Sysmex HST-302全自动血液分析系统复检规则的优化及验证

唐玉凤陈艳佩董美衬陈 勋郭慧娟尚晓泓*



Sysmex HST-302全自动血液分析系统复检规则的优化及验证

唐玉凤①陈艳佩②董美衬①陈 勋①郭慧娟①尚晓泓①*

［摘要］目的：以国际血液学复检专家组推荐的血细胞分析复检规则41条为基础，根据医院病源及病种特点，对检验科正在使用的血液分析仪复检规则进行评估并优化；在建立双向通讯的基础上，进一步完善适合科室实际工作的复检规则。方法：①连续收集2周应用Sysmex HST-302血液分析流水线检测的所有全血样本1072例，自动推片染色；②由2名形态学主管技师双盲法镜检，以国际血液学专家组制定的12条镜检阳性判断标准为依据，每人各分类200个白细胞、并同时观察红细胞、血小板的大小、形态及分布；③应用Labman软件，以镜检结果为标准，对第九套复检方案和建立双向通讯后的新方案进行比对，计算真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率及复检率。结果：①第九套复检方案的真阳性率为13.15%，假阳性率为11.94%，真阴性率为70.06%，假阴性率为4.85%，复检率为25.09%；②优化后复检规则的真阳性率为11.75%，假阳性率为7.65%，真阴性率为77.15%，假阴性率为3.45%，复检率为19.40%，前后均无确诊意义的血细胞漏检。结论：复检规则优化后仪器的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均有不同程度的提高，在保证工作质量的前提下可降低复检率，提高工作效率。

［关键词］血液分析仪；镜检；复检规则；复检率；细胞形态

唐玉凤，女，（1971- ），硕士研究生，副主任技师。中国中医科学院西苑医院检验科，从事临床检验及血液学检验研究工作。

［First-author’s address］ Department of Laboratory Medicine， Xiyuan Hospital， China Academy of Chinese Medical Science， Beijing， 100091， China.

Sysmex HST-302血液分析流水线由2台Sysmex XE-2100全自动血液分析仪、1台SP1000i全自动制片染色机和3条CVR流水线轨道传输系统组成。该系统将先进的流式细胞技术、荧光染色技术和电阻抗原理相结合，可极大提高工作效率，满足医患需求［1］。然而，在日常检测血常规样本中，当仪器提示核左移、幼稚细胞、原始细胞、异型淋巴细胞、有核红及血小板聚集等报警信息时，血液分析仪只能起到筛查作用［2］。在漏检率＜5%且具有确诊意义的重要参数不漏检的前提下降低复检率，减轻劳动强度，提高工作效率是检验工作者致力达到的目标。为此，本研究在参考国际41条复检规则和应用第九套复检方案（优化前复检规则）的基础上，以HST-302血液分析流水线安装双向传输系统为契机，对正在使用的血液分析复检规则进行优化并验证［3-4］。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

Sysmex HST-302血液分析流水线、Olympus光学显微镜、血液分析仪配套试剂、校准品和质控品均由日本Sysmex公司提供；使用的染液由珠海贝索公司提供。

1.2 血液样本来源

（1）优化前复检规则验证样本。收集中医科学院西苑医院自2014年8月5-18日连续两周所有用HST-302全自动血液分析流水线检测的血常规样本1072例，利用SP1000i推制标准血涂片，详细记录患者的姓名、性别、检测序号及就诊科室，所选病例覆盖医院所有临床科室。

（2）优化后复检规则验证样本。收集2014年11月18-24日连续一周所有用该流水线检测的血常规样本509例进行验证。

1.3 研究方法

（1）人员培训。参照“全国临床检验操作规程”和NCCLS H20-A规定的方法对参与人员进行培训［5-6］。确保仪器室内、室间质控均在控。

（2）样本检测。采集患者EDTA-K2抗凝全血2.0 ml，采血后2 h内使用Sysmex HST-302血液分析流水线检测血细胞的各项参数并完成推片染色。

（3）人工镜检。由2名血细胞形态学经验丰富的技师将推片机制备好的血涂片分别采用双盲法进行显微镜检查，以全国血液学复检专家组提出的12条血涂片镜检阳性判断标准为依据，记录阳性结果百分比［4］。

