ICP-AES法检测清开灵注射液中多种无机元素含量

胡京红，周海燕，王淑艳，黄　翔，王　娟

(1.北京中医药大学基础医学院，北京　100029；2.亚宝北中大(北京)制药有限公司,北京　101300；3.北京中医药大学中药学院，北京　100102)



ICP-AES法检测清开灵注射液中多种无机元素含量

胡京红1，周海燕2，王淑艳1，黄翔1，王娟3

(1.北京中医药大学基础医学院，北京100029；2.亚宝北中大(北京)制药有限公司,北京101300；3.北京中医药大学中药学院，北京100102)

摘要：目的建立同时测定清开灵注射液中多种无机元素含量的方法。方法用微波消解法对样品进行预处理，采用电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP-AES)对10个不同批次清开灵注射液中的无机元素进行含量测定。结果通过各元素含量测定方法学考察，确立了仪器的检出限及各元素的最佳检测波长，10批次清开灵注射液各元素相对标准偏差为0.16%～4.90%，加标回收率在92.0%～117.0%之间。结论该方法灵敏度高、可靠易行，满足清开灵注射液无机元素含量检测条件，初步确立其各元素含量范围。

关键词：清开灵注射液；ICP-AES；无机元素

清开灵注射液是北京中医药大学曹春林教授于1979年在《温病条辩》“安宫牛黄丸”的基础上研制而成的现代中药速效制剂，具有清热解毒、化痰通络、醒神开窍的功效，在中医治疗急重热症中发挥着不可替代的作用。目前，有关清开灵有机成分的研究已有大量报道，质量控制方法大多集中在有效成分(或指标性成分)的含量测定或指纹图谱研究方面[1-3]，而其无机微量元素的研究则鲜有报道。无机元素与有机成分之间具有相互协同、相互渗透、共同发挥药效的作用[4-5]，因此加强对中药制剂中无机元素的质量研究是对中药质量控制标准的有益补充。本文拟从无机元素含量检测的角度对临床应用广泛、不良反应较为突出的中药注射剂代表方剂清开灵注射液进行研究，应用ICP-AES方法对清开灵注射液中所含的无机元素进行分析，为其含量控制提供依据。

1仪器与试药

1.1仪器SPS8000电感耦合等离子体原子发射光谱仪(北京科创海光仪器有限公司)，仪器主要工作参数：入射功率：1.2 kW，冷却气流量：16 L·min-1，雾室气流量：0.8 L·min-1，辅助气流量：0.6 L·min-1，载气流量：0.4 L·min-1，积分次数：3 次；重复次数：1 次。MDS-6型微波消解仪(上海新仪化学科技有限公司)，微波消解程序为升压控制模式，消解功率与压力设置为5档，选定仪器工作参数见表1；2000D型超纯水机(北京长风仪器仪表公司)。

1.2试药清开灵注射液(亚宝北中大(北京)制药有限公司，批号012907，110103，110203，110204，110501，110702，111103，111202，111203，111204)，每批次取10份样品；硝酸(优级纯，北京化工厂)；超纯水(电阻率18.2 MΩ·cm-1)；高纯氩气(北京绿氧天罡科技开发有限公司)；对照品：Cu，Fe，Zn，Na，K，Ca，Mn，Mg，P，Cr，Pb，Ni，Cd等单元素对照品储备液，质量浓度均为1 000 μg·mL-1(中国计量科学研究院提供)，Al，Ba，Ti等单元素对照品储备液质量浓度均为 100 μg·mL-1(中国计量科学研究院提供)。

2方法

2.1对照品溶液的配制将Cu，Fe，Mn，Zn，Na，K，Ca，Mg，P等单元素对照品储备液按照质量浓度为0.00，0.50，1.00，5.00，10.00和20.00 μg· mL-1梯度配制成混合对照品系列溶液；Cr，Pb，Ni，Cd，Al，Ba，Ti 等单元素对照品储备液按照质量浓度为0.00，0.25，0.50，1.00，2.00和4.00μg·mL-1梯度配制成混合对照品系列溶液，对照品储备液用体积分数为1% 的硝酸逐级稀释。

2.2样品处理精密吸取清开灵注射液1 mL，置于消解罐中，加入4 mL硝酸溶液，旋紧顶盖，置于微波消解炉内按照表1消解程序微波消解。消解完毕，压力显示小于1 MPa 时，打开罐盖，将样品溶液放置通风橱内静置抽风，加热板赶酸至近干，加入2.5 mL硝酸溶液，用超纯水定量转移样品并定容到25 mL的比色管中，同时制备空白样品溶液，备用。

表1微波消解程序

Tab.1 The procedure of microwave digestion

步骤功率/W压力/MPa时间/s13000.330024000.612034001.012044001.512053002.0300

2.3样品的测定以10 mL·L-1的硝酸溶液作参比，通过对对照品溶液、试剂空白和样品溶液进行检测对比，选择灵敏度适中、稳定性好且光谱干扰少的谱线为该样品各元素的分析谱线。将系列对照品溶液进样，对各元素的对照品系列溶液进行测定，得各元素标准曲线，根据标准曲线分别对10批次清开灵注射液样品进行检测。

3结果

3.1标准曲线在测试条件下，依次对系列对照品溶液进行测试，仪器工作站绘制各元素曲线，其线性相关系数在0.999 5～1.000 0之间。

3.2仪器的分析谱线和检出限通过对对照品溶液、试剂空白和样品溶液进行扫描对比，综合分析3条谱线，选择1条灵敏度高、稳定性好且光谱干扰少的适合清开灵注射液样品分析的谱线；取空白溶液平行测定10次，以3倍空白溶液的标准偏差作为仪器检出限，低于此质量浓度的元素均为未检出，各元素分析的谱线和检出限见表2。

