患儿痰培养病原菌分布与耐药性分析

庞宝华, 张　凡, 段　伟,韩继明, 赵菊梅, 田红英

(1.延安大学 医学院, 陕西 延安　716000;2.延安大学 医学院附属医院, 陕西 延安　716000)



患儿痰培养病原菌分布与耐药性分析

庞宝华1, 张凡1, 段伟2,韩继明1, 赵菊梅1, 田红英1

(1.延安大学 医学院, 陕西 延安716000;2.延安大学 医学院附属医院, 陕西 延安716000)

通过对某医院儿科送检的痰标本进行细菌培养、鉴定及药敏试验,分析患儿下呼吸道感染中细菌种类,细菌分布以及不同菌株的耐药特点和耐药趋势。收集某医院儿科2014年12月到2015年3月下呼吸道感染患儿的痰培养阳性标本,共分离出细菌121株。引起患儿下呼吸道感染的致病菌主要以革兰氏阴性杆菌为主,居于前五位的依次为流感嗜血杆菌(27.3%)、大肠埃希菌(22.3%)、肺炎链球菌(19.8%)、肺炎克雷伯菌(7.4%)以及副流感嗜血杆菌(6.6%)。肺炎链球菌对青霉素、万古霉素、利奈唑胺具有较好的敏感性;嗜血杆菌属细菌对头孢曲松、左氧氟沙星及美罗培南表现出较好的敏感性;而肠杆菌科细菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦及碳青霉烯类药物有极好的敏感性。临床医师应重视病原菌的检测与药敏试验,合理选用抗生素,减少耐药菌株的产生,提高疗效。

痰培养; 细菌分布; 耐药性

呼吸道感染是小儿时期的常见病,多发病,特别是下呼吸道感染是小儿死亡的主要病因。因此,了解引起小儿下呼吸道感染的主要病原菌种类和分布及其病原菌的对各种抗生素的耐药特点显得尤为重要。本研究收集某医院儿科2014年12月到2015年3月期间患儿痰细菌培养阳性标本,分析其细菌的分布情况及主要细菌的耐药情况,旨在指导临床合理使用抗生素,避免滥用抗生素及经验用药,减少耐药菌株的发生,取得最合理的社会经济效益比,现将结果报道如下。

1　资料与方法

1.1资料来源

来源于某医院儿科2014年12月到2015年3月门诊及住院的下呼吸道感染患儿痰培养标本中分离出的致病细菌121株,排除了同一患儿的重复菌株。所有患儿均按照《实用儿科学》中小儿下呼吸道感染诊断标准进行确诊。

1.2方法

1.2.1标本采集每位患儿入院后立即做痰细菌培养。患儿取半卧体位,采用一次性诱导采痰器对患儿进行引导流痰,吸取痰液1～2mL,注入无菌试管,及时送检。

1.2.2标本处理将痰标本液化混匀后,分别接种在哥伦比亚血平板、巧克力琼脂平板培养基上,并放入CO2培养箱中进行培养,24h之后观察细菌生长情况并采用法国VITEK2 COMPACT全自动微生物鉴定系统进行病原菌鉴定。相关病原菌使用美国临床实验室标准委员会1993年2月制定的纸片扩散法K-B法(部分药敏试验采用E-TEST药敏试纸条)做药敏实验,不同的致病菌采用不同的药敏环境和气体环境,用游标卡尺测量抑菌圈直径(mm),依据CLSI标准进行药敏结果判读。质控菌株为:金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、粪肠球菌ATCC29212或33186、铜绿假单胞菌ATCC27853，均由卫生部临床检验中心提供。

1.2.3数据处理采用世界卫生组织细菌耐药性检测中心推荐的Whonet5.6软件系统对结果进行分析处理。

2　结　果

2.1患儿细菌菌株分布情况

送检标本中,总共培养分离出细菌为121株,前3位依次为:流感嗜血杆菌共33株,占27.3%;大肠埃希菌共27株,占22.3%;肺炎链球菌共24株,占19.8%。其他见表1。

表1患儿痰培养细菌菌株分布情况

Tab.1Bacterial strain distribution of sputum culture in children with lower respiratory infections

菌株株数构成比/%流感嗜血杆菌3327.3大肠埃希菌2722.3肺炎链球菌2419.8肺炎克雷伯菌97.4副流感嗜血杆菌86.6金黄色葡萄球菌65.0阴沟肠杆菌43.3鲍曼不动杆菌43.3其他65.0合计121100.0

2.2药敏试验结果

2.2.1嗜血杆菌属细菌耐药情况流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌均从高到低依次对复方新诺明、氨苄西林、头孢克洛、氨苄西林/舒巴坦、头孢呋新,阿奇霉素表现出耐药性。流感嗜血杆菌对第三代头孢的耐药率为0,而副流感嗜血杆菌对其出现一定程度的耐药,耐药率为14.3%,两种细菌对左氧氟沙星和美罗培南耐药率为0,结果见表2。