1.4 复检规则改进及优化

（1）在该流水线安装双向通讯软件后，在原有第九套规则的基础上增加本次检验结果与历史结果的比对功能，即如果此次检测结果与上次检测结果白细胞计数及白细胞分类（leukocyte differential count，DC）、血小板计数或红细胞计数在一周时间内变化＜15%，本次检测不再推片。

（2）调整仪器报警信号“Q-flag”的部分临界值，根据第九套复检方案统计的假阳性率，将幼稚粒、左移、有核红细胞（nucleated red blood cell，NRBC）的报警界限阈值由原来的100分别修改为120、130和150。

1.5 优化后复检规则验证

新规则初步建立完成后，为了验证复检规则的有效性，对收集的2014年11月18-24日连续一周所有用该流水线检测的血常规样本509例进行验证。

1.6 统计学方法

采用血液分析仪装载的Labman4.2软件进行数据统计学分析，以手工镜检为标准，统计该流水线应用第九套复检规则的真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率及涂片复检率。

2 结果

所收集的1072例样本覆盖了医院所有临床科室，并且血液科、肿瘤科和肺病科的样本分别不少于总样本量的10%，肾病科、风湿免疫科和感染科样本数分别不少于总样本量的5%，血常规样本的组成具有代表性。

2.1 复检规则优化后与优化前性能评价

复检规则优化后与优化前相比，假阳性率和假阴性率明显降低，阳性预测值和阴性预测值均有所升高，复检率由25.09%降为19.40%，优化前后性能评价及复检率结果见表1。

表1 对1072例样本复检规则优化前后的性能评价(%)

表2 复检规则优化前后1072例样本检测报警信息及假阴性的比较(%)

2.2 复检规则优化前后报警信息及假阴性比较

复检规则优化后与优化前相比，未成熟粒细胞和NRBC的报警率明显减低，白细胞（WBC）、平均红细胞体积（MCV）的报警率略减低，而血小板（PLT）聚集、血红蛋白（Hb）、红细胞（RBC）的报警率升高。复检规则优化后与优化前相比，除PLT聚集外，核左移、未成熟粒细胞、NRBC以及粒细胞毒性变化的假阴性率均有所降低，其比较结果见表2。

2.3 优化后的复检规则

（1）初诊患者执行的规则包括：①WBC、RBC、Hb、PLT和RET超出线性，即WBC＞440×109/ L、RBC＞8.0×1012/L、Hb＞250 g/L、PLT＞1000×109/L、Ret＞23%或Ret#＞0.72×109/L；②WBC、RBC、Hb、PLT、Hb＜60 g/L或＞180 g/ L及DC无结果或结果不全；③RBC IP Message出现红细胞凝集、铁缺乏、乳糜血、Hb异常、RBC溶血不良和RBC碎片等怀疑性报警；④Ret IP Message报警无结果和（或）异常散点图；⑤PLT IP Message任何计数结果伴PLT聚集报警，WBC IP Message出现WBC异常散点图，未成熟粒细胞、核左移、原始细胞及有核红细胞等报警；⑥WBC＜3.0×109/L或＞30.0×109/L，PLT＜70×109/L或＞1000×109/ L，Hb＜60 g/L或＞180 g/L；⑦MCV＜75 fl或＞105 fl，MCHC＞380 g/L或＜300 g/L且MCV＞80 fl；⑧RDW＞22%，Neut#＜1.0×109/L或＞20.0×109/ L，Lym#＞5.0×109/L，Mono#＞1.5×109/L，Eos#＞2.0×109/L，Baso#＞0.5×109/L；

