常规剂量肝素锂和氟化钠抗凝对毛细管电泳法检测HbA1c的影响*

陈　群，黄　华，吴愿如，李立波，邓宝佳

(广东省深圳市龙岗区第二人民医院检验科　518112)



常规剂量肝素锂和氟化钠抗凝对毛细管电泳法检测HbA1c的影响*

陈群，黄华，吴愿如，李立波，邓宝佳

(广东省深圳市龙岗区第二人民医院检验科518112)

摘要:目的探讨常规剂量的肝素锂、氟化钠抗凝剂对毛细管电泳法检测糖化血红蛋白(HbA1c)的影响。方法应用Capillarys 2 Flex Piercing毛细管电泳仪检测全血标本HbA1c浓度，以EDTA-K2抗凝标本的检测结果为对照，分别比较肝素锂和氟化钠抗凝标本检测结果的差异性。结果肝素锂、氟化钠抗凝标本分别与EDTA-K2抗凝标本比较，毛细管电泳法测定HbA1c浓度差异均无统计学意义(P>0.05)，且肝素锂、氟化钠抗凝标本HbA1c检测结果与EDTA-K2抗凝标本结果具有相关性(P<0.001)。结论使用常规剂量的肝素锂、氟化钠抗凝均未对毛细管电泳法检测HbA1c产生影响，常规剂量的肝素锂、氟化钠抗凝标本均适用于毛细管电泳法检测HbA1c。

关键词:肝素锂；氟化钠；抗凝；毛细管电泳；HbA1c

众所周知，糖化血红蛋白(HbA1c)是评价糖尿病血糖控制水平的首选指标。近年来，许多国家糖尿病学会和WHO推荐将其作为糖尿病的首选诊断标准，拓宽HbA1c的应用范围，更显其重要性。2012年，毛细管电泳法作为一种新的HbA1c检测方法被首次推出利用[1]。在方法学性能评价方面已有相关报道[2-4]。一些研究表明，该法对常见的异常血红蛋白抗干扰能力较好并可提示地中海贫血，有较理想性能，逐渐被临床应用。然而目前对该法所使用的全血标本在不同抗凝类型、贮存条件等方面影响因素研究尚未有报道。因此，本实验使用常规剂量肝素锂、氟化钠抗凝剂处理的标本对该法检测HbA1c是否产生影响进行初步探讨，以评价肝素锂、氟化钠抗凝标本的适用性。

1资料与方法

1.1一般资料收集2015年6～12月来自深圳市龙岗区第二人民医院门诊就诊糖尿病患者42例及非糖尿病健康体检者34例，共76例纳入研究者的EDTA-K2、肝素锂和氟化钠3种抗凝剂抗凝的全血标本；所有纳入研究者均被提前告知并征得本人同意。纳入研究者年龄28～71岁，平均(42.6±10.3)岁；糖尿病患者病程5～13年，平均(7.8±2.3)年；糖尿病患者中合并肾病者17例。

1.2方法采用毛细管电泳法检测全血标本HbA1c浓度，以EDTA-K2抗凝标本HbA1c检测结果为对照，分别比较肝素锂和氟化钠抗凝标本HbA1c检测结果的差异性，初步分析使用肝素锂、氟化钠抗凝对毛细管电泳法检测全血标本HbA1c浓度的适用性。

1.2.1标本采集深圳市保安医疗用品有限公司生产EDTA-K2抗凝2 mL真空采血管(抗凝剂浓度1.5 mg/mL)、肝素锂抗凝5 mL真空采血管(抗凝剂浓度15.0 U/mL)、氟化钠抗凝2 mL真空采血管(抗凝剂浓度1.5 mg/mL)；遵守采血操作规程，严格按照抗凝剂比例采集一定量的全血，要求无凝固。

1.2.2检测系统法国Sebia公司Capillarys 2 Flex Piercing毛细管电泳仪及配套的试剂(缓冲液批号22074、溶血素批号02094)、校准品(批号18034、19034)、质控品(批号27063、28063)。

