、G100组显著高于对照组（P<0.05）。各替代组粗脂肪、血清超氧化物歧化酶（SOD）随替代水平的增加，均显著降低（P<0.05）。蝇蛆粉替代鱼粉对锦鲤体色的影响，除G20组无显著差异（P>0.05）外，其他各试验组色度值均显著升高（P<0.05）。综上所述，以生长性能、肌肉成分、体表色度值和血清非特异性免疫作为评价指标，蝇蛆粉替代鱼粉的比例不宜超过60%。

关键词：锦鲤（Cyprinus carpio L.）；蝇蛆粉；鱼粉；生长性能；体组成；体色；非特异性免疫

中图分类号：S965.8；S816.4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）08-2066-05

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.08.037

Abstract：This experiment aims to explore the impact of substituting maggot meal for fish meal on growth performance， body composition， body color and some serum immune indicates. 360 Cyprinus carpio L.， with an original weight of （120.24±4.36）g apiece， were selected and divided at random into three parallel groups. The control group fed on basal feed. Six types of experimental feed （G0， G20， G40， G60， G80 and G100） were compounded over the course of 60 days by substituting maggot meal for 0%，20%， 40%， 60%， 80% and 100% of fish meal in basal feed respectively. The results showed that substitution of maggot meal for any amount of fish meal did not make any significant difference for experimental fish in terms of survival rate， muscular water， crude ash， carbon， total phosphorus and AKP（P>0.05）. For G20 and G60， such substitution did not show any significant difference in terms of final weight， WGR and SGR of the experimental fish（P>0.05） and for G80 and G100， it decreased significantly （P<0.05）. For G20 and G40， FCR of the experimental fish did not show any significant difference with that of the control group （P>0.05）. For G60 and G100， FCR of the experimental fish rose significantly（P<0.05）. Muscular crude protein content of the experimental fish rose proportionately with the addition of the substitution level. For G20 and G60， there was no significant difference compared with the control group， and it was much higher in G80 and G100 than in the control group（P<0.05）. Crude fat and SOD in substitution groups fell significantly with the addition of the substitution（P<0.05）. As for the impact of the substitution on body color， the chromatic values increased significantly in all experimental groups （P<0.05）except in G20 （P>0.05）. To sum up， the ratio of substitution of maggot meal for fish meal may not preferably exceed 60% with assessment indicates of growth performance， muscle composition， body-surface chromatic values and some serum non-specific immunity.

Key words：Cyprinus carpio L.；maggot meal；fish meal；growth performance；bod composition；body color；non-speeific immunity

鱼粉因蛋白质含量高，且富含多种氨基酸、脂肪酸和维生素，具有适口性强、易消化等特点，成为鱼类饲料中应用最为广泛的蛋白质源。由于海洋捕捞的限制以及水产养殖业的迅猛发展，鱼粉的生产量难以满足市场的需求量，导致鱼粉价格昂贵，从而限制了其在水产饲料的使用[1，2]。因此，寻找低成本、易获得的饲料蛋白质源部分或者全部替代饲料中鱼粉，从根本上降低水产养殖成本，成为了水产营养与饲料学专家研究的热点。

蝇蛆粉是一种新型昆虫蛋白质源，是由家养活体蝇蛆加工研制而成。蝇蛆繁殖周期短、饲养技术简单、易获取，且价格相对低廉。蝇蛆粉蛋白质含量高，氨基酸、维生素和矿物质含量丰富且全面，富含抗菌肽、凝集素、溶菌酶等生物活性物质，目前已经成功应用于水产养殖业[3-5]。研究表明，在饲料中添加适量的蝇蛆粉对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）[6，7]、中国对虾（Fenneropenaeus chinensis）[8]、尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）[9，10]、青鱼（Mylopharyngodon piceus）[11]、三疣梭子蟹（Portunus trituber chinensis）[12]、黄颡鱼（Peltobagrus fulvidraco）[13]等均具有良好的效果，可部分或全部替代对照组饲料中的鱼粉成分。

