一清胶囊抗炎作用实验研究

徐雄良，刘　浪，刘小均，岳　韵，张启余，柯　潇，郑　强

(成都康弘药业集团股份有限公司国家企业技术中心，成都



一清胶囊抗炎作用实验研究

徐雄良，刘浪，刘小均，岳韵，张启余，柯潇，郑强*

(成都康弘药业集团股份有限公司国家企业技术中心，成都

610036)

摘要：目的研究一清胶囊的抗炎作用，为其临床应用提供科学依据。方法采用二甲苯诱导小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导大鼠足肿胀，评价其抗炎作用。结果一清胶囊高(29.3 g·kg-1)、低(3.7 g·kg-1)剂量组均可显著减轻二甲苯致小鼠耳肿胀(P<0.05)；高(11.7 g·kg-1)、中(5.9 g·kg-1)、低(2.9 g·kg-1)剂量组均可显著抑制角叉菜胶致大鼠足肿胀(P<0.01)，其作用在致炎后1和3 h表现明显，且高剂量组在致炎后6 h内的作用强于醋酸泼尼松组。结论一清胶囊具有较好的抗炎作用。

关键词：一清胶囊；抗炎；二甲苯；角叉菜胶

一清胶囊由大黄、黄连和黄芩3味药组成[1]，收载于《中国药典》2015年版一部，具有清热泻火解毒、化瘀凉血止血的功效；临床上广泛用于治疗热毒证，如火毒血热所致的身热烦躁、目赤口疮、咽喉牙龈肿痛和大便秘结；咽炎、扁桃体炎和牙龈炎见上述证候者。

研究表明，大黄中的大黄素、大黄酸和黄芩中的黄芩苷及黄连中的小檗碱均具有抑制炎症因子的作用[2]。为了进一步研究一清胶囊的抗炎作用，本文采用二甲苯诱导小鼠耳肿胀和角叉菜胶诱导大鼠足肿胀的方法制造急性非特异性炎症模型和免疫性炎症模型，评价其抗炎作用，为临床应用提供科学依据。

1仪器与材料

1.1仪器足趾容积测量仪(PV-200型，成都泰盟科技有限公司)。

1.2试药一清胶囊(成都康弘制药有限公司，批号120514，规格0.5 g/粒，每克胶囊内容物相当于原生药7.32 g；临用前用质量浓度为10 g·L-1的阿拉伯胶配成所需混悬液备用)；醋酸泼尼松片(浙江仙琚制药股份有限公司，批号120479，规格5 mg/片，临用前用质量浓度为10 g·L-1的阿拉伯胶配成所需混悬液备用)；二甲苯(成都市科龙化工试剂厂，批号20080801)；角叉菜胶(Sigma公司，批号81K1556，规格25 g/瓶)。1.3动物SPF级雄性昆明种小鼠，体质量20±2 g，饲养于SPF级环境中，动物使用许可证号：SCXK(川)2008-19。雄性SD大鼠，体质量175±25 g，饲养于SPF级环境中，动物使用许可证号：SCXK(川)2008-19。均由四川省医学科学院实验动物研究所提供。

2方法

2.1对二甲苯致小鼠耳肿胀模型的影响取体质量为20±2 g的雄性小鼠50只，随机分为5组，即模型组、一清胶囊高、中、低3个剂量组(29.3，7.3和3.7 g·kg-1)和醋酸泼尼松组(10 mg·kg-1)，按照0.02 mL·g-1等容积灌胃给药，每日 2次，连续5 d，模型组则给予等体积质量浓度为10 g·L-1的阿拉伯胶溶液。末次给药40 min后，在各组小鼠左耳均匀涂布二甲苯，0.05 mL/只，造模后30 min处死小鼠，用直径为8 mm的打孔器取下左右耳片，称定质量，以左右耳片质量差作为肿胀度(mg)，计算肿胀抑制率(%)[3-4]。

