2014年湖北省秭归县人民医院细菌耐药性监测

龚 萍， 龚 莲， 王廷波， 郑 勇， 张爱群， 何锦屏， 金晓花， 梅雪峰

2014年湖北省秭归县人民医院细菌耐药性监测

龚 萍1， 龚 莲2， 王廷波1， 郑 勇1， 张爱群1， 何锦屏1， 金晓花3， 梅雪峰4

目的 了解2014年湖北省秭归县人民医院临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法 采用纸片扩散法（K-B法）对细菌作药物敏感性试验，以2014年版CLSI标准判断结果，采用WHONET 5.6软件统计分析。结果 总计1 338株细菌，革兰阳性菌和革兰阴性菌分别占27.2% 和72.8%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌耐甲氧西林菌株检出率分别为30.4%和66.7%，肺炎链球菌青霉素敏感、中介和耐药菌株各占64.9%、24.3%和10.8%。葡萄球菌和肺炎链球菌中未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株；屎肠球菌出现1株万古霉素耐药株。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感，但耐药菌株亦已出现。大肠埃希菌和克雷伯菌属产超广谱β 内酰胺酶的检出率分别为58.3%和31.3%。大肠埃希菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为0和0.4%；肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均为1.7%；鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为19.3%和32.1%；铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药率为0.9%和1.8%。广泛耐药（XDR）菌株5株，为鲍曼不动杆菌、弗氏枸橼酸杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌各1株。结论 革兰阳性菌（除屎肠球菌1株耐万古霉素外）未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株；革兰阴性杆菌对碳青霉烯类抗生素高度敏感，但耐药菌株亦已出现 。随着医疗设施不断完善和提高，拟将2级医院纳入全国细菌耐药监测网，夯实网底建设，防止细菌耐药性加剧。

细菌； 耐药监测； 药敏试验； 多重耐药菌

细菌的耐药性具有地域特点，不同地区或同一地区不同医院细菌的耐药性会有所差异。及时了解本地区和本医院细菌的耐药状况，对指导临床合理应用抗菌药物有重要意义。本研究分析湖北省秭归县人民医院2014年细菌耐药性监测数据，了解临床分离菌及其对常用抗菌药物的耐药现状，为临床经验用药提供参考。现将结果报道如下。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1细菌 本院2014年1月1日—12月31日临床分离株，剔除同一患者相同部位的重复菌株，按统一方案进行药敏试验。

1.1.2抗菌药物 抗菌药物纸片，OXOID公司商品。β内酰胺酶测定用头孢硝噻吩纸片、超广谱β内酰胺酶（ESBL）确认试验用的头孢噻肟-克拉维酸和头孢他啶-克拉维酸纸片均为BBL公司商品，青霉素和万古霉素E试验条为法国生物梅里埃公司商品。

1.1.3培养基 药敏试验培养基为MH琼脂，肺炎链球菌及各组链球菌用含5%脱纤维羊血MH琼脂。流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌用嗜血杆菌属培养基（HTM）加SR158营养补充剂。上述培养基和试剂均为英国OXOID公司商品。

1.2方法

1.2.1药敏试验 采用CLSI 2014年版标准推荐的纸片扩散法（K-B法）进行药敏试验，E试验条测定青霉素对肺炎链球菌的MIC。纸片法结果对万古霉素不敏感的革兰阳性球菌，采用万古霉素E试验进行确认。质控菌株为金黄色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923、大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853、肺炎链球菌ATCC 49619、流感嗜血杆菌ATCC 49247和ATCC 49766。

1.2.2β内酰胺酶的检测 采用头孢硝噻吩纸片测定流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的β内酰胺酶。按CLSI 2014年版推荐的方法筛选和确证大肠埃希菌、克雷伯菌和奇异变形杆菌产ESBL菌株。

