新疆维、汉族宫颈癌相关细胞因子的表达及临床意义*

(新疆医科大学附属肿瘤医院放疗中心，乌鲁木齐 830011)

李亚伟，胡云辉，王若峥△



论著·临床研究

新疆维、汉族宫颈癌相关细胞因子的表达及临床意义*

(新疆医科大学附属肿瘤医院放疗中心，乌鲁木齐 830011)

目的对比新疆维、汉族HPV16阳性的宫颈癌(CC)患者外周血中1型辅助性T细胞(Th1)、Th2和Th17细胞主要分泌的细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL17表达水平的差异性，并探讨维、汉族CC患者细胞因子与临床分期及肿瘤分化程度的相关性。方法采集66例(汉族22例，维吾尔族44例)经该院病理科明确诊断为CC患者治疗前的血标本，使用Luminex检测技术检测IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17的水平，对比维、汉患者细胞因子的差异；根据患者临床分期和肿瘤分化程度进行分组，在不同亚组中，比较维、汉患者细胞因子水平的差异性。结果维族CC组IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17高于汉族CC组(P<0.05)；而维族Ⅰ～Ⅱ期CC组Th细胞分泌的IL-2、IL-4、IL-10高于汉族Ⅰ～Ⅱ期CC组(P<0.05)；维族Ⅲ～Ⅳ期CC组Th细胞分泌的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17高于汉族Ⅲ～Ⅳ期CC组(P<0.05)；维族中高分化CC组Th细胞分泌的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17高于汉族中高分化CC组(P<0.05)。结论在HPV16阳性的CC患者中，Th细胞分泌的细胞因子水平在维、汉组之间是存在差异性的，而这种差异性在Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌和中高分化宫颈癌中更加明显。

宫颈肿瘤；T淋巴细胞,辅助诱导；细胞因子类

宫颈癌(cervical cancer，CC)是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤，仅次于乳腺癌，成为全球导致妇女病死的第二大恶性疾病[1]。在我国，CC的患病率和病死率约占世界三分之一[2]。新疆是我国CC高发区之一，其中新疆维吾尔族(以下简称维族)CC患病率及病死率分别为459/10万至526/10 万和15.78/50万，远高于新疆地区汉族、哈萨克族、蒙古族等其他民族[3-5]。已有文献报道，细胞因子在CC发生发展中起着重要作用[6-8]。在CC的肿瘤微环境中，1型辅助性T(type 1 T helper，Th1)、Th2及Th17分泌的相关细胞因子扮演着重要角色，并成为近年研究的重点及热点[9]。但对于维、汉族间HPV16阳性的CC患者外周血中Th1、Th2、Th17主要分泌的细胞因子表达水平是否存在差异性，还未有文献报道。本研究分析探讨维、汉族CC患者Th细胞分泌的细胞因子差异性。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2012年1月至2014年6月本院收治的HPV16阳性的CC患者66例，CC临床分期(FIGO，2009年)：Ⅰ～Ⅱ期26例(其中汉族5例，维族21例)，Ⅲ～Ⅳ期40例(其中汉族17例，维族23例)。CC病理分级：低分化鳞状细胞癌13例(其中汉族6例，维族7例)，中高分化鳞状细胞癌53例(其中汉族16例，维族37例)。纳入标准：(1)病理确诊为CC；(2)经HPV定性检测为HPV16感染；(3)首次治疗前的患者。排除标准：(1)急性或慢性感染性疾病；(2)合并其他肿瘤性疾病；(3)免疫相关疾病(如自身免疫性疾病、HIV阳性等)；(4)免疫药物滥用史。根据民族分组，其中汉族CC(汉族组)22例，维族CC(维族组)44例。年龄35～81 岁，中位年龄54 岁。

1.2方法研究对象均签署知情同意书，抽取未接受任何治疗的患者空腹静脉血5 mL，3 000 r/min离心10 min，分离获得的血浆在-80 ℃冷冻冰箱保存，根据Human Cytokine multi-plex(Bio-Rad，USA)分析和Luminex multi-analytic profiling (Bio-Rad，USA)技术说明书测定干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)、白细胞介素2(interleukin 2，IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17水平。

2　结　　果

2.1汉族、维族CC临床特征比较对汉族组(22例)和维族组(44例)的年龄、临床分期、分化程度进行统计学分析，结果显示两组患者在年龄(t=1.069，P=0.113)，临床分期(χ2=3.839，P=0.060)，分化程度(χ2=0.587，P=0.444)，差异均无统计学意义，见表1。

表1　　汉族、维族CC临床特征比较

2.2汉族、维族CC患者Th细胞分泌的细胞因子水平比较汉族组与维族组患者细胞因子水平比较：IFN-γ(t=2.730，P=0.008)、IL-2(t=3.661，P=0.001)、IL-4(t=3.625，P=0.001)、IL-6(t=2.928，P=0.005)、IL-10(t=3.270，P=0.002)、IL-13(t=3.413，P=0.001)、IL-17(t=3.638，P=0.001)，差异均有统计学意义。见表2。

