丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床价值

余建华　陈瑜　常琪

摘要：目的 探讨血清中丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）检测的临床价值。方法 采用酶联免疫吸附试验检测HCV-cAg；采用化学发光方法检测HCV-Ab；采用实时荧光定量PCR方法检测HCV-RNA。结果 137例HCV-Ab阳性标本中HCV-RNA与HCV-cAg检测两种方法通过Kappa检验得出的结论一致性较好（P<0.001，Kappa=0.893）；HCV-RNA和HCV-cAg阳性检出率分别为40.15%和37.96%，采用配对卡方检验，差异无统计学意义（χ2=0.571，P>0.05）。55例HCV-RNA阳性标本中HCV-RNA拷贝数对数值与HCV-cAgOD均值之间有良好的正相关性（r=0.882，P<0.05）。结论 HCV-cAg检测操作简便，能够缩短诊断丙肝病毒感染的时间，其水平一定程度上能反应丙型肝炎患者体内HCV复制程度，具有较好的临床实用价值。

关键词：丙型肝炎病毒抗体；丙型肝炎病毒-RNA；丙型肝炎病毒核心抗原

丙型肝炎病毒（HCV）是丙型病毒性肝炎的病原体，主要经血液传播，是目前引起输血后肝炎最常见和最严重的病原体。丙型肝炎能引起急性和慢性肝炎，其感染慢性化占75%～85%，且慢性丙型肝炎与肝硬化和原发性肝癌关系密切[1]。我国丙型病毒性肝炎的报告病例数呈现出逐年上升的趋势，严重威胁人民的生命健康。由于目前尚无针对HCV的有效疫苗可供临床使用，因此对于丙肝感染的及早检出并通过一系列有效措施阻断其在易感人群间的传播就显得尤为重要。近年来，陆续出现了一些关于HCV核心抗原（HCV-cAg）可以缩短丙肝感染检测窗口期，提高感染检出率的报道[2-3]。本文通过检测丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab）阳性患者血清中HCV-cAg、HCV-RNA来探讨HCV-cAg检测在临床的应用价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 137例HCV-Ab阳性血清标本来自我院2014年1月～2015年5月门诊和住院患者，其中男性76例，女性61例，年龄16～68岁，平均39.7岁。所有标本均空腹抽取静脉血离心分离血清，经HCV-Ab检测阳性，选取S/CO>3.0标本，于-20℃冰箱保存备测。

1.2 仪器与试剂 HCV-cAg酶免试剂盒购自湖南康润药物有限公司，仪器为意大利亚特斯全自动酶免分析仪；HCV-RNA试剂购自中山大学达安基因股份有限公司，仪器为厦门安普利公司荧光定量PCR检测仪；HCV-Ab试剂为雅培公司原装试剂，仪器为雅培i2000化学发光仪。

1.3检测方法 HCV-cAg采用ELISA方法；HCV-RNA采用實时荧光定量PCR方法；HCV-Ab采用化学发光方法检测。

1.4统计学方法 采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率（%）表示，比较采用配对χ2检验；采用Pearson进行相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HCV-cAg与HCV-RNA检测结果的一致性分析137例HCV-Ab阳性标本中，HCV-cAg阳性标本52例，HCV-RNA阳性标本55例，两种检验方法通过比较Kappa检验结果（P<0.001，Kappa值=0.893），可认为这两种检验方法得出的结论一致性较好，见表1。

2.2 HCV-cAg与HCV-RNA阳性检出率比较137例HCV-Ab阳性标本中，HCV-RNA阳性检出率为40.15%（55/137）大于HCV-cAg阳性检出率37.96%（52/137），HCV-cAg与HCV-RNA阳性检出率相比较采用配对χ2检验，差异没有统计学意义（χ2=0.571，P>0.05）。

2.3 HCV-RNA阳性标本中HCV-RNA拷贝数与HCV-cAg吸光度（OD值）之间的相关性55例HCV-RNA阳性标本中HCV-RNA拷贝数对数值与HCV-cAgOD均值之间有良好的正相关性（r=0.882，P<0.05），见表2。

3 讨论

丙型肝炎病毒核心抗原是丙肝病毒颗粒的结构蛋白，是导致丙型肝炎体液免疫的重要蛋白，在各亚型丙型肝炎病毒中高度保守，血清中的丙肝病毒核心抗原非常稳定，是比较理想的丙肝病毒感染标志物[4-5]。

