HIV/AIDS合并HBV/HCV感染病毒载量水平及与T淋巴细胞相关性的探讨*

张茹薏，游　晶，杨微波，饶少锋

(昆明医科大学第一附属医院感染性疾病科　650032)



HIV/AIDS合并HBV/HCV感染病毒载量水平及与T淋巴细胞相关性的探讨*

张茹薏，游晶△，杨微波，饶少锋

(昆明医科大学第一附属医院感染性疾病科650032)

目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)/艾滋病(AIDS)合并乙型肝炎病毒(HBV)/丙型肝炎病毒(HCV)感染后病毒载量水平变化及对机体T淋巴细胞免疫机制的影响。方法分别测定HIV/AIDS单纯感染组,HIV/HBV合并感染组,HIV/HCV合并感染组3组的HIV RNA、HBV DNA、HCV RNA、CD4+T淋巴细胞频数、CD8+T淋巴细胞频数、CD4/CD8比值，并分析各组T淋巴细胞与HIV RNA的关系，HBV DNA/HCV RNA与HIV RNA、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4/CD8比值的相关性。结果HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组及HIV/HCV合并感染组的CD4+T淋巴细胞与各自组的HIV RNA呈负相关，差异有统计学意义(P<0.05)；HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组的CD8+T淋巴细胞与各自组的HIV RNA呈负相关，差异有统计学意义(P<0.05)；HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组及HIV/HCV合并感染组的CD4/CD8与各自组的HIV RNA呈负相关，差异有统计学意义(P<0.05)。结论合并感染HBV后，HIV/AIDS患者T细胞的数量下降更明显，致HIV RNA、HBV DNA高载量，加速了HIV病情进展；感染HBV后CD4+T细胞的数量下降比感染HCV更明显。

肝炎病毒，乙型；肝炎病毒，丙型；HIV/AIDS；HIV RNA;T淋巴细胞

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)主要侵犯人体的免疫系统，包括CD4+T淋巴细胞、巨噬细胞和树突细胞等，主要表现为CD4+T淋巴细胞数量不断减少，同时会对CD8+T淋巴细胞等亚群T淋巴细胞造成不同程度损害，最终导致人体细胞免疫功能缺陷，引起各种机会性感染和肿瘤的发生。随着高效抗反转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy，HAART)的有效应用，HIV/艾滋病(AIDS)相关的机会性感染率下降，因为乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)与HIV有着相似的感染途径，故HIV 合并HBV/HCV感染比较常见，是影响HIV感染患者发病率和病死率的一个主要原因[1]。当HIV合并HBV/HCV感染时，HIV促进HBV/HCV的复制，发展为慢性乙型肝炎(CHB)/慢性丙型肝炎(CHC)的速度比单纯HBV/HCV感染者快，其肝脏病变的患病率和病死率明显增加[2]。本实验通过分析HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组及HIV/HCV合并感染组中的HIV RNA、HBV DNA、HCV RNA的水平，并和T淋巴细胞的相关性，初步探讨合并HBV/HCV感染后对HIV/AIDS病程及机体T淋巴细胞免疫机制的影响，并为临床药物治疗提供免疫依据。

1　资料与方法

1.1一般资料选择2010～2013年就诊于昆明医科大学第一附属医院、昆明市第三人民医院门诊和住院部的经HIV筛查试验阳性，AIDS确证阳性且未经高效抗逆转录病毒治疗的HIV/AIDS单纯感染者、HIV/HBV合并感染者及HIV/HCV合并感染者作为研究对象。HIV感染的诊断参照《艾滋病诊疗指南(2011版)》，HBV感染的诊断参照《乙型肝炎防治指南(2010版)》，HCV感染的诊断参照《丙型肝炎防治指南(2010版)》。全部患者均排除甲型、戊型肝炎，自身免疫性疾病，酒精性肝病，药物性肝病，肝癌，淋巴瘤，卡波西肉瘤，结核，细菌感染，结缔组织病，其他免疫缺陷疾病，且近1年内未使用免疫抑制剂。研究对象共267例，其中男208例，女59例，年龄3～91岁，平均(41.00±11.15)岁。其中HIV/AIDS单纯感染组100例，男74例，女26例，年龄3～91岁，平均(41.37±14.18)岁；HIV/HBV合并感染组66例，男53例，女13例，年龄23～73岁，平均(42.64±11.15)岁；HIV/HCV合并感染组101例，男81例，女20例，年龄22～63岁，平均(39.56±6.79)岁。