锦鲤（Cyprinus carpio L.）隶属于鲤形目（Cypriniformes）鲤科（Cyprinidae）鲤属（Cyprinus）为鲤鱼的变种，由于体格健美、色彩艳丽、泳姿优雅被誉为“水中活宝石”、“会游泳的艺术品”[14，15]，是中国重要的观赏鱼养殖对象。从目前的养殖情况来看，锦鲤养殖业发展亟待解决两个问题：①饲料成本问题，为了达到理想的鉴赏效果，在饲料中添加适量的天然增色物质（如螺旋藻、虾青素、红酵母等），增加体表鲜艳度，但饲料成本较高；②大规格商品鱼病害问题，锦鲤一旦发生病害，体表损伤，则无法出售。近年来，由于锦鲤养殖业迅速扩大，对其营养饲料进行了研究，但是主要集中于不同蛋白质水平、不同脂肪水平、不同增色剂添加量对锦鲤生长、体组成、体色、免疫等方面的影响[16-18]。有关锦鲤饲料中替代蛋白质源对其生长、体组成、体色和免疫研究的报道尚少，有关蝇蛆粉在锦鲤饲料中的应用尚未见到。因此，本试验以锦鲤为研究对象，探讨蝇蛆粉作为主要蛋白质源以不同水平替代鱼粉对锦鲤生长性能、体组成、体色和免疫的影响，以期为蝇蛆粉在观赏鱼饲料中的应用提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验饲料

以鱼粉、豆粕、双低菜粕为主要蛋白源，面粉为糖源，大豆磷脂为脂肪源，配置试验基础饲料。以基础饲料为对照组，用蝇蛆粉替代基础饲料中20%、40%、60%、80%和100%的鱼粉，配置6种试验饲料（G0、G20、G40、G60、G80、G100），6种饲料设计配方及营养组成见表1。所有饲料原料均由北京友谊恒远饲料有限公司提供，并由该公司粉碎加工，过80目筛，然后加水混匀，用123系列平模饲料颗粒机（河南省郑州市友邦机械厂生产125系列平模颗粒机125系列平模颗粒机）将其制成粒径为2.00 mm的颗粒饲料，自然冷却后装入密封袋，分组贴标签，-20 ℃冰箱中保存备用。蝇蛆粉购于合肥大元生物科技有限公司，粗蛋白、粗脂肪、粗灰分、水分、钙、磷含量分别为56.84%、11.58%、6.75%、8.79%、1.16%和1.24%。

1.2 试验用鱼与饲养管理

试验用锦鲤来自北京鑫淼水产总公司，购回后暂养于北京市水产科学研究所小汤山良种繁育中心二号温室8号循环水养殖池（7.4 m×4.5 m×1.8 m）驯养15 d，养殖用水为天然温泉水（约36 ℃）和地下井水混合而成，清新无污染，水温为（18±1）℃，pH 7.4，DO≥5 mg/L，光照为自然光源。每日投喂两次（9：30、17：00），投喂量为鱼体重的3%～4%，根据鱼体的摄食情况做适当调整。养殖试验在该中心连栋温室小型循环水养殖缸（1.5 m×1.5 m×1.5 m）内进行，实际养殖水容积为2.25 m3。试验开始时，选取体质健壮，规格整齐的锦鲤360尾，初始体重（120.24±4.36） g，随机分配于18个小型循环水养殖缸中，每缸20尾。将18个网箱随机分为6个组（每组3个重复），记为G0-G100，分别投喂对应的试验饲料。试验期间投喂、饲养条件与驯养时相同，每3天换去水体总容积的1/3，补充等量水体。试验期为60 d。

1.3 样品采集与分析

试验开始时，测量每缸試验鱼的初始体重，试验过程中记录死鱼的数量和重量。养殖试验结束时，禁食24 h，测量每缸试验鱼体重，拍照，并统计成活率。每缸随机选取10尾试验鱼，采用常规方法尾静脉取血，4 ℃下5 000 r/min离心10 min，用于制备血清，测定超氧化物歧化酶（SOD）、碱性磷酸酶（AKP）的活性，上述指标的测定采用北京澳联雅实验设备中心试剂盒。随后取背部肌肉，-20 ℃保存，用于测量试验鱼肌肉体组成成分。

