不同产地黄芩中黄芩苷含量的测定

鞠康　刘耀武　王甫成

（亳州职业技术学院　安徽亳州　236800）



不同产地黄芩中黄芩苷含量的测定

鞠康刘耀武王甫成

（亳州职业技术学院安徽亳州236800）

文章以甘肃、山东、内蒙古、山西黄芩为材料，比较不同产地黄芩药材中黄芩苷的含量。依据《中国药典》2010年版第一部中所制定的黄芩测定方法，采用HPLC法，加之以甲醇-水-磷酸（比例：47：53：0.2）为流动相，且流速设定为1ml/min，检测波长280 nm，柱温25℃，测定黄芩中黄芩苷含量。结果显示：不同产地黄芩药材中黄芩苷的含量有很大差异，其中山东黄芩比其他产区黄芩中的黄芩苷含量高。由此得出山东产黄芩有效成分含量普遍较高的结论。

黄芩；HPLC；黄芩苷

黄芩具有清热燥湿、凉血解毒、安胎的功效。［1］黄芩产地较多，主要以甘肃、山东、内蒙古、山西为主，由于加工方法不一，所以其主要成分含量有一定差别，本文依据用HPLC法测定不同产地黄芩中黄芩的含量，为临床用药及市场采购提供理论依据。

一、黄芩概述

（一）来源与形态特征。黄芩来源于唇形科植物黄芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根。［2］采摘时间为春、秋二季，去除多余的根茎须和泥沙，晾晒后除去多余的粗皮，晒干。黄芩为多年生草本植物，高大约为30到70cm。主根粗大并略呈现圆椎形状，外皮显褐色。单叶对生，卵状披针形或线状披针形，长1到4cm，宽0.4到1.2cm，其先端或钝或急尖，基部圆形，全缘，具睫毛，背面有腺点，光滑或仅在中脉有短毛；具短柄或无柄。总状花序顶生，花偏向一边；花萼钟状，被白色长柔毛，先端五裂；花冠蓝紫色，二唇形，长度约2cm，表面覆盖有白色短柔毛。

（二）黄芩的生物学特性。黄芩易生长在石砾质或粘土质的山坡泥土中。在干燥的荒山坡、土岗及草原型石砾质山地的向阳处较为多见。同时黄芩的生长喜温和气候，喜光，耐旱、耐寒。其所生长的土质多为中性或者偏碱性且土质疏松、肥沃的土壤中。［3］黄芩的生长发育：其种子一般具有60% -80%的发芽率，在适当季节播种后，当所处地温有15-18℃且湿度足够时，大概10天前后就能长出幼苗，30到50天出齐。首年黄芩幼苗植株生长速度比较缓慢，每年6月份开花，花期很长，可延续2～3个月。果实于每一年的9月份成熟，10月份的时候其地上部分会首先逐渐枯萎，翌年4月则会返青生长，以此生长周期约3～4年以上，其根、头中心部逐渐枯朽，最终成为枯芩。

（三）产地分布。黄芩产于冀、辽、陕、鲁、蒙、黑等地区。早期黄芩产量最多的省份是山西，现以蒙及东三省产量为最大，河北承德所产黄芩质量为最优。较之于野生黄芩，家种黄芩主要分布在山东、山西、内蒙古、陕西、甘肃、东北等地区。

二、材料与方法

（一）仪器设备与实验材料。

1.仪器设备。

表1　仪器设备

表2　实验材料

3.实验药材与性状特征。

实验药材。取近期采集产地为内蒙古、甘肃、山东、山西的黄芩样品。采用薄层鉴别的方式确定本次试验所选用的为唇形科类植物黄芩干燥的根部。

药材性状。呈圆锥形状，扭曲，长8至25cm，直径1至3cm。表皮为棕黄色或深黄色，且会有少量的疣状细根痕，上部相对比较粗糙，并且有扭曲的纵皱或不规则的网纹形状，下部可见顺纹和细皱较为明显。质硬而且比较脆，容易折断，断面处可呈现黄色，中间有红棕色，气微，味苦。药材性状见下图：

（二）试验方法。

1.色谱条件与系统适应性实验［4］。C18色谱柱（4.6mm× 250mm）、黄芩苷标准品、含量测定以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇-水-磷酸（其比例为47：53：0.2）；紫外检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。流速为1ml/min，柱温25℃，对照品、供试品进样量均为10μm。

2.供试品溶液的制备。分别精密称取黄芩样品（粗粉：过二号筛）0.3002g、0.3006g，分别置具塞锥形瓶中，加入70%乙醇40ml，在水浴锅上以89.5摄氏度的温度加热回流3小时，取下，置通风橱下冷却，用漏斗滤过，滤液置于100ml容量瓶中，用少量70%乙醇分数次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇定容至刻度，摇匀。再精密移取1ml，置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，最后用0.45μm微孔滤膜滤过，即得。

3.标准品溶液的制备。精密称取在60℃减压干燥4h后的黄芩苷对照品1.650mg，放入25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.066mg的溶液，即得。