2.2.2肠杆菌科细菌耐药情况大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均对氨苄西林、头孢唑啉、头孢肶肟、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、复方新诺明出现不同程度的耐药,对于头孢哌酮/舒巴坦、大肠埃希菌的耐药率为0,而肺炎克雷伯菌的耐药率为11.1%。对于阿米卡星、头孢西丁、左氧氟沙星而言,大肠埃希菌出现不同程度的耐药。但是，肺炎克雷伯菌对其耐药率均为0。两种细菌均对哌拉西林/他唑巴坦,亚胺培南,美罗培南表现出较好的敏感性。肠杆菌科细菌中,27株大肠埃希菌中21株为产ESBLs菌株,6株为非产ESBLs菌株,9株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株为5株,非产ESBLs菌株4株,肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株对于青霉素类,一、二、三、四代头孢菌素表现出较高的耐药性,而非酶细菌对除了复方新诺明以外的药物均表现出较好的敏感性。大肠埃希菌产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株耐药率只是表现在个别药物如阿米卡星,头孢噻肟,头孢西丁上存在差异,结果见表3、表4。

表2流感嗜血杆菌与副流感嗜血杆菌的耐药情况

Tab.2Drug resistance ofHaemophilusinfluenzaandHemophilusparainfluenzae/%

药物流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌氨苄西林51.542.9复方新诺明81.871.4头孢呋辛24.228.6头孢曲松0.014.3氨苄西林/舒巴坦24.228.6左氧氟沙星0.00.0头孢克洛42.442.9阿奇霉素6.114.3美罗培南0.00.0

表3大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药情况

Tab.3Drug resistance ofEscherichiacoliandKlebsiellapneumoniae/%

药物大肠埃希菌肺炎克雷伯菌氨苄西林87.488.9头孢唑啉85.055.6哌拉西林/他唑巴坦0.00.0头孢哌酮/舒巴坦0.011.1阿米卡星11.10.0头孢肶肟63.033.3头孢呋辛81.455.6头孢噻肟70.444.4头孢他啶40.744.4复方新诺明92.633.3头孢西丁3.70.0左氧氟沙星33.30.0亚胺培南0.00.0美罗培南0.00.0

表4大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的产ELBLs菌株与非产ESBLs耐药比较

Tab.4Comparison of drug resistance of ELBLs producing strains and non producing ESBLs inEscherichiacoliandKlebsiellapneumonia%

药 物 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 产ESBLs菌株非产ESBLs菌株产ESBLs菌株非产ESBLs菌株氨苄西林1001001000头孢唑啉10042.91000哌拉西林/他唑巴坦0000头孢哌酮/舒巴坦00200阿米卡星042.900头孢肶肟6557.1400头孢呋辛10028.61000头孢噻肟950800头孢他啶4528.6800复方新诺明901006075头孢西丁014.300左氧氟沙星3528.600亚胺培南0000美罗培南0000

2.2.3肺炎链球菌耐药情况肺炎链球菌对红霉素,克林霉素,四环素,左氧氟沙星,复方新诺明出现不同程度耐药率,而对青霉素、万古霉素和利奈唑胺的耐药率为0。

表5　肺炎链球菌的耐药情况

3　讨　论

下呼吸道感染是婴幼儿时期的常见疾病,这与婴幼儿呼吸系统的解剖结构特点及免疫功能不完善有关系。下呼吸道感染严重威胁儿童的健康,是婴儿死亡的主要原因[1]。已有研究表明引起小儿下呼吸道感染的病原菌主要是细菌[2],本研究主要培养分离患儿痰液中的细菌,了解本地区小儿下呼吸道感染细菌种类、分布及耐药情况,为临床合理使用抗生素、减少耐药菌发生、制定合理的用药方案提供参考。

本研究结果显示,送检的患儿痰液共培养检出细菌121株,主要为流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌及副流感嗜血杆菌,分别占27.3%,22.3%,19.8%,7.4%,5.8%。致病菌主要以革兰氏阴性杆菌为主,这与已有的相关研究结果[2-3]一致,但与王巧燕等[4]报道的不同,可能存在地区差异。

药敏实验结果表明,嗜血杆菌属细菌对第三代头孢菌素、左氧氟沙星、美罗培南的敏感性较高,其次是阿奇霉素,其对复方新诺明、氨苄西林的耐药率较高。近几年嗜血杆菌属细菌由于产β-内酰胺酶及青霉素结合位点变异菌株的不断出现,对于氨基青霉素的耐药率逐年上升[5]。左氧氟沙星影响儿童软骨发育,临床上18岁以下孩子禁用,导致耐药率非常低。临床上应当依据药敏结果及抗生素自身特点选用合适的药物。