1.2.3青霉素不敏感肺炎链球菌的检测 采用青霉素E试验条测定其MIC值，脑膜炎和非脑膜炎株分别按CLSI 2014的标准判定为青霉素敏感、中介或耐药株。

1.2.4耐万古霉素肠球菌（VRE）检测 经万古霉素纸片法测定结果为非敏感株者，用万古霉素E试验条测定MIC值来判定敏感、中介或耐药株。

1.2.5广泛耐药（XDR）菌株的定义 由于本院未做黏菌素和替加环素的药敏试验，XDR株的标准设定为：对除黏菌素和替加环素外其他抗菌药物全耐药者。碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE）定义为对亚胺培南、美罗培南或厄他培南中任一种药物耐药者。

1.2.6统计分析 试验结果采用WHONET 5.6软件进行数据处理和分析。

2　结果

2.1标本来源及分布

1 338株临床分离菌中，革兰阳性菌占27.2% （364株），革兰阴性菌占72.8%（974株）。分离自住院患者95.9%（1 283株），门诊患者1.9%（25株），外院2.2%（30株）。菌种来源标本依次为痰55.2%、伤口脓液19.8%、尿液7.6 %、咽拭子6.5%、血液1.8%、各种无菌体液（胆汁、胸腹水、脑脊液等）4.0%、粪便0.6%、其他标本4.5%。1 338株中排名前10位的细菌分别是大肠埃希菌20.6% （276株）、金葡菌16.7%（224株）、肺炎克雷伯菌13.4%（180株）、流感嗜血杆菌8.6%（115株）、铜绿假单胞菌8.3%（111株）、鲍曼不动杆菌4.3% （57株）、阴沟肠杆菌3.1%（41株）、肺炎链球菌2.8% （37株）、产酸克雷伯菌1.9%（26株）、屎肠球菌1.5% （20株）。

2.2革兰阳性菌对抗菌药物的耐药性

2.2.1葡萄球菌属 耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）菌株的检出率分别为30.4%（68/224）和66.7%（20/30）；金葡菌D试验阳性21.1%；甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）除对青霉素的耐药率高达93.5%，对红霉素、克林霉素和阿奇霉素的耐药率约50%，对其他绝大多数抗菌药物的耐药率均＜10%。MRSA菌株对各类受试抗菌药物的耐药率较MSSA显著为高。除对β内酰胺类抗生素耐药率高外，MRSA菌株对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、克林霉素和红霉素的耐药率亦较高，但对利福平和甲氧苄啶-磺胺甲唑的敏感率仍为74.2%和66.2%。与金葡菌相似，MRCNS对抗菌药物的耐药率均高于敏感株。葡萄球菌属中均未发现对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺耐药株，见表1。

表1　葡萄球菌属对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 1 Susceptibility of Staphylococcus isolates to antimicrobial agents （%）

2.2.2肠球菌属 43株肠球菌属细菌中粪肠球菌17株，屎肠球菌20株，分别占39.5 %和46.5%，其他肠球菌6株。粪肠球菌对绝大多数所测试抗菌药物的耐药率均显著低于屎肠球菌，但对高浓度链霉素的耐药率高于屎肠球菌（50.0%对 33.3%），粪肠球菌对氨苄西林和呋喃妥因的敏感率较高，分别为100%和85.7%，但屎肠球菌对两药的敏感率均在40.0%以下。粪肠球菌和屎肠球菌未发现耐利奈唑胺及替考拉宁的菌株，屎肠球菌出现1株万古霉素耐药株，经E试验确诊MIC为 32 mg/L，见表2。

2.2.3肺炎链球菌 肺炎链球菌37株中儿童分离株22株，成人15株，37株均为非脑膜炎分离株，经青霉素E试验检测，青霉素敏感、中介和耐药分别为64.9%、24.3%和10.8%。结果显示，对红霉素、克林霉素、阿奇霉素耐药率较高。未发现万古霉素、替考拉宁耐药菌株，见表3。

