轮状病毒肠炎婴幼儿血清细胞因子与血清25-羟维生素D水平的研究

黄　伟，苏　颖，邵建英，孙　利，夏明月，李明丽



·临床医学·

·论著·

轮状病毒肠炎婴幼儿血清细胞因子与血清25-羟维生素D水平的研究

黄伟，苏颖，邵建英，孙利，夏明月，李明丽

目的观察轮状病毒肠炎(RVE)婴幼儿血清细胞因子与血清25-羟维生素D的水平及临床意义。方法选择轮状病毒肠炎68例婴幼儿作为研究组，同期体检的56名健康婴幼儿作为对照组，分别空腹采集静脉血，测定血清细胞因子及血清25-羟维生素D水平。结果研究组患儿血清白细胞介素(IL)-2、IL-6 、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)明显高于对照组(P<0.01)，研究组患儿血清25-羟维生素D明显低于对照组(P<0.05)。结论RVE患儿血清IL-2、IL-6 、TNF-α水平升高与血清25-羟维生素D水平降低具有相关性。

轮状病毒肠炎；细胞因子；25-羟维生素D；婴幼儿

轮状病毒肠炎(rotavirus enteritis,RVE)为婴幼儿常见腹泻病因之一，在发展中国家住院的婴幼儿急性腹泻约80%为轮状病毒(rotavirus,RV)感染所致[1-2]，常引起脱水和电解质紊乱，世界上每年有近100万儿童死于 RV 感染[3]，目前无特殊治疗方法，维生素D主要的生理功能是维持血钙和磷的正常浓度，近年来发现它具有重要的抗感染及免疫调节作用。笔者通过研究RVE患儿血清细胞因子与血清25-羟维生素D(25-OH-D)的水平，探讨两者的关系。

1　对象与方法

1.1研究对象将2008年1月至2012年12月来我院住院的68例确诊为RVE的婴幼儿，男38例，女30例，大便呈水样或蛋花汤样，每日数次至数十次，大便RV抗原呈阳性反应，大便常规镜检无异常，大便细菌培养均为阴性，年龄在4～24个月，同期健康体检的婴幼儿56例作为对照组，男32例，女24例，2组入选对象排除标准：(1)1个月内补充过维生素D；(2)1个月内用过糖皮质激素药物；(3)有严重肝肾疾病。2组在年龄、性别经χ2检验差异均无统计学意义。

1.2标本采集分别于清晨6:00-7:00抽取空腹静脉血2 ml，分离血清置于-20℃冰箱内保存，批量测定。对照组标本处理方法相同。

1.3血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6) 、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的检测采用DSL美国原装进口检测试剂盒用ELISA的方法测定，采用双抗体夹心法、上海卡努生物公司生产的试剂检测其血清25-OH-D。

1.4统计学处理结果数据采用SPSS 18.00软件处理，数据资料采用t检验与χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2　结果

2组血清细胞因子水平及血清25-羟维生素D水平，见表1。表明研究组患儿血清IL-2、IL-6、TNF-α明显高于对照组(P<0.01)，研究组患儿血清25-OH-D明显低于对照组(P<0.05)。

表1　2组血清IL-2、IL-6、TNF-α和25-OH-D水平(x±s)

注：IL为白细胞介素，TNF-α为肿瘤坏死因子-α，25-OH-D为25-羟维生素D

3　讨论

RVE常见于秋冬季节，故又名秋季腹泻，呈散发性或小流行，经粪-口途径传播，也可通过气溶胶形式经呼吸道感染而致病，潜伏期1～3 d，多发生于6～24个月婴幼儿，病初1～2 d常出现呕吐，随后出现腹泻，大便次数多，为黄色水样或蛋花汤样便带有少量粘液，无腥臭味。有研究表明RVE患儿的血细胞因子IL-2、IL-6 、TNF-α明显升高，并且与病情轻重成正相关性[4]，维生素D与感染的关系近年来成为临床感染基础研究的一个热点，维生素D具有明确的抗感染作用，可调控抑菌肽的表达，维生素D缺乏可使消化道、呼吸道等黏膜组成的部位感染风险明显增高[5-6]，国外研究表明维生素D有维持黏膜屏障完整功能，可维持表皮屏障的完整[7-8]。 Murphy等[9]用Caco-2单层细胞模型发现维生素D可影响连接黏附分子(junction adhesion molecule，JAM)的表达，修复肠黏膜通透性。Fujita等[10]应用RNA干扰及过表达策略，通过活体及离体实验证实维生素D使肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白Claudin-2和Claudin-12表达上调，认为上皮细胞存在维生素D依赖性的钙通道，对维持肠上皮屏障的功能具有重要作用。本研究RVE患儿的血清细胞因子水平明显高于健康儿童水平，维生素D水平明显低于健康儿童水平，并且研究时间覆盖时间长，除外了季节、光照时间等因素的影响，表明RVE患儿体内维生素D缺乏，但因维生素D在体内半衰期约为3周左右，RVE患儿住院时间较短未做补充维生素D治疗后的对比研究，有研究表明维生素D的生物学作用远远超过传统的范围，直接抑制IL-2、IFN的合成和分泌，抑制免疫球蛋白的产生[11]，本研究亦提示两者存在负相关性。

