胃癌组织中CDX2表达及其与KI67的关系分析

张秋杰



胃癌组织中CDX2表达及其与KI67的关系分析

张秋杰

目的探讨CDX2在胃癌组织中的表达情况及其与Ki67的相关性。方法收集新鲜胃癌组织标本50例，应用免疫组化检测CDX2和Ki67在胃癌组织中的表达情况。结果胃癌组织中的CDX2、Ki67的表达水平升高(P<0.05)；与分化程度、浸润深度、淋巴结转移、分期有相关性(P<0.05)，且分化不好、浸润深度T3-4、有淋巴结转移，分期较晚的胃癌组织，CDX2表达较低，Ki67表达较高，两者可能与胃癌的增殖分化有关，但两者的表达无明显相关性(P>0.05)。结论CDX2、Ki67在胃癌中高度表达，对于分析胃癌的恶性程度并判断预后有很高的临床价值。

胃癌；CDX2；Ki67

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.07.006

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1062～1064)

胃癌是全球常见的恶性肿瘤之一，其发病率逐年上升，研究证实，其发生发展与基因改变密切相关[1]。尾侧型同源转录因子-2(CDX2) 是1种核转录因子，在肠道特异性表达，发挥抑癌基因的作用[2]。Ki67蛋白反映细胞的增殖状态，存在于G1，S，G2和有丝分裂期细胞[3]。本实验通过应用免疫组织化学法检测在胃癌组织中CDX2、Ki67的表达变化情况，探讨CDX2、Ki67的表达与胃癌发展以及两者之间的关系。

1　材料与方法

1.1研究对象

选取2014年1月至2015年1月我院行胃癌根治性切除术的50例患者作为实验组，经病理检查证实，且未经放、化疗，取新鲜胃癌组织中最典型的癌旁组织(癌旁组织选自距癌组织边缘15 cm区域，切缘经病理证实未见癌细胞)，男性25例，女性25例，年龄31～81岁，平均(51.23±2.63)岁。患者的性别、年龄等方面比较，差异无统计学意义(P>0.05)。标本切除后立即取100 mg 标本,在-80 ℃超低温冰箱冻存备用。

1.2试剂与仪器

兔抗人CDX2、Ki67多克隆抗体、SP通用型试剂盒、DAB 试剂盒、多聚赖氨酸、柠檬酸抗原修复液、PBS、过氧化氢、二甲苯，无水乙醇，石蜡，苏木精，中性树胶(北京中杉金桥生物技术有限公司) 。

超净工作台(Formal205型，美国)；倒置显微镜(Olympus，日本)；组织包埋机(SAKURA，日本)；脱水机(TIYODA，日本)；超薄切片机(Leica，德国)；台式恒温振荡器(中国上海精宏实验设备有限公司)；电热风干燥箱(中国上海圣欣科学仪器有限公司)；计算机图像分析系统(惠普，美国)。

1.3免疫组织化学法

福尔马林液固定；脱水、透明；浸蜡、包埋；切片、贴片、烤片；脱蜡、脱水；高压热修复；阻断：3%过氧化氢孵育10 min；封闭：山羊血清封闭液室温孵育10 min；加一抗50 μl室温静置1 h；加辣根过氧化物酶标记的二抗50 μl静置10 min；加链霉亲和素-过氧化物酶50 μl静置10 min；显色；终止；苏木精复染，盐酸酒精分化；常规脱水、透明；封片；显微镜下观察。

1.4判断标准

以已知的该指标的免疫组化染色阳性片作为阳性对照，以PBS缓冲液代替一抗作阴性对照，HE 切片作对照观察。

CDX2、Ki67阳性结果判定以细胞核不染色，细胞膜或胞质内出现棕色或棕黄色颗粒为阳性染色，阴性(-)：染色细胞数≤10%；弱阳性(+)：染色细胞数11%～25%；阳性(++)：染色细胞数26%～50%；强阳性(+++)：染色细胞数>50%。以上均以(-)为阴性；(+)～(+++)为阳性。图像分析：计算机图像系统拍照，每张切片随机选取5个视野，并记录。

1.5数据处理

应用SPSS 17.0统计软件，单因素分析采用卡方检验，多因素分析采用Logistic回归模型，P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1胃癌组织及癌旁组织中CDX2、Ki67的表达

采用免疫组织化学法对胃癌组织、癌旁组织进行CDX2、Ki67的检测，结果发现，胃癌组织中CDX2阳性率为80%，Ki67阳性率为72%；癌旁组织CDX2、Ki67阳性率分别为16%、20%；胃癌组织中CDX2、Ki67阳性表达率明显较高，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1　胃癌组织及癌旁组织中CDX2、Ki67表达情况/例

2.2CDX2、Ki67表达与胃癌临床病理特征的关系

结果发现，CDX2、Ki67表达与性别、年龄、肿瘤大小、原发部位、Lauren分型、脉管癌栓无相关性(P>0.05)，与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、分期相关(P<0.05)，且分化不好、浸润深度T3-4、有淋巴结转移、分期较晚的胃癌组织中CDX2表达水平较低，Ki67表达水平较高，具体结果见表2。

2.3胃癌组织中CDX2与Ki67表达的相关性

结果发现，CDX2表达与Ki67表达无明显相关性(P>0.05)，具体结果见表3。

3　讨论

胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，威胁人类生命健康，其发生、发展与基因密切相关[4]。同源盒转录因子-2(CDX2) 是同源盒基因家族的一员，是肠道特异性转录因子，在细胞增殖、胚胎发育、组织分化等方面中起重要作用[5]。CDX2在正常胃黏膜无表达，在肠化生阳性表达，是胃黏膜肠化生的起始，进而诱导特异性基因表达，肠型上皮细胞分化形成[5]。Ki67是1种核抗原，存在于增殖细胞中，与细胞有丝分裂有关。Ki67>10%为阳性，>45% 为高表达，其表达和淋巴结转移、pTNM 分期、分化程度相关[6-7]。