（2）复诊患者执行的复检规则。在执行上述初诊患者复检规则前8项的基础上添加“复诊结果WBC、RBC、PLT、Neut#、Lymph#、Mono#、Eos#、Baso#”中的任意一项，7 d内升高或下降超过15%需复检。

2.4 优化后复检规则的验证

规则优化后通过509例样本进行验证，假阴性率为3.47%，复检率为19.23%，与新规则的复检率和假阴性率基本一致。

3 讨论

XE-2100是由日本Sysmex公司生产的五分类全自动血液分析仪，该仪器使用流式细胞术、荧光技术对细胞进行计数和分类，可为临床提供32个检测参数，每小时可检测150份样本，是具有检测精度高、速度快及功能强等优点的全自动五分类血液分析仪［7］。但无论多精尖的自动识别技术，均不可代替人工显微镜检查，只是不同档次的设备“筛选”水平不同而已，这是由于病理情况下的血细胞形态的多样性和异质性所决定［8-9］。因此，建立有效而合理的复检规则，及时筛检异常标本，避免漏检细胞数量和形态学异常同时保证工作效率，给临床诊断和治疗提供可靠的依据是检验工作人员必备的素质。

3.1 复检规则优化后复检率降低

本研究中优化前后复检规则的复检率及其性能评价，虽然优化前该规则符合国内外复检规则的基本要求，即假阴性是制定复检规则的关键参数，具有诊断意义的重要参数不能出现假阴性，其他参数假阴性率＜5%［10］的规定。但该规则假阳性率、假阴性率较高，为进一步降低复检率，缩短检验结果报告时间，将规则进行了优化并验证，新规则与优化前规则和Novis等［11］、洪骏等［12］的相关报道比较，复检率明显降低，其原因是新规则启用双向通讯后，规定了复诊标本WBC、DC、RBC和PLT绝对值在7 d内增加或减少15%之内，即使触犯复检规则也不再进行复检，减少了同一患者在一周内多次复查血常规且血常规结果变化不大时造成的重复涂片复检的次数，从而提高了工作效率。

3.2 复检规则优化后假阳性率和假阴性率明显降低

复检规则优化后，仪器报警“幼稚粒细胞？”的假阳性率由优化前的49例，明显降低至优化后的7例，优化前的假阳性较高，主要是由于未能与历史规则结合，肿瘤科、肺病科以及血液科的标本存在少量未成熟粒细胞，通过人工镜检分析发现其白细胞总数和分类计数与之前并无差别，启用双向通讯之后不再重复镜检。

XE-2100仪器为每个可疑报警信号（Q-flag）设置1个直方图来表达“是或否”，通常情况下，以100为仪器阴性和阳性的界限，该数值的大小反映了Q-flag报警的可信度，实验室也可以根据自己实验研究的结果对某个指标的Q-flag值进行适当的调整，以提高或降低某个指标的灵敏度［13］。因此，对优化前假阳性率过高的报警信息进行调整，将幼稚粒、核左移和NRBC的警示阈值由100分别调为120、130和150。经验证无血液病相关细胞漏检，降低了假阳性率，与吴军录等［14］、沈丹等［15］的研究结果一致。

假阴性主要是由于血小板聚集、核左移和未成熟粒细胞引起。通过分析该类样本的血涂片发现，尽管存在每张血涂片血小板聚集＞5堆，但是血小板计数均在生物参考区间内，而且与人工血涂片估计的血小板数量基本一致，并不影响临床诊断和治疗，可能是由于患者病情处于高凝状态、采血过程略有不顺利、采血后颠倒混匀略迟缓或混匀次数不够等原因所导致，加强对采血人员的培训和考核可以进一步降低假阴性率。至于核左移、未成熟粒引起的假阴性，通过人工分类，均为幼稚粒＜3%且多为肿瘤、手术和炎症引起，通过与临床沟通，该类漏诊并不影响临床诊疗，因此本研究制定的复检规则能够满足临床需要。