2.3汉族、维族CC不同临床分期Th细胞分泌细胞因子水平比较Ⅰ～Ⅱ期汉族CC组与Ⅰ～Ⅱ期维族CC组比较：IL-2(t=2.143，P=0.042)、IL-4(t=2.386，P=0.025)、IL-10(t=2.217，P=0.036)差异有统计学意义，IFN-γ(t=1.203，P=0.241)、IL-6(t=1.953，P=0.063)、IL-13(t=1.860，P=0.075)、IL-17(t=2.021，P=0.055)差异无统计学意义；Ⅲ～Ⅳ期汉族CC组与Ⅲ～Ⅳ期维族CC组比较：IFN-γ(t=2.437，P=0.020)、IL-2(t=2.869，P=0.007)、IL-4(t=2.642，P=0.012)、IL-6(t=2.117，P=0.041)、IL-10(t=0.393，P=0.022)、IL-13(t=0.725，P=0.010)、IL-17(t=3.046，P=0.004)差异均有统计学意义，见表3。

表2　　汉族、维族CC患者Th细胞分泌的细胞因子水平的 比较

2.4汉族、维族CC组织不同分化程度Th细胞分泌细胞因子水平比较 汉族低分化CC组与维族低分化CC组细胞因子比较：IFN-γ(t=1.609，P=1.136)、IL-2(t=1.590，P=0.140)、IL-4(t=1.239，P=0.241)、IL-6(t=1.223，P=0.247)、IL-10(t=1.495，P=0.163)、IL-13(t=1.184，P=0.261)、IL-17(t=1.568，P=0.145)差异均无统计学意义；汉族中高分化CC组与维族中高分化CC组细胞因子比较：IFN-γ(t=2.252，P=0.029)、IL-2(t=3.221，P=0.002)、IL-4(t=3.459，P=0.001)、IL-6(t=2.666，P=0.010)、IL-10(t=2.817，P=0.007)、IL-13(t=3.263，P=0.002)、IL-17(t=3.232，P=0.002)差异均有统计学意义，见表4。

表3　　维、汉族CC患者不同临床分期Th细胞分泌细胞因子水平的比较±s，pg/mL)

a：P<0.05,与同等临床分期汉族比较。

表4　　维、汉族CC患者不同病理分化Th细胞分泌细胞因子水平的比较±s，pg/mL)

a：P<0.05,与同等病理分化程度汉族比较。

3　讨　　论

在肿瘤免疫微环境中，细胞因子是肿瘤发生发展过程中的重要介质[3,9]。其中 Th细胞是产生细胞因子最多的免疫细胞，Th细胞根据释放细胞因子的不同，可分为不同亚型[10]。在特异性抗原刺激下，不同转录因子诱导Th细胞分化成Th1、Th2及Th17细胞，其中Th1类细胞因子，如IL-2、IFN-γ等，主要促进细胞免疫；Th2类细胞因子，如IL-4、IL-6、IL-10、IL-13等，主要促进体液免疫。而Th17是由Th0细胞在IL-6和 IL-23的刺激下分化而成的Th细胞，主要分泌IL-17等促炎性因子[9,11]。

对于不同民族之间Th细胞分泌的细胞因子的差异性，仅在一些免疫性疾病中有相关研究，在肿瘤疾病中还未见到相关文献报道。Park等[12]选取高加索人群和非裔美国人作为试验对象，研究不同民族健康女性细胞因子(IL-6和IFN-γ)之间的差异性，结果发现在健康女性中，非裔美国人IL-6(P<0.001)和IFN-γ(P<0.01)水平明显高于高加索人群，差异有统计学意义，且这两种细胞因子在不同民族间的差异与患乳腺癌的风险因素之间具有相关性。这与本研究发现维族CC和汉族CC不同种族之间Th细胞分泌的细胞因子存在差异性相似。李国昌等[13]曾探讨细胞因子在中国汉族、维族、哈萨克族正常人群中的表达水平是否存在民族间的差异性，结果发现血清中TNF-α维族组明显高于汉族组和哈萨克族组(P<0.01)，汉族组与哈萨克族组之间差异无统计学意义(P>0.05)；血清中TGF-β1汉族组与维族组之间差异有统计学意义(P<0.01)，汉族组与哈萨克族组之间差异也有统计学意义(P<0.05)，说明不同民族之间细胞因子水平有差异性。蒋建华等[14]曾对50例(其中汉族30例、维族20例)寻常型银屑病患者血清中IL-2、IL-6及IFN-γ水平进行测定，探讨它们在不同民族的银屑病发病中的意义，维族组与汉族组对比发现汉族组IL-2、IFN-γ高于维族组，汉族组IL-6低于维族组。岳明明等[15]在探讨新疆维吾尔自治区汉族和维族高尿酸血症患者的相关影响因素的研究中，发现维族患者IL-6、TNF-α两类炎性细胞因子低于汉族。本研究发现在CC患者中，维族组IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-17水平均高于汉族组(P<0.05)，这与其他非肿瘤性疾病研究结果类似。