4.测定法。根据上述色谱条件分别精密吸取黄芩苷对照品溶液与黄芩供试品溶液各10μl，依次注入高效液相色谱仪中，根据图谱，依据外标法分析数据，计算结果，即得。

5.精密度与重复性试验。取同一浓度黄芩苷标准品溶液，按照含量测定方法及色谱条件进行测定，重复5次测定峰面积，黄芩苷RSD平均值为0.12%，该方法精密度高，具有较高的可靠性。

重复性：取对照品溶液连续进样5针，峰面积的RSD为0.12%（标准规定：应不大于2.0%）；理论板数：3100（标准规定：应不低于2500）；分离度：2.1（标准规定：应大于1.5）。

6.数据处理。数据处理采用EXCEL统计分析软件进行处理和计算，以平均值来表示。

三、实验结果与分析

（一）黄芩苷对照品含量图谱。

图1　黄芩苷含量图谱Figure1　baicalin contentin the map

（二）不同产区黄芩样品黄芩苷含量图谱。

图2　山东黄芩黄芩苷含量图谱Figure2　shandong scutellaria baicalin contentin map

图3　山西黄芩黄芩苷含量图谱Figure3　scutellaria baicalin contentin shanxi

图4　内蒙古黄芩黄芩苷含量图谱Figure4　scutellaria baicalin contentin InnerMongolia

图5　甘肃产黄芩黄芩苷含量图谱Figure5　gansu scutellaria baicalin content

以同样的色谱条件分析黄芩苷标准品和供试品，出峰时间为横坐标，峰高为纵坐标，绘制含量图谱。图1峰面积测得值为40.4009，图2峰面积测得值为29.5742，图3峰面积测得值为26.7127，图4峰面积测得值为20.9028，图5峰面积测得值为17.4801。数据记录如表3所示。

表3　不同产地黄芩样品中黄芩苷的含量

四、结论

该实验整个过程围绕中国药典2010年版一部中规定的方法，采用高效液相法测定黄芩药材中黄芩苷的含量，方法既简单、可靠，又可快速鉴别区分不同产地的黄芩药材的含量高低，具有较好的精密度和准确性，有利于全面控制药材质量，促进其制剂研究水平和药效质量控制的全面提高。中国药典规定含黄芩苷（C15H22O10）不得少于9.0%。河北虽是黄芩的道地产地，由于亳州市场暂时无法取得样品，以后有机会会进一步作出研究。本次实验研究得出的结果如下：山东黄芩药材比其他产区黄芩中的黄芩苷含量高，其中山东产地黄芩中黄芩苷的含量最高为16.02%，山西产地黄芩中黄芩苷的含量为14.47%，内蒙古产地黄芩中黄芩苷的含量为11.14%，甘肃产地黄芩中黄芩苷的含量为9.02%。本次实验研究结果为将来进一步对研究黄芩提供有力的数据。

根据以上实验结果综合分析，得出如下结论：不同产地黄芩苷的含量高低顺序依次为山东>山西>内蒙古>甘肃。

［1］侯家玉，方泰慧.中药药理学［M］.北京：中国中医药出版社，2011：41－44.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典:2010年版一部［Z］．中国医药科技出版社，2010:282.

［3］谭仁祥.植物成分分析［M］.北京：科学出版社，2002：429.

［4］苏苏，王勇，燕吉敏，等.反相HPLC法测定不同产地黄芩中黄芩苷的含量［J］.复旦学报（自然科学版），2002，41（6）：714－716.

［5］郭东艳，王梅，唐志书.生黄芩煎煮过程中黄芩苷含量的动态变化规律及止血作用［J］.中国实验方剂学杂志，2010，16 （12）:145.

［6］马秀璟，袁成，李熔.高效液相色谱法测定退烧冲剂中黄芩苷的含量［J］.解放军药学学报，1999（5）：40－42.

［责任编辑郑丽娟］

Determination of the Content of Baicalin in Radix from Different Habitats

Ju KangLiu Yaowu Wang Fucheng
（Bozhou Vocational and Technical College，Bozhou，Anhui 236800）

Abstract:This paper，taking radix from Gansu，Shandong，Inner Mongolia，Shanxi as the materials，compared different origin of the content of Baicalin in radix，according to the Chinese Pharmacopoeia 2010 edition in the first set of Scutellaria baicalensis Georgi determination method by HPLC，coupled with methanol-water-phosphate（proportional to:47:53:0.2 mobile phase and the flow rate setting of 1ml/min，the detection wavelength was 280 nm，column temperature of 25 DEG C，in order to determine the content of Baicalin in Scutellaria baicalensis Georgi.The results showed that there was a great difference in the content of Baicalin in Radix and radix，and the content of Baicalin in Shandong was higher than that in other producing areas.The content of effective components of Radix Scutellariae in Shandong were generally higher in conclusion.

Radix；HPLC；Baicalin

R284.1

A

2095-0438（2016）08-0153-04

2016-03-11

鞠康（1983—），男，安徽亳州人，亳州职业技术学院讲师，硕士，研究方向：中药鉴定。

安徽省高等学校省级质量工程（2015msgzs）；亳州市中药质量控制与市场研究创新团队（2014）。