2.3革兰阴性杆菌对抗菌药物的敏感率和耐药率

表2　肠球菌属对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Susceptibility of Enterococcus isolates to antimicrobial agents （%）

2.3.1大肠埃希菌和克雷伯菌属 2种菌中产ESBL菌株检出率分别为58.3%和31.3%。儿童患者分离的菌株中未检出产ESBL的产酸克雷伯菌。XDR株检出共5株，为鲍曼不动杆菌、弗氏枸橼酸杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌各1株。CRE大肠埃希菌1株，肺炎克雷伯菌3株。卡他莫拉菌19株，产β内酰胺酶菌株的检出率84.2%。大肠埃希菌对阿米卡星、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、亚胺培南和美罗培南耐药率均＜10%；对喹诺酮类药物的耐药率近50%；对呋喃妥因的敏感率为84.4%。肺炎克雷伯菌对左氧氟沙星、头孢吡肟、亚胺培南和美罗培南耐药率低；对头孢唑林、头孢呋辛和头孢噻肟的耐药率为32.8%～41.4%。阴沟肠杆菌对阿米卡星、氟喹诺酮类、碳青霉烯类和酶抑制剂复方制剂的耐药率低；对头孢唑林的耐药率高达87.2%。鲍曼不动杆菌除对亚胺培南和头孢哌酮-舒巴坦的耐药率＜30%外，对其他抗菌药物的耐药率为32.1%～94.6%。铜绿假单胞菌对氨基糖苷类、环丙沙星、头孢他啶、头孢吡肟、碳青霉烯类和酶抑制剂复方制剂的耐药率较低，见表4。

表3　肺炎链球菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 3 Susceptibility of Streptococcus pneumoniae strains to antimicrobial agents （%）

表4　革兰阴性杆菌对临床常用抗菌药物的耐药率和敏感性Table 4 Susceptibility of gram-negative bacilli to commonly used antimicrobial agents （%）

2.3.2 流感嗜血杆菌 115株菌株中，产β内酰胺酶菌株在儿童和成人检出率为15.4%（12/78）和13.5%（5/37）。 对头孢他啶、头孢吡肟，亚胺培南、美罗培南敏感率均为100%。对甲氧苄啶-磺胺甲唑耐药率成人和儿童分别达到55.6%和59.1%，见表5。

表5　流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 5 Susceptibility of Haemophilus influenzae strains to antimicrobial agents （%）

3　讨论

2014年临床分离到1 338株细菌，革兰阳性菌占27.2%，革兰阴性菌占72.8%， 从前10位临床分离菌株所占比率看，我院流感嗜血杆菌（8.6%）、肺炎链球菌（2.8%）分离率较高。这些菌株主要来源于我院儿科与呼吸内科，这2个科室与微生物室交流最多，检验标本采集规范送检及时。我院临床标本中呼吸道标本居第1位，高达55.2%，与其他报道相仿［1-2］，本院血液标本占1.8%、各种无菌体液（胆汁、胸腹水、脑脊液等）占4%。本院分离菌株95.9%以上集中在住院部，医院需要加强管理，应定期对临床各个科室采取各种形式的培训，宣传微生物检验标本规范采集方法及意义，认识到微生物培养对降低抗菌治疗失败风险的益处。

本次调查中我院MRSA和MRCNS检出率分别为30.4%和66.7%。都低于2013年CHINET监测报告［3］。除万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺和青霉素外，MRSA对所测试抗菌药物的耐药性显著高于MSSA。MRSA对所有β内酰胺类抗生素耐药，对红霉素和克林霉素的耐药率也高达91.2%，对阿奇霉素的耐药率达到91.7%。国外有关MRSA和社区获得性MRSA感染治疗的指南和文献均推荐克林霉素作为治疗用药之一［4-5］，但从本院2014年的监测数据来看MRSA对克林霉素的耐药率高于90%，2011年CHINET细菌耐药监测数据显示MRSA对克林霉素的耐药率达67.5 %［6］，2013年为55.9%［3］，据此认为，克林霉素不适合我国MRSA感染的经验治疗。MRSA 对利福平（74.2%）和甲氧苄啶-磺胺甲唑（66.2%）敏感。本次监测中未检出对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。粪肠球菌对绝大多数所测试抗菌药物的耐药率均显著低于屎肠球菌，但对高浓度链霉素的耐药率达50%，这可能与感染严重程度和是否常联合氨基糖苷类抗生素用药相关。粪肠球菌未发现耐万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁的菌株，屎肠球菌中出现1株万古霉素耐药株，经E试验确诊MIC为32 mg/L。