2.2对角叉菜胶致大鼠足肿胀模型的影响取体质量为175±25 g的雄性SD大鼠50只，随机均分为5组，即模型组、一清胶囊高、中、低3个剂量组(11.7，5.9和2.9 g·kg-1)和醋酸泼尼松组(10 mg·kg-1)，按照0.01 mL·g-1等容积灌胃给药，每日2次，连续5 d，模型组则给予相同体积质量浓度为10 g·L-1的阿拉伯胶溶液。末次给药30 min后在大鼠左足皮下注射质量浓度为10 g·L-1的角叉菜胶溶液，0.1 mL/只，用足趾容积测量仪测量致炎前及致炎后1，2，3，4，5和6 h时大鼠的左足体积(mL)，将大鼠致炎后体积与致炎前体积相减计算大鼠的足肿胀度(mL)，计算肿胀率(%)，进行统计学分析[3，5]。

3结果

3.1对二甲苯致小鼠耳肿胀模型的影响二甲苯造模后30 min处死小鼠，用直径为8 mm的打孔器取下左右耳片，称定质量，以左右耳片质量差作为肿胀度(mg)进行统计分析，结果一清胶囊高(29.3 g·kg-1)、低(3.7 g·kg-1)剂量组均可显著减轻二甲苯致小鼠耳肿胀(P<0.05)，与模型组比较差异有统计学意义；与模型组相比，一清胶囊中剂量组(7.3 g·kg-1)差异虽无统计学意义，但其肿胀度仍小于模型组;与醋酸泼尼松组比较，一清胶囊高、中、低剂量组差异无统计学意义(P>0.05)，结果见表1。

表1一清胶囊对二甲苯致小鼠耳肿胀模型的影响

Tab.1 The effect of Yiqing Capsules on the ear swelling induced by xylene in mice

±s，n=10)

注：与模型组比较*P<0.05，**P<0.01；与对照组比较#P<0.05，# #P<0.01;-表示无该项指标。

3.2对角叉菜胶致大鼠足肿胀模型的影响以致炎前及致炎后足体积的变化值计算大鼠的足肿胀度(mL)，以肿胀率(%)进行统计学分析，结果一清胶囊高(11.7 g·kg-1)、中(5.9 g·kg-1)、低(2.9 g·kg-1)3个剂量组均可抑制角叉菜胶致大鼠足肿胀(P<0.05)，其作用在致炎后1和3 h表现明显(P<0.01)，与模型组比较差异有统计学意义；与醋酸泼尼松组比较，一清胶囊高剂量组(11.7 g·kg-1)差异无统计学意义(P>0.05)，表明一清胶囊高剂量组有较强的抗炎作用。从肿胀率(%)可知，一清胶囊高剂量组在致炎后6 h内的作用甚至强于醋酸泼尼松组，且抗炎作用也较持久，结果见表2。

表2一清胶囊对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响

Tab.2 The effect of Yiqing Capsules on the paw swelling caused by carrageenan in rat

±s，n=10)

注：与模型组比较*P<0.05，**P<0.01；与对照组比较#P<0.05，# #P<0.01;-表示无该项指标。

4讨论

炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应。在炎症反应过程中，受伤组织及血液可产生并释放具有致炎作用的细胞因子、炎性介质和趋化因子等多种化学活性物质，从而引起局部红、肿、热、痛等临床表现。PGE2、TNF-α和IL-1β是重要的炎症细胞因子，可促进炎症反应和组织损伤，释放出多种炎症介质，引起炎症反应。

邓翀[6]、赖先荣等[7]研究结果表明，一清胶囊药效物质基础主要来源于方中大黄、黄芩和黄连的主要有效成分，如大黄中的蒽醌衍生物(大黄酸、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚和芦荟大黄素等)，黄芩中的黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和黄芩新素等，以及黄连中的小檗碱等。罗兰等[8]利用UPLC-ESI-MS-MS与FTIR技术对一清胶囊化学成分进行了分析，鉴定出的12个化合物中有5个化合物(芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素和大黄素甲醚)来自于大黄，3个化合物(黄芩苷、汉黄芩苷和汉黄芩素)来自于黄芩，4个化合物(表小檗碱、黄连碱、巴马汀和盐酸小檗碱)来自于黄连，且10批一清胶囊样品红外光谱的吸收曲线基本无区别，特征明显，几乎所有峰都可以重现。