表2各元素的分析谱线和检出限

Tab.2 Analysis spectrum line and limit of detection

元素分析谱线/nm检出限/μg·mL-1元素分析谱线/nm检出限/μg·mL-1元素分析谱线/nm检出限/μg·mL-1Na588.9950.011Mn257.6100.0001Ba455.4030.001K766.4900.032Mg279.5530.0002Cr283.5630.002Ca393.3660.001Fe259.9400.0050Cd214.4380.033P213.6180.204Ti334.9410.0030Cu324.7540.003Al396.1520.025Pb220.3530.0310Ni231.6040.007Zn206.2000.003

3.3精密度与回收率将一定质量浓度的混合对照品溶液平行测定10次，用其相对标准偏差确定本实验方法条件下各元素测定的精密度。在样品中加入不同质量浓度的各元素对照品溶液，并按照1.2项下方法进行消解和测定，进行加标回收实验，各元素的精密度及回收率见表3。

表3各元素精密度和回收率数据

Tab.3 The results of the precision and recovery tests for each element

元素RSD/%回收率/%元素RSD/%回收率/%元素RSD/%回收率/%Na1.5692.0Mn1.0094.5Ba1.35101.2K4.46117.0Mg0.16100.8Cr1.7293.7Ca0.6497.5Fe1.9296.9Cd4.90116.8P3.40100.4Ti0.08105.0Cu1.64100.0Al1.1196.2Pb1.9099.4Ni1.3496.1Zn3.39103.4

各元素相对标准偏差在0.16%～4.90%之间，回收率在92.0%～117.0%之间，说明选定的仪器测试条件及方法可靠，适用于清开灵注射液中各元素测定。3.410批次清开灵注射液无机元素含量测定结果见表4。

表410批清开灵注射液元素含量测定结果

Tab.4 The determination results of trace element content in 10 batches of Qingkailing Injections

(n=10)

4讨论

清开灵注射液中含有人体必需的微量元素，其生物活性和药效与无机元素的含量高低有着密切的关系，研究这些无机元素各成分的比例及相互关系有重要的意义。无机元素与中药疗效间存在着密切的关系[6-8]，且不同类别功效的中药中无机元素的含量有明显差异，王健等[9]测定了368味中药的11种元素含量，发现所测得元素总量从多到少排序依次是：镇咳药，抗肿瘤药，祛痰药，降压药，抗菌药，抗病毒药，抗真菌药，镇静药，消炎药和镇痛药。对于中药材及中成药中无机元素的测定，可作为其质量控制标准中的一个重要指标。

本实验结果表明，清开灵注射液10个批次样品中各元素含量基本相近，其含量由高到低依次为Na、K、Ca、P、Zn、Al、Mn、Mg、Fe、Ti、Pb、Ba、Cr、Cd、Cu、Ni。其中锌、铝、锰、镁、铁等微量元素含量较高。据文献报道，铁、铜及其配合物具有明显的抗菌消炎作用[10]。由于清开灵注射液给药途径特殊，必须控制有毒重金属元素的含量，本实验测得重金属元素铅、镉、铜含量较低，有些批次未检出铅和镉，砷和汞在10批次中均未检测到，符合文献中的规定[11]：铅≤5.0 mg· kg-1，镉≤0.3 mg· kg-1，砷≤2.0 mg·kg-1，铜≤20 mg· kg-1，汞≤0.2 mg·kg-1，重金属总量≤20 mg·kg-1。

实验采用ICP-AES法对10个不同批次清开灵注射液无机元素进行含量测定，方法学考察显示各元素相对标准偏差为0.16%～4.90%，加标回收率在92.0%～117.0%之间，说明该方法具有较好的精密度和准确度，能满足清开灵注射液无机元素含量测定要求。本研究为有效监控清开灵注射液生产各环节中重金属元素的污染隐患及其质量标准的控制提供依据。

参考文献：

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[3]高凤阳.基于液质联用技术的清开灵注射液中栀子和金银花色素成分的研究[D].北京：北京中医药大学，2012.

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[11]中华人民共和国商务部.药用植物及制剂外经贸绿色行业标准[S].WM/T2-2004，北京:中国标准出版社出版，2005:1.

基金项目：北京中医药大学自主选题项目(编号：2011-JYBZZ-JS061)

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.04.015

中图分类号：R927.2

文献标志码：A

文章编号：1004-2407(2016)04-0376-04

(收稿日期：2015-09-28)

Determination of trace elements in Qingkailing Injections by ICP-AES

HU Jinghong1，ZHOU Haiyan2，WANG Shuyan1，HUANG Xiang1，WANG Juan3

(1.School of Preclinical Medicine，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China； 2.Yabao Beizhongda(Beijing) Pharmaceutical Limited Company，Beijing 101300，China； 3.School of Chinese Materia Medica，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，China)

Abstract:Objective To establish a method for the determination of a variety of inorganic elements in Qingkailing Injections simultaneously.Methods Qingkailing Injections of 10 different batches were dissolved by microwave digestion and then determined by inductively coupled plasma atomic emission spectrometry(ICP-AES).Results Under the established conditions，the recoveries were between 92.0%-117.0% of the 10 batches of Qingkailing Injections, and the detection relative standard deviations(RSD) were between 0.16%-4.90%.Conclusion The method is sensitive，reliable and suitable for the determination of inorganic elements in Qingkailing Injections.

Key words：Qingkailing Injection；ICP-AES；inorganic elements