优化后结果显示，本研究设定的显微镜复检标准的特异度为90.9%，灵敏度为77.3%，特异度较高，灵敏度偏低，其原因可能与标本例数不够多或者与实验室设置仪器的参数有关。石玉玲等［16］报道，在具有双向通讯的前提下对已经明确诊断而临床未要求进行人工分类的血液科或肿瘤科样本不复检，复检率将会下降至10%左右，在以后的工作中应根据样本情况定期调整仪器设定参数，优化工作程序。

4 结论

本研究复检规则优化后，仪器的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均有不同程度的提高，尤其是在保证工作质量的前提下降低了复检率，提高了工作效率，表明优化后的规则符合临床检验工作的实际需求，具有科学性。因此，为了保证血细胞分析的质量，保证检测结果的准确性、可靠性，为临床提供更有价值的检测信息，减少误诊、漏诊，各检验科室必须要根据本科室所用分析仪的性能特点、医院规模、病种差异以及实验室常规工作的质量管理要求，制定相应的复检规则并在日常工作中不断地完善和改进。

参考文献

［1］林桢，张玉霞.Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪对血细胞形态异常警示功能的评价和分析［J］.检验医学与临床，2012，9（18）：2266-2268.

［2］乐家新，丛玉隆，王海，等.Sysmex XE-2100血细胞分析仪血涂片复检规则的应用研究［J］.现代检验医学杂志，2010，25（1）：30-36.

［3］刘成玉，罗春丽.临床检验基础［M］.5版.北京：人民卫生出版社，110-112.

［4］XE-2100血细胞分析复检标准制定协作组.Sysmex XE-2100自动血细胞分析和白细胞分类的复检规则探讨［J］.中华检验医学杂志，2008，31（7）：752-757.

［5］叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.3 版.南京：东南大学出版社，133-135.

［6］National Committee for Clinical Laboratory Standards.Reference leukocyte differential count（proportional） and evaluation of instrument methods：approved standard.NCCLS Document H20-A［S］.NCCLS，Wayne（USA），1992.

［7］陈晓玲，武锦彪，王文娟.Sysmex XE-2100血液分析仪临床应用评价［J］.实验与检验医学，2014，32（1）：26-29.

［8］丛玉隆.血细胞分析仪形态学分析技术与镜检筛选［J］.中华检验医学杂志，2014，37（1）：5-8.

［9］刘雄，李阑，李兵，等.ABX Pentra DF 120血细胞分析仪有核红细胞报警提示的可信度评估［J］.中国医学装备，2014，11（12）：54-55，56.

［10］卢兴国，丛玉隆.应重视和提升传统血液形态学检验水平［J］.中华检验医学杂志，2006，29（6）：481-482.

［11］Novis DA，Walsh M，Wilkinson D，et al. Laboratory productivity and the rate of manual peripheral blood smear review：a college of American Pathologists Q-Probes study of 95，141 complete blood count determinations performed in 263 institutions［J］.Arch Pathol Lab Med，2006，130（5）：596-601.

［12］洪骏，张薇，戴雯，等.Sysmex HST302全自动血液分析仪复检规则的建立［J］.临床检验杂志，2012，30（8）：564-566.

［13］乐家新.血细胞分析仪白细胞散点图分析及临床意义［J］.临床检验杂志（电子版），2012，1（1）：30-46.

［14］吴军录，姜华，戴燕，等.Sysmex XE-2100中Q-flags阳性报警临界值的调整与验证［J］.检验医学，2013，28（7）：585-589.

［15］沈丹，鲁家才，钟万芬.XE-2100白细胞分类报警信息阈值的探讨［J］.国际检验医学杂志，2014，35（6）：743-744.

［16］石玉玲，孙朝辉，杭建峰，等.用Laboman软件建立血液分析双向通信模式与复检规则的优化［J］.临床检验杂志，2013，31（1）：63