大黄能显著改善急性危重症患者的全身炎症反应综合征，大黄水提物能明显降低小鼠腹腔毛细血管通透性的增加，不同程度地减轻大鼠足跖肿胀，明显抑制二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀[9]。大黄中的大黄素对炎症早期的渗出、毛细血管通透性的增加和白细胞游走等具有较好的对抗作用，有明显抑制急性炎症反应的作用[10]。进一步证明了以大黄水提物为主要组分的一清胶囊具有较好的抗炎作用。

黄芩能显著影响白细胞的多种功能，对过敏性炎症渗出有一定的抑制作用[11]，其超声提取物和回流提取物适宜剂量(75 mg·kg-1)对急性炎症均有显著的抑制作用[12]，黄芩中黄酮类化合物对多种炎症介质有抑制作用[13]。吴再旺等[14]实验研究表明，10个不同产区的黄芩均有抑制小鼠耳肿胀作用，黄芩苷、千层纸素、A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和黄芩素均具有抑制与炎症相关的IL-1β转化酶的作用[15]。黄芩提取物通过抑制淋巴细胞功能和炎症介质的产生而发挥抗炎作用。黄芩和黄连是清胃黄连丸发挥抗炎药效的重要物质基础，研究结果表明，清胃黄连丸可以显著抑制醋酸致小鼠毛细血管通透性增高，抑制蛋清所引起的大鼠足肿胀和二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀[16]。

黄连水煎液对二甲苯致小鼠耳肿胀和对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加均有一定的抑制作用[17]。黄连中的小檗碱能显著降低炎性组织中PGE2的含量，具有明显的抗炎作用[18]。

根据文献[19-21]报道，每粒(0.5 g)一清胶囊中黄芩苷的含量为28.32～36.99 mg，小檗碱的含量为7.53～12.50 mg，汉黄芩苷的含量为1.06～4.36 mg，来自于大黄5个组分的总含量为1.83～2.62 mg。因此，一清胶囊的抗炎物质基础均来源于方中大黄、黄芩和黄连的主要有效成分。

另外，一清胶囊的抗炎作用机制之一可能与抑制炎症介质NO参与炎症反应过程有关。体外抗炎实验[8]表明，一清胶囊在1～100 μmol·L-1范围内能显著降低细胞上清液中NO的含量，且具有一定的剂量依赖性。

总之，一清胶囊方中的3味中药均具有较好的抗炎作用。实验结果表明，一清胶囊对二甲苯诱发的小鼠耳肿胀及角叉菜胶诱发的大鼠足肿胀具有明显的抑制作用，且呈一定的量效关系，其抗炎作用机制可能与降低TNF-α，IL-1β和PGE2的表达以及细胞上清液中NO的含量有关，以上研究结果与其清热解毒的功效相关，为一清胶囊的临床应用提供了药效学基础。

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作者简介：徐雄良，男，博士

*通信作者：郑强，男，博士

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.04.020

中图分类号：R965

文献标志码：A

文章编号：1004-2407(2016)04-0392-03

(收稿日期：2015-11-30)

Anti-inflammatory effects of Yiqing Capsules

XU Xiongliang，LIU Lang，LIU Xiaojun，YUE Yun，ZHANG Qiyu，KE Xiao，ZHENG Qiang*

(National-recognized Enterprise Technology Center，Chengdu Kanghong Pharmaceuticals Group Limited Company，Chengdu 610036，China)

Abstract:Objective To evaluate the pharmacodynamics of Yiqing Capsules related to anti-inflammatory effect，and to provide the scientific evidence for its clinical application. Methods Anti-inflammatory effects were studied by xylene induced ear swelling in mice and paw swelling caused by carrageenan in rat.Results Yiqing Capsules at high and low dose groups(29.3 and 3.7 g·kg-1) could apparently restrain the ear swelling induced by xylene in mice(P<0.05)； Yiqing Capsules at various dose groups(11.7，5.9 and 2.9 g·kg-1) could restrain the rat paw swelling induced by carrageenan(P<0.01) and appeared obviously after 1 and 3 h.Yiqing Capsules at high dose group could restrain the rat paw swelling induced by carrageenan stronger than prednisone acetate dose group within 6 h.Conclusion Yiqing Capsules could eliminate toxins effect.

Key words：Yiqing Capsules；anti-inflammatory；xylene；carrageenan