1.2方法

1.2.1HIV RNA测定血清HIV RNA病毒载量采用RT-PCR方法，用美国Roche公司的全自动核酸分离纯化系统(COBAS AMPLICOR)和核酸提取试剂盒，提取病毒RNA并测定病毒载量。操作过程严格按照试剂盒说明书进行。

1.2.2HBV DNA测定采用宝生物核酸提取试剂盒，PCR方法测定HBV DNA。

1.2.3HCV RNA测定采用宝生物核酸提取试剂盒，RT-PCR方法测HCV RNA。

1.2.4T淋巴细胞亚群测定采集所有研究病例新鲜肝素抗凝外周血300 μL，采用美国Beeton Dickinson公司生产的FACS calibur型流式细胞仪及其公司生产的专用试剂盒进行严格操作。

2　结　　果

2.1HIV/AIDS单纯感染组与HIV/HBV合并感染组之间T淋巴细胞亚群的差异HIV/AIDS单纯感染组与HIV/HBV合并感染组的HIV RNA、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4/CD8比值的差异有统计学意义(P<0.05),见表1。

2.2HIV/AIDS单纯感染组与HIV/HCV合并感染组之间T淋巴细胞亚群的差异HIV/AIDS单纯感染组与HIV/HCV合并感染组的HIV RNA、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4/CD8比值，差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

2.3HIV/HBV合并感染组与HIV/HCV合并感染组之间T淋巴细胞亚群的差异HIV/HBV合并感染组与HIV/HCV合并感染组的HIV RNA、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4/CD8比值的差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表1　　HIV/AIDS单纯感染组与HIV/HBV合并感染组之间HIV RNA及T淋巴细胞亚群的差异

表2　　HIV/AIDS单纯感染组与HIV/HCV合并感染组之间HIV RNA及T淋巴细胞亚群的差异

表3　　HIV/HBV合并感染组与HIV/HCV合并感染组之间HIV RNA及T淋巴细胞亚群的差异

表4　　3组中T淋巴细胞亚群与各自组HIV RNA(log10 copies/mL)的相关性

2.43组中T淋巴细胞亚群与各自组HIV RNA间的相关性HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组及HIV/HCV合并感染组的CD4+T淋巴细胞与各自组的HIV RNA呈负相关(P<0.05)；HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组的CD8+T淋巴细胞与各自组的HIV RNA呈负相关(P<0.05)；而HIV/HCV合并感染组的CD8+T淋巴细胞与本组的HIV RNA呈负相关(P>0.05);HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组及HIV/HCV合并感染组的CD4/CD8与各自组的HIV RNA呈负相关(P<0.05)，见表4。

2.5HIV/HBV合并感染组HIV RNA、T淋巴细胞亚群与HBV DNA间的相关性HIV/HBV合并感染组中HIV RNA与HBV DNA呈正相关(P<0.05)；CD4+T淋巴细胞、CD4/CD8与HBV DNA呈负相关(P<0.05)；而CD8+T淋巴细胞与HBV DNA呈正相关(P>0.05)，见表5。

表5　　HIV/HBV合并感染组HIV RNA、T淋巴细胞亚群 与HBV DNA间的相关性

2.6HIV/HCV合并感染组HIV RNA、T淋巴细胞亚群与HBV DNA间的相关性HIV/HCV合并感染组中HIV RNA与HCV RNA呈正相关，CD4+T淋巴细胞与HCV RNA呈负相关，CD4/CD8与HCV RNA无相关，CD8+T淋巴细胞与HCV RNA呈负相关(P>0.05)，见表6。

表6　　HIV/HCV合并感染组HIV RNA、T淋巴细胞 亚群与HCV RNA间的相关性

3　讨　　论

正常情况下外周血中的T细胞亚群主要包括CD4+T细胞亚群和CD8+T细胞亚群。CD8+T细胞的功能在于清除被病毒感染了的靶细胞，CD4+T细胞的功能则在于清除入侵机体的细菌等病原微生物。研究证明，HIV合并HBV感染患者HBV DNA载量较HBV单纯感染高[3]。研究发现特异性T细胞与共感染HBV病毒载量呈负相关，而HIV合并HBV感染中HBV特异性T细胞反应减少[4]，故HBV DNA高载量。