分离出的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌由于产ESBL酶的菌株比例逐渐增高,对青霉素类、头孢菌素类药物耐药程度较高,但对酶抑制剂类药物哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦以及碳青霉烯类药物敏感性较好,这与茹官璞[6]研究结果类似。临床使用抗生素时对于严重小儿下呼吸道感染可优先选用上述药物进行治疗。另外,肺炎克雷伯菌中产ESBLs的菌株与非产ESBLs的菌株在耐药上存在很大差别,其中产ESBLs的菌株对大多数临床常用的抗生素出现耐药,而非产ESBLs菌株仅对复方新诺明出现耐药,对大多数药物敏感,在临床用药中应该特别注意。

本研究发现肺炎链球菌对青霉素耐药率为0,这可能与青霉素长时间退出临床一线,而使致病菌对其又敏感了,根据研究结果可认为青霉素仍可作为肺炎链球菌感染的首选药物,也说明一种抗生素临床广泛使用出现大范围的耐药后,停用若干年,可能会出现致病菌对其又敏感的现象。肺炎链球菌对利奈唑胺、万古霉素、左氧氟沙星耐药率较低,这与已有的研究结果[4，7]类似,考虑利奈唑胺的价格、万古霉素毒副作用及避免耐药菌株出现,可作为最后选用药物。

总之,引起小儿呼吸道感染,尤其是下呼吸道感染的病原菌种类较多,而且还存在地区差异。临床医师应通过各种途径了解近几年引起小儿呼吸道感染主要病原菌种类、分布及各种病原菌的耐药情况,指导其临床用药,在一定程度上可及时有效控制或缓解患儿病情,另外,临床医师还应重视病原菌的检测与药敏试验,合理选用抗生素,减少耐药菌株的产生,提高疗效。

[1]李霞,杜忠东,周仲蜀，等.2003—2009年北京市部分医院住院儿童疾病谱及病死原因演变[J].中国实用儿科杂志,2013,28(7):537-539.

[2]朱艳娜,陈频,陈凤英.小儿下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2014,24(2):477-479.

[3]于春冬,王亚秋,杨丽，等. 小儿下呼吸道感染的病原菌分布及其耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2014,24(19):4879-4881.

[4]王巧燕,孙正林,朱振坤，等.小儿下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析[J].中国卫生检验杂志,2015,25(3):438-440+443.

[5]DIZBAY M,TUNCCAN O G,SEZER B E,et al. Nosocomial imipenem-resistant Acinetobacter baumannii infections:epidemiology and riskfactors[J].Scand J Infect Dis,2010,42(10): 741-746.

[6]茹官璞,李燕燕,王琪，等. 商州地区5岁以下小儿下呼吸道感染 1200 例病原学检测分析[J].中国儿童保健杂志,2013,21(7):766-768.

[7]贝文政.小儿下呼吸道感染的肺炎链球菌耐药性研究[J].中国妇幼保健,2013,28(19):3216-3218.

(编辑徐象平)

Analysis of the distribution and the drug resistance of pathogenic bacteria in the sputum culture of children with lower respiratory infections

PANG Bao-hua1, ZHANG Fan1, DUAN Wei2, HAN Ji-ming1,ZHAO Ju-mei1, TIAN Hong-ying1

(1.Medical College of Yan′an University, Yan′an 716000, China 2.Medical School Affiliated Hospital, Yan′an University, Yan′an 716000, China)

Through culturing and identifying of bacteria in the sputum specimens of pediatric department in a hospital, to analysis the kinds of bacteria and bacterial distribution in lower respiratory tract infection of children. Then through drug sensitivity test of bacteria, to analysis drug resistance characteristics and drug resistance tendency of bacteria.To collect positive specimens in sputum culture of lower respiratory tract infection of children in pediatrics department of a hospital from December, 2014 to March, 2015. A total of 121 strains of bacteria were isolated. Gram negative bacilli was the main pathogenic bacteria in children with lower respiratory tract infection, which is ranked in the top five followed by Haemophilus influenzae (27.3%), Escherichia coli (22.3%), Streptococcus pneumoniae (19.8%), Klebsiella pneumonia (7.4%) and Hemophilus parainfluenzae (6.6%). Streptococcus pneumoniae has better sensitivity to penicillin, vancomycin, linezolid; Haemophilus genus bacteria showed a good sensitivity to ceftriaxone, levofloxacin and meropenem, and Enterobacteriaceae has excellent sensitivity to piperacillin piperacillin/tazobactam and Cefoperazone/sulbactam and carbapenems drugs. Clinicians should pay attention to the detection of pathogenic bacteria and drug sensitivity test, to achive rational use of antibiotics, to reduce the production of drug resistant strains, and improve curative effect.

sputum culture; bacteria distribution; drug resistance

2015-01-09

国家自然科学基金资助项目(81470140);陕西省教育厅专项科研计划基金资助项目(15JK1826)

庞宝华,女,陕西长安人，从事临床流行病学研究。

R917

A

10.16152/j.cnki.xdxbzr.2016-04-016