1.2.3操作要求严格遵守各项标准操作规程操作进行；确保仪器处于良好状态，经过校准并确认质控在控；标本采集后1～2 h内完成检测，并且每份标本均进行重复测定2次取均值进行统计学处理。

2结果

2.13种抗凝标本HbA1c浓度检测结果分布情况本次研究所纳入评价标本的HbA1c浓度范围4.6%～11.5%，均有分布于正常和异常值各区间段范围，见表1。

表1　　毛细管电泳法重复2次测定3种抗凝各76份标本HbA1c均值结果

2.2肝素锂抗凝对HbA1c浓度检测的影响毛细管电泳法测定EDTA-K2和肝素锂2种抗凝标本HbA1c浓度分别为(6.112±1.734)%、(6.109±1.700)%，差异无统计学意义(P>0.05)；2种抗凝标本HbA1c浓度有相关性(r=0.997，P<0.001)。

2.3氟化钠抗凝对HbA1c浓度检测的影响毛细管电泳法测定EDTA-K2和氟化钠2种抗凝标本HbA1c浓度分别为(6.112±1.734)%、(6.135±1.712)%，差异无统计学意义(P>0.05)；2种抗凝标本HbA1c浓度有相关性(r=0.997，P<0.001)。

3讨论

Capillarys 2 Flex Piercing毛细管电泳仪检测原理是让带电的分子在特定pH值的碱性缓冲液中根据它们的电泳移动性进行高压分离，该方法具有很高的分辨率，通过使用碱性pH缓冲液，正常和异常(或变异体)血红蛋白按下列顺序检测出来，从阴极到阳极依次为：A2/C、E、S/D、F、A0、其他Hb(包括次要HbA1)及A1c，在血红蛋白所特有的吸收波长415 nm下，在毛细管的阴极端可以直接准确地检测，从而对HbA1c组分进行相对定量分析。

本研究从日常工作实际情况出发，分析常规肝素锂和氟化钠抗凝采血管采集标本对毛细管电泳法检测HbA1c的影响，从而发掘这项检测方法更多实用性特点。对所纳入的研究对象均经过筛选，选取各种糖尿病患者(考虑纳入研究者年龄构成、病程长短及兼顾是否并发其他疾病)的标本，HbA1c浓度在各正常和异常值区间段范围均有分布，同时不超出Capillarys 2 Flex Piercing毛细管电泳仪检测线性，在一定程度上满足用于干扰评价的标本浓度取值合理性[5-9]。

本次研究发现，与厂家建议使用抗凝剂EDTA-K2抗凝标本比较，使用常规剂量的肝素锂和氟化钠抗凝时，毛细管电泳法检测HbA1c结果与EDTA-K2抗凝标本检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)，且与EDTA-K2抗凝标本检测结果具有相关性(P<0.001)，表明肝素锂和氟化钠对毛细管电泳法检测HbA1c未造成干扰，这2种抗凝剂抗凝标本可适用于毛细管电泳法检测HbA1c。

在日常工作中，肝素锂、氟化钠是日常主要抗凝剂用于临床生物化学项目检测标本的抗凝，本次研究发现肝素锂、氟化钠抗凝适用于毛细管电泳法检测HbA1c，对于糖尿病患者需要同时检查临床生物化学项目和HbA1c浓度时均可避免多采血，特别是对于老年患容易接受，也便于采血。这也表明毛细管电泳法检测HbA1c在一定程度上较传统方法更便于临床应用，更具优势。

参考文献

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[9]杨有业，张秀明．临床检验方法学评价[M]．北京：人民卫生出版社，2008：196-234．

* 基金项目：广东省深圳市龙岗区科技发展资金项目(YLWSF20150513163211044)。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.049

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)14-2013-02

(收稿日期：2016-01-22修回日期：2016-04-15)