样品中水分含量采用105 ℃常压干燥法（GB/T6435-1986）、粗蛋白含量采用凯氏定氮法（GB/T 6432-1994）、粗脂肪含量采用乙醚抽提法（GB/T 6432-1994）、粗灰分含量采用550 ℃灼烧法（GB/T 6438-1992）、钙含量采用乙二胺四乙酸（EDTA）滴定法（GB/T 6436-2002）、总磷含量采用钼黄比色法（GB/T 6437-2002）进行测定。

试验鱼体色变化的记录参照史东杰等[19]研究增艳物质对血鹦鹉增艳效果的影响时采用的方法。试验时使用佳能5D Mark III数码相机拍照，采用罗氏比色扇（南京铭奥仪器设备有限公司）比色，测得色度值。

1.4 指标计算

选用成活率、增重率、饲料系数、特定生长率作为主要生长性能指标，具体计算方法如下：

成活率（SR）=试验末鱼尾数/试验初鱼尾数×100%；

增重率（WGR）=（终末体重-初始体重）/初始体重×100%；

饲料系数（FCR）=总投喂量/（终末体重+死鱼重量-初始体重）；

特定生长率（SGR）=（ln终末鱼体重-ln初始鱼体重）/饲养天数×100%/d

1.5 数据统计与分析

试验数据用平均值±标准差来表示，采用SPSS 13.0软件进行数据统计和分析，用多重比较法进行组间差异显著性分析，显著水平为0.05。

2 结果与分析

2.1 饲料中添加不同比例蝇蛆粉对锦鲤生长性能的影响

由表2可以看出，与对照组相比，蝇蛆粉替代鱼粉对锦鲤低水平替代组（G20、G40、G60）试验鱼的终末体重、WGR、SGR无显著差异（P>0.05），而高水平替代组（G80、G100）显著降低（P<0.05）。低水平替代组试验鱼的FCR较对照组无显著差异（P>0.05），而替代水平超过60%时，随替代比例增加，FCR显著升高（P<0.05）。蝇蛆粉替代鱼粉对各组试验鱼SR无显著影响（P>0.05），各试验组SR均为100%。

2.2 饲料中添加不同比例蝇蛆粉对锦鲤肌肉组成的影响

由表3可以看出，蝇蛆粉替代组试验鱼的肌肉粗蛋白含量随替代水平增加而逐渐升高，低水平替代组（G20、G40、G60）与对照组相比差异不显著（P>0.05），而高水平替代组（G80、G100）显著高于对照组（P<0.05）。粗脂肪含量随替代水平增加，与对照组相比，均显著降低（P<0.05）。蝇蛆粉替代鱼粉对试验鱼肌肉水分、粗灰分、钙和总磷含量无显著差异（P>0.05）。

2.3 饲料中添加不同比例蝇蛆粉对锦鲤非特异性免疫指标的影响

由表4可以看出，随着蝇蛆粉替代鱼粉水平的增加，各替代组试验鱼血清超氧化物歧化酶（SOD）活性显著降低（P<0.05），且均低于对照组，但蝇蛆粉的添加未对锦鲤血清中碱性磷酸酶（AKP）活性产生显著的影响（P>0.05）。