在本研究中，选取在我院行手术切除的胃癌患者，采用免疫组织化学法对胃癌组织、癌旁组织进行CDX2、Ki67的检测，结果发现，胃癌组织中CDX2阳性率为80%，Ki67阳性率为72%；癌旁组织CDX2、Ki67分别为16%、20%；胃癌组织CDX2、Ki67表达明显升高；从胃癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、原发部位、分化程度、Lauren分型、浸润深度、淋巴结转移、分期、脉管癌栓方面，与胃癌组织中CDX2、Ki67的表达进行分析，结果发现，CDX2、Ki67表达与性别、年龄、肿瘤大小、原发部位、Lauren分型、脉管癌栓无相关性，与分化程度、浸润深度、淋巴结转移、分期有相关性，且分化不好、浸润深度T3-4、有淋巴结转移，分期较晚的胃癌组织，CDX2表达较低，Ki67表达较高，说明CDX2与Ki67的表达水平可能与胃癌组织的增殖分化有一定关系；对二者的相关性进行分析发现CDX2的表达水平与Ki67的表达无明显相关性。研究发现CDX2 蛋白表达强度随癌细胞由分化好到分化差逐渐减少[8]。随着胃癌浸润深度增加、淋巴结出现转移、分期增加，Ki67阳性表达率增加，与肿瘤恶性程度正相关[9]。

表2　CDX2、Ki67表达与胃癌临床病理特征的关系(例，%)

表3　胃癌组织中CDX2与Ki67表达的相关性/例

注：P>0.05。

综上所述，CDX2、Ki67在胃癌组织中均有高表达，二者的表达水平与分化程度、浸润深度、淋巴结转移、分期有相关性，分化不好、浸润深度高、有淋巴结转移，分期较晚的胃癌组织CDX2表达较低，Ki67表达较高，可能与胃癌组织的增殖分化有一定关系，但二者之间无相关性。在临床工作中，及时检测CDX2、Ki67的表达水平，对于分析胃癌的恶性程度并判断预后有很高的临床价值。

[1]王永辉,陈敬,沈朋,等.胃癌组织中Src激酶激活和HER2、Ki-67的表达及相关性研究〔J〕.中国组织化学与细胞化学杂志,2012,21(4):389-395.

[2]Baba Y,Nosho K,Shima K,et al.Relationship of CDX2 loss with molecular features and prognosis in colorectal cancer〔J〕.Clin Cancer Res,2009,15(14):4665-4673.

[3]王永辉,毛卫波,楼建,等.CD44V6、HER2及 Ki67在胃癌和癌旁组织中的表达及相关性分析〔J〕.浙江实用医学,2014,19(3):160-164.

[4]郁岩杰,赵治国,于泳,等.萎缩性胃炎伴肠上皮化生浅表隆起灶黏膜中Reg4和Ki67表达高于浅表凹陷灶黏膜〔J〕.肿瘤,2011,31(10):937-941.

[5]Kang JM,Lee BH,Kim N,et al.CDX1 and CDX2 expression in intestinal metaplasia,dysplasia and gastric cancer〔J〕.J Korean Med Sci,2011,26(5):647-653.

[6]夏加增,李建平,李承龙,等.Survivin和PTEN及Ki67蛋白在胃癌中的表达及其相关性〔J〕.中华实验外科杂志,2008,25(10):1344.

[7]Lazar D,Taban S,Sporea I,et al.Ki-67 expression in gastric cancer.Results from a prospective study with long-term follow-up〔J〕.Rom J Morphol Embryol,2010,51(4):655-661.

[8]Bai Y,Akiyam a Y,Nagasaki H,et al.Distinct expression of CDX2 and GATA4/5,development-related genes,in human gastric cancer cell lines〔J〕.Mo Carcinog,2000,28(3):184-188.

[9]Xiao LJ,Zhao S,Zhao EH,et al.Clinicopathological and prognostic significance of Ki-67,caspase-3 and p53 expression in gastric carcinomas〔J〕.Oncol Lett,2013,6(5):1277-1284.

(编辑：吴小红)

Analysis of Relationship between Expression of CDX2 and Ki67 in Gastric Cancer Tissues

ZHANGQiujie.

TheFirstPeople'sHospitalofJining,Jining,272011

ObjectiveTo investigate the expression of CDX2 in gastric cancer tissues and its correlation with Ki67.Methods50 cases of fresh gastric cancer tissues were collected,and CDX2 and Ki67 expression in gastric cancer tissues received immunohistochemical detection.ResultsExpression of CDX2 and Ki67 levels in gastric cancer tissues was higher(P<0.05);and it was correlated with differentiation degree,infiltration depth,lymph node metastasis,and staging(P<0.05),and gastric cancer tissues of poor differentiation,invasive depth T3-4 stages,with lymph node metastasis,and late staging had low CDX2 expression and high Ki67 expression,and it may be associated with gastric cancer proliferation and differentiation,but there had no significant correlation(P>0.05).ConclusionHigh expression of CDX2 and Ki67 in gastric cancer has high clinical value in the analysis of malignancy and prognosis of gastric cancer.

Gastric cancer;CDX2；Ki67

济宁市科技局项目[编号:济科字(2011)57号-二-50]

272011 山东省济宁市第一人民医院

R735.2

A

1001-5930(2016)07-1062-03

2015-07-21

2016-05-31)