肺炎链球菌是引起儿童和成人社区获得性肺炎的主要病原菌。红霉素及其他大环内酯类抗生素曾对肺炎链球菌有良好抗菌活性，特别是阿奇霉素、克拉霉素，兼具对非典型病原体、流感嗜血杆菌的抗菌活性，被推荐为社区获得性肺炎及其他呼吸道感染经验治疗的一线用药。但随着大环内酯类抗生素的广泛应用，肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药率较高，本实验室数据显示肺炎链球菌对红霉素、克林霉素耐药率达91.4%和94.1%。甚至有报道儿童肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药率高达100%［7］。虽然肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药率较高，但由于其在肺组织浓度高，目前仍可作为经验用药的选择，但不宜单独用作为首选治疗，可与β内酰胺类抗生素联合应用或选择喹诺酮类药物［8］。

肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素高度敏感，本组资料显示，大肠埃希菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为47.4%和40.6%。大肠埃希菌是泌尿系感染最主要的病原菌，临床上经验性治疗泌尿系感染时往往会选择环丙沙星或左氧氟沙星；此外，在农牧业等其他领域中喹诺酮类药物的滥用情况亦不容忽视，过度的不合理使用可能是导致大肠埃希菌在我国对喹诺酮类药物高耐药的主要原因。铜绿假单胞菌的检出率在不发酵糖革兰阴性杆菌中占据首位。铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌是ICU中常见分离菌，可能与近年来插管、机械通气等侵袭性技术的广泛应用有关。

另外，本研究中还检出耐碳青霉烯类抗生素菌株和XDR菌株，后者全来源于外科，可能与本院外科医师的用药习惯有关，因此用药习惯应规范，外科手术后的护理质量需提高，并且应加强消毒隔离措施及手卫生，避免因交叉感染引起医院感染暴发。

本组资料中，儿童和成人流感嗜血杆菌中产β内酰胺酶菌株的检出率为15.4%和13.5%。对头孢他啶、 头孢吡肟、 亚胺培南、 美罗培南敏感率达100%，对甲氧苄啶-磺胺甲唑耐药率成人和儿童分别达到55.6%和59.1%，β内酰胺酶多为质粒介导的TEM型和少量的ROB型，可灭活氨基青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素［9］，导致产酶株对其耐药。未检出β内酰胺酶阴性氨苄西林耐药菌株。

二级医院收治的多为社区感染患者，处于抗菌药物使用的前沿，鉴于其特殊性，拟将二级医院纳入全国细菌耐药监测网网底建设中，夯实网底数据，不断提高二级医院微生物室综合业务能力，加强实验室管理，合理规范使用抗菌药物，为类似级别医院防止细菌耐药性产生提供可参照资料。

［1］沈智勇，宋有良，王谦，等.安徽省铜陵地区 2011 年细菌耐药性监测［J］.中国感染与化疗杂志， 2013，13（6）：450-455.

［2］朱德妹，汪复，胡付品，等.2010 年中国 CHINET 细菌耐药性监测［J］.中国感染与化疗杂志，2011，11（5）：321-329.

［3］胡付品，朱德妹，汪复，等. 2013年中国CHINET细菌耐药性监测［J］. 中国感染与化疗杂志， 2014，14（5）：370-378.