本实验发现HIV/HBV合并感染组CD4+T淋巴细胞与HBV DNA呈负相关，而CD8+T淋巴细胞与HBV DNA呈正相关，但差异无统计学意义(P>0.05)。栗群英等[5]发现在HIV合并HBV和HCV感染的患者外周血检查中发现HIV、HBV和HCV感染患者的外周血CD8+T细胞的数量增加较单纯HIV感染患者的增加更为剧烈。而本实验HIV/HBV中的外周血CD8+T细胞和CD4+T淋巴细胞的数量比HIV/AIDS单纯感染组减少，HIV/HCV组中的外周血CD8+T细胞的数量比HIV/HBV合并感染组明显增加，HIV/HBV合并感染组中的外周血CD4+T细胞的数量比HIV/HCV合并感染组下降明显。且合并感染组HIV RNA较HIV/AIDS单纯感染组水平高。

CD4+T细胞数量进行性减少是HIV感染的重要特征性改变，本实验发现合并感染HBV后CD4+T细胞的数量下降更明显，破坏严重，致HIV RNA、HBV DNA高载量。且感染HBV后CD4+T细胞的数量下降比感染HCV合并感染更明显。可认为合并感染HBV后加速了HIV病情进展。

HIV/HCV合并感染组和HIV/AIDS单纯感染组相比，外周血CD8+T细胞的数量、CD4+T细胞的数量及HIV RNA均无差异。HIV/HCV合并感染时，情况相对复杂，也有研究发现，HIV/HCV合并感染时，HCV RNA等对HIV感染者的免疫学或病毒学方面影响并不明显[6]。

本实验中HIV/HCV合并感染与HIV/AIDS单纯感染组之间的HIV RNA、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4/CD8的差异不显著，HCV RNA与HIV RNA，CD4+T细胞，CD8+T细胞，CD4/CD8几乎不相关，与临床经验及其他研究结论不相符[7]。目前多数学者对HCV的感染是否可加快HIV发展为AIDS的进程还存在争论[8]。

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Discussing viral load levels after HIV/AIDS merges HBV/HCV infection and its relationship with T lymphocytes

ZhangRuyi,YouJing△,YangWeibo,RaoShaofeng

(DepartmentofInfectious,theFirstAffiliatedHospitalofKunmingMedicalUniversity，Kunming，Yunnan650032,China)

ObjectiveTo explore the viral load levels after HIV/AIDS merges HBV/HCV infection and its relationship with T lymphocytes.MethodsHIV RNA,HBV DNA,HCV RNA,CD4+T lymphocyte frequency,CD8+T lymphocyte frequency,CD4/CD8 measured in HIV/AIDS simple infection group,mixed HIV/HBV infection group and mixed HIV/HCV infection group.Analyze relationship of T lymphocyte and HIV RNA,the correlation of HBV DNA/HCV RNA,HIV RNA,CD4+T lymphocyte frequency,CD8+T lymphocyte frequency,CD4/CD8.ResultsCD4+T lymphocyte frequency of HIV/AIDS simple infection group,mixed HIV/HBV infection group and mixed HIV/HCV infection group showed negative correlated with their respective group′s HIV RNA(P<0.05);CD8+T lymphocyte frequency of HIV/AIDS simple infection group and mixed HIV/HBV infection group showed negative correlated with their respective group′s HIV RNA(P<0.05);CD4/CD8 of HIV/AIDS simple infection group,mixed HIV/HBV infection group and mixed HIV/HCV infection group show negative correlated with their respective group′s HIV RNA(P<0.05).ConclusionT lymphocyte of HIV/AIDS patients drop faster,leading to high viral load of HIV RNA,HBV DNA and accelerating HIV disease progress with HBV infection.T lymphocyte of HIV/AIDS patients with HBV infection drop faster than with HCV infection.

hepatitis B virus;hepatitis C virus;HIV/AIDS;HIV RNA;T lymphocyte

张茹薏(1987-)，住院医师，硕士，主要从事病毒性肝炎及艾滋病研究，现在在云南省第一人民医院工作。△

，E-mail:jingyoukm@126.com。

论著·临床研究

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.07.015

R512.91；R392.3

A

1671-8348(2016)07-0912-03

2015-09-12

2015-11-20)