临床上对于诊断丙型肝炎病毒感染多采用ELISA检测HCV-Ab[6]，因其可同时检测多个抗原位点，操作简便等优点。但由于厂家之间使用丙型肝炎基因重组抗原质量及各抗原片段包被比例的不同，各厂家试剂间的敏感性和特异性存在着一定差异，从而会导致检测结果不一致[7]。另外因感染丙型肝炎后HCV-Ab出现较慢，平均约70 d，容易导致HCV感染的漏诊[8]。此外，由于酶标抗体是广谱抗人IgG抗体，对吸附在固相上的IgG抗体无筛选作用，这就降低了检测的特异性，容易产生假阳性结果[9]。

目前认为HCV-RNA是反映HCV复制最直接最可靠的指标，HCV-RNA具有早期、敏感性和特异性较高等特点，但HCV-RNA检测对实验室有特殊要求，费用也比较高，在常规工作和多数基层医疗单位还难以开展。本实验结果显示137例HCV-Ab阳性标本中，HCV-cAg和HCV-RNA两种检验方法通过比较Kappa检验结果（P<0.001，Kappa=0.893），可认为这两种检验方法得出的结论一致性较好，即诊断结果基本一致。HCV-RNA与HCV-cAg阳性检出率分别为40.15%和37.96%，差异无统计学意义（χ2=0.571，P>0.05）。本实验HCV-cAg检出率与某些报道[10]不一致，这可能与标本选取和不同厂家试剂敏感性、特异性不同有关。本研究结果还显示HCV-RNA阳性标本中HCV-cAgOD均值与HCV-RNA拷贝数对数值之间具有良好的正相关性（r=0.882，P<0.05），说明HCV-cAg一定程度上可以反映体内丙肝病毒复制的活跃程度。

本实验结果中有5例HCV-RNA阳性但HCV-cAg阴性样本，可能是慢性丙肝病毒感染，目前低于核心抗原的最低检测值。另有2例HCV-cAg阳性而HCV-RNA阴性样本，可能是非特异性抗体干扰导致的假阳性，具体原因有待进一步研究。

综上所述，笔者认为HCV-cAg检测不需要特殊的仪器，操作简便，缩短了发现丙肝病毒感染的时间，可以弥补抗体检测的不足，在一定程度上還可作为HCV-RNA的替代或补充检测指标，对评价HCV感染、复制和治疗具有重要的临床应用价值。在无条件开展HCV-RNA检测的基层医疗单位可以同时检测HCV-cAg和HCV-Ab，达到早期诊断的目的。在已开展HCV-RNA检测的医院，最好也开展HCV-cAg检测，以避免RNA波动期或RNA样本降解造成的HCV-RNA假阴性。HCV-RNA、HCV-cAg和HCV-Ab同时检测不但可以尽早检出和早期防治丙型肝炎感染，也可以减少由于输血后丙型肝炎引起的医疗纠纷。

参考文献：

[1]倪语星，等.临床微生物学检验[M].北京：人民卫生出版社，2012.

[2]刘潇，等.联合检测丙肝病毒核心抗原和抗体在丙型肝炎早期诊断中的价值[J].中国卫生检验杂志，2012.

[3]李妙羡，等.HCV抗原检测与HCV-RNA和HCV抗体检测的比较研究[J].现代检验医学杂志，2012.

[4]Chakravarti A，Chauhan MS，Dogra G，et al.Hepatitis Cviruscoreantigenassay：canwe think beyond conventioninresour celimite dsettings[J].Braz J Infect Dis，2013.

[5]刘佳，等.临床实验室仪器间比对实验探讨[J].中华实验和临床病毒学杂志，2013.

[6]许方，等.丙肝病毒核心抗原检测对于丙型肝炎诊断的价值[J].中国实验诊断学，2010.

[7]MoreiraRC.Hepatitis Candhe modialysis：areview[J].Braz J Infect Dis，2005.

[8]陈景芬.酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒抗体影响因素分析[J].检验医学与临床，2008.

[9]宁发锦.丙型肝炎病毒载量与核心抗原及丙氨酸转氨酶检测的比较研究[J].检验医学与临床，2011.

[10]徐炜新.抗原抗体联合检测在提高血液透析患者丙肝感染检出率中的应用[J].国际检验医学杂志，2015.

编辑/张燕