［4］陈春辉，李光辉.美国感染病学会治疗成人及儿童甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌感染临床实践指南［J］.中国感染与化疗杂志，2011，11（6）：428-435.

［5］桑福德. 抗微生物治疗指南［M］. 新译42版. 中国协和医科大学出版社：53-56.

［6］胡付品，朱德妹，汪复，等. 2011年中国CHINET细菌耐药性监测［J］. 中国感染与化疗杂志，2012，12（5）：321-329.

［7］李明，周湧，吴润转，等. 2009年广东省东莞市太平人民医院细菌耐药监 测［J］.中 国 感 染 与 化 疗 杂 志，2011，11（5）：358-363.

［8］康悦，吴菊芳，徐晓刚，等.成人耐大环内酯类抗生素肺炎链球菌的实验研究［J］.中国感染与化疗杂志，2012，12（1）：54-58.

［9］倪语星，韩立中.抗菌药物临床应用—从抗菌谱到临床处方［M］.上海科学技术出版社，2006：58-59.

Surveillance of bacterial resistance in Zigui People's Hospital， Hubei Province in 2014

GONG Ping， GONG Lian， WANG Tingbo， ZHENG Yong， ZHANG Aiqun， HE Jinping， JIN Xiaohua， MEI Xuefeng. （Department of Laboratory Medicine， Zigui People's Hospital， Zigui Hubei 443600， China）

Objective To investigate the distribution and resistance profile of bacterial pathogens isolated in Zigui People's Hospital， Hubei Province in 2014. Methods Antimicrobial susceptibility was determined by Kirby-Bauer test. The results were interpreted according to the Clinical and Laboratory Standards Institute breakpoints 2014 edition and analyzed by using WHONET 5.6. Results Of the 1 338 strains isolated， gram-negative bacteria accounted for 72.8% and gram-positive bacteria accounted for 27.2%. Overall， 30.4% of Staphylococcus aureus strains and 66.7% of coagulase negative Staphylococcus isolates were resistant to methicillin. For the Streptococcus pneumoniae strains， 64.9%， 24.3%， and 10.8% were susceptible， intermediate and resistant to penicillin， respectively. None of S. aureus and S. pneumoniae strains was found resistant to vancomycin， teicoplanin or linezolid. Only one strain of Enterococcus faecium was resistant to vancomycin. Enterobacteriaceae isolates were still highly susceptible to carbapenems. Extended spectrum beta-lactamases （ESBLs）were produced in of 58.3% of E. coli strains and 31.3% of Klebsiella isolates. Only 0 and 0.4% of E. coli isolates were resistant to imipenem and meropenem， and 1.7% of K. pneumoniae strains were resistant to imipenem and meropenem. In addition， 19.3% and 32.1% of the A. baumannii strains were resistant to imipenem and meropenem， respectively； 0.9% and 1.8% of Pseudomonas aeruginosa strains were resistant toimipenem and meropenem. Five strains were extensively-drug resistant， including A. baumannii， Citrobacter freundii， Escherichia coli， K. pneumoniae， and P. aeruginosa. Conclusions All gram-positive bacteria， excluding one strain of E. faecium， were not resistant to vancomycin， teicoplanin or linezolid. Gram negative bacilli strains were highly susceptible to carbapenems. A few carbapenem-resistant strains are emerging.

bacteria； resistance surveillance； antimicrobial susceptibility testing； multi-drug resistant bacteria

·简讯·

R378

A

1009-7708（2016）01-0061-06

10.16718/j.1009-7708.2016.01.014

1. 湖北省秭归县人民医院检验科，湖北秭归 443600；

2. 湖北省秭归县梅家河乡卫生院；

3. 湖北省秭归县杨林桥镇卫生院；

4. 湖北省秭归县两河镇卫生院。

龚萍（1976—），女，学士，主管技师，从事基层医院微生物室检验工作。

龚萍，E-mail： 794037050@qq.com 。

2015-01-27

2015-07-01