2.4 饲料中添加不同比例蝇蛆粉对锦鲤体色的影响

由表5可以看出，与对照组色度值相比，蝇蛆粉替代鱼粉对锦鲤体色的影响，除G20组无显著差异（P>0.05）外，其他各试验组色度值均显著升高（P<0.05）。

3 小结与讨论

Grabnr等[20]认为蝇蛆粉营养全面，所富含的营养物质的价值与进口秘鲁鱼粉基本相似，研究蝇蛆粉作为替代鱼粉的蛋白质源具有重要的意义。在本试验中，蝇蛆粉替代鱼粉对锦鲤低水平替代组（G20、G40、G60）试验鱼的终末体重、WGR、SGR无显著差异（P>0.05），而高水平替代组（G80、G100）显著降低（P<0.05）。低水平替代组试验鱼的FCR较对照组无显著差异（P>0.05），而替代水平超过60%时，随替代比例的增加，FCR显著升高（P<0.05）。这表明，蝇蛆粉可作为锦鲤配合饲料中鱼粉的替代蛋白质源，从而在一定程度上降低锦鲤饲料中鱼粉的使用量，但是蝇蛆粉添加过量则会对锦鲤的生长产生不利的影响。出现这一现象的原因，有3个原因：①蝇蛆粉与鱼粉的各种营养物质比例不同，比如蝇蛆粉中蛋氨酸、赖氨酸、多不饱和脂肪酸含量远低于鱼粉，当蝇蛆粉大量替代鱼粉后，就会导致饲料中上述氨基酸、脂肪酸不平衡或者达不到锦鲤所需的含量；②可能与蝇蛆粉中含有鱼类难以消化的几丁质有关，当蝇蛆粉替代鱼粉的比例超过60%时，饲料中几丁质的含量可能超过了锦鲤的耐受范围，导致消化不良；③蝇蛆粉替代组的饲料与对照组饲料的适口性不同，养殖过程中笔者发现投喂蝇蛆粉替代鱼粉的饲料时，锦鲤的摄食速率明显慢于对照组，且摄食量也不同程度地低于对照组，这说明蝇蛆粉替代鱼粉后，可能影响了饲料的适口性。综合上述3个方面，蝇蛆粉大量替代鱼粉后导致了饲料的利用率降低，从而导致锦鲤的增重率、特定生长率表现出下降的现象。这一研究结果与蝇蛆粉替代鱼粉在凡纳滨对虾、泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）中的应用相似[6，21]，而与Ogunji等[10]认为蝇蛆粉可完全代替尼罗罗非鱼饲料中鱼粉使用量的观点不同，这可能与试验鱼的体质、蝇蛆粉的加工工艺和富含的蛋白质质量有关。有关蝇蛆粉影响锦鲤生长特性的生理机制还需要进一步的深入研究。

在本试验中，随着蝇蛆粉替代水平的增加，锦鲤背部肌肉的粗蛋白含量升高，粗脂肪含量却显著降低（P<0.05），说明蝇蛆粉可降低锦鲤肌肉的脂肪沉积量。这可能与蝇蛆粉大量替代鱼粉后，导致饲料中不饱和脂肪酸缺乏所致。这一研究结果与曾俊明等[6]用蝇蛆粉替代鱼粉对凡纳滨对虾的研究结果相似，但与Ogunji等[10]对尼罗罗非鱼的研究结果相反。

本试验研究结果表明，蝇蛆粉替代鱼粉对锦鲤体色的影响，除G20组无显著差异（P>0.05）外，其他各试验组色度值均显著升高（P<0.05），说明蝇蛆粉对锦鲤体表色素的沉积具有促进作用。但目前有关蝇蛆粉对水产动物体色影响的研究尚未见到，本试验所取得的结果是否为蝇蛆粉可以对锦鯉具有增色效果，还是蝇蛆粉的添加促进了饲料中螺旋藻的增色作用，还有待进一步研究。

目前已经证实，碱性磷酸酶（AKP）与体内代谢有密切关系，并直接参与磷的代谢。在本试验中高水平替代组G80、G100组的生长性能显著低于对照组，是否由于AKP活性的降低影响鱼体的代谢，从而影响鱼体对营养物质的吸收还有待进一步的研究。随着蝇蛆粉替代水平的提高，试验鱼血清中的超氧化物歧化酶（SOD）呈现出逐渐降低的趋势，蝇蛆粉大量添加是否会降低锦鲤的非特异性免疫功能有待进一步研究。

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