在CC肿瘤微环境中，细胞因子的产生和活动受多种因素的影响[16]。维、汉两民族在生活饮食习惯上有着巨大的不同，相关文献已报道在新疆地区维、汉CC患者临床流行病特征上存在差异性[17]。基于维、汉族CC患者Th细胞分泌的细胞因子水平是否存在差异性，目前还未见文献报道。所以本研究选取CC中感染率最高的HPV16阳性的患者，按其民族不同，分为汉族组和维族组，分别对其外周血中Th1、Th2和Th17细胞分泌的主要细胞因子水平进行测定，将汉族组与维族组患者细胞因子进行比较，发现Th1细胞分泌的IL-2、IFN-γ，Th2细胞分泌的IL-4、IL-6、IL-10、IL13及Th17细胞分泌的IL-17在维族组均高于汉族组，差异均有统计学意义(P<0.05)。这与前人在其他免疫性疾病中研究报道两民族细胞因子水平存在一定差异性的研究结果相符。由于在CC中随着临床分期和分化程度的改变，一些Th分泌的细胞因子水平也会发生相应的改变[18-21]。本研究按临床分期的不同，将患者分为Ⅰ～Ⅱ期CC组和Ⅲ～Ⅳ期CC组，对Ⅰ～Ⅱ期CC组中维、汉族Th细胞分泌的细胞因子水平进行比较，结果显示Th细胞分泌的IL-2、IL-4、IL-10维族CC组高于汉族CC组(P<0.05)，而对Ⅲ～Ⅳ期CC组中维、汉族Th细胞分泌的细胞因子水平进行比较，结果显示Th细胞主要分泌的几种细胞因子维族CC组均高于汉族CC组，差异有统计学意义(P<0.05)。这说明维、汉族之间细胞因子水平的差异性，在晚期CC患者中更加普遍。本研究又将这些患者按肿瘤分化程度进行分组，分为低分化CC组和中高分化CC组，并分别对各组中维、汉族细胞因子水平对比分析，最终结果显示，在宫颈低分化CC中维、汉族之间Th细胞分泌的细胞因子水平差异均无统计学意义，而在宫颈中高分化CC癌中维、汉族之间Th细胞分泌的细胞因子水平差异均有统计学意义(P<0.05)，且维族组细胞因子水平均高于汉族组。不难看出维、汉细胞因子水平的差异性还与肿瘤分化程度有关。

综上所述，本研究发现在HPV16阳性的CC患者中，Th细胞分泌的细胞因子水平在维、汉之间存在差异性，而这种差异性与临床分期和组织分化程度均有关系。深入地研究肿瘤患者中两民族间细胞因子水平的差异性，有助于深化对新疆地区CC患者疾病病情转归的认识并对指导临床治疗具有一定临床意义。

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Expression and clinical significance of cervical cancer related cytokines in Xinjiang Uyghur and Han nationalities*

LiYawei,HuYunhui,WangRuozheng△

(RadiotherapyCenter，AffiliatedTumorHospital，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi,Xinjiang830011，China)

ObjectiveTo compare the differences of cytokines IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 expression levels mainly secreted by peripheral blood Th1,Th2 and Th17 cells and to investigate the correlation between the cytokines in the Han and Uyghur cervical cancer patients with the clinical stage and tumor differentiation degree.MethodsThe blood samples in 66 cases of pathologically diagnosed cervical cancer (Han in 22 cases,Uyghur in 44 cases) before treatment in our hospital were collected.The concentrations of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 were measured by using Luminex assay，then the differences of cytokines were compared between Han and Uyghur patients;according to the clinical stage and tumor differentiation degree,the grouping was performed,then the differences of cytokines in different subgroups were compared between Han and Uyghur cervical cancer patients.ResultsThe levels of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 in the Uyghur cervical cancer group were higher than those in the Han cervical cancer group(P<0.05)；the levels of IL-2,IL-4 and IL-10 secreted by Th cells in the stage Ⅰ-Ⅱ Uyghur cervical cancer group were higher than those in the stage Ⅰ-Ⅱ Han cervical cancer group(P<0.05)；the levels of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17secreted by Th cells in the stage Ⅲ-Ⅳ Uyghur cervical cancer group were higher than those in the stage Ⅲ-Ⅳ Han cervical cancer group(P<0.05)；the levels of IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13 and IL-17 secreted by Th cells in middle to high differentiation Uyghur cervical cancer group were higher than those in middle to high differentiation Han cervical cancer group(P<0.05).ConclusionIn the HPV16-positive cervical cancer patients,the concentrations of cytokines secreted by Th cells are different between Uyghur group and Han group，these differences are more significant in the stage Ⅲ-Ⅳ cervical cancer and in middle to high differentiated cervical cancer.

uterine cervical neoplasms;T-lymphocytes,helper-inducer;cytokines

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.12.025

科技部国际合作项目(2012DFA31560)。作者简介：李亚伟(1990-)，硕士在读，主要从事肿瘤放射治疗基础与临床研究。△

，E-mail:wrz8526@163.com。

李亚伟，胡云辉，王若峥△

R737.33

A

1671-8348(2016)12-1662-04

2015-11-08

2015-12-10)