[1]杜嗣廉，郑明新.小儿胃肠病学[M].北京:人民卫生出版社,1996：72-80.

[2]陈树宝.儿科学新理论与新技术[M].上海:上海科技教育出版社,1997：407-414.

[3]Linhares AC, Bresee JS. Rotavirus vaccines and vaccination in Latin America[J]. Pan American journal of public health, 2000, 8(5):305-331.

[4]李建军，刘作义. 细胞因子与婴幼儿轮状病毒肠炎的关系[J]. 实用儿科临床杂志, 2003, 18(7):533-534. DOI:10.3969/j.issn.1003-515X.2003.07.017.

[5]Lynch S. Influence of infection/inflammation, thalassemia and nutritional statuson iron absorption[J]. Int J Vitam Nutr Res， 2007， 77: 217-223.

[6]Babb C, van der Merwe L, Beyers N, et al. Vitamin D receptor gene polymorphisms and sputum conversion time in pulmonary tuberculosis patients[J]. Tuberculosis (Edinb), 2007, 87(4):295-302. DOI:10.1016/j.tube.2007.03.001.

[7]Zouboulis CC, Baron JM, Böhm M, et al. Frontiers in sebaceous gland biology and pathology[J]. Exp Dermatol, 2008, 17(6):542-551. DOI:10.1111/j.1600-0625.2008.00725.x.

[8]Michalik L, Wahli W. Peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) in skin health, repair and disease[J]. Biochim Biophys Acta, 2007, 1771(8):991-998. DOI:10.1016/j.bbalip.2007.02.004.

[9]Murphy EF, Jewell C, Hooiveld GJ, et al. Conjugated linoleic acid enhances transepi the lialcal ciumtransportin human intestinal-like Caco-2 cells: an insight into molecular changes[J]. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 2006; 74: 295-301.

[10] Fujita H, Sugimoto K, Inatomi S, et al.Tight Junction Proteins Claudin-2 and -12 Are Critical for Vitamin D-dependent Ca2+Absorption between Enterocytes. Mol Biol Cell2008; 19: 1912-1921.

[11] 周文娣，张佩斌. 维生素D受体及维生素D作用进展[J]. 中国儿童保健杂志, 2008, 16(5):560-562. DOI:10.3969/j.issn.1008-6579.2008.05.026.

(本文编辑：甘辉亮)

Levels of cytokine and 25-hydroxyvitamin D in the blood of infants with rotavirus enteritis

HuangWei,SuYing,ShaoJianying,SunLi,XiaMingyue,LiMingli

(FirstHospitalofQinhuangdaoCity，Qinhuangdao066000，China)

ObjectiveTo explore levels of cytokine and 25-hydroxyvitamin D in the blood of infants with rotavirus enteritis and their clinical significance.Methods Sixty-eight infants with rotavirus enteritis were recruited as the research group, while 56 healthy infants who underwent normal physical checks were assigned as the control group. Fasting venous blood samples were collected for the detection of cytokine and 25-hydroxyvitamin D levels by RP-HPLC method.ResultsThe levels of IL-2, IL-6, TNF-α in the infants of the research group were significantly higher than those of the infants of the control group (P<0.01). The level of 25-hydroxyvitamin D of the study group was obviously lower than that of the control group (P<0.05).ConclusionThe elevated levels of IL-2, IL-6, TNF-α in the infants with rotavirus enteritis were associated with the decreased level of 25-hydroxyvitamin D.

Rotavirus enteritis; Cytokine; 25-hydroxyvitamin D; Infant

秦皇岛市科技计划项目(201401A126)

单位]066000河北 秦皇岛，秦皇岛市第一医院

R725.7

A

10.3969/j.issn.1009-0754.2016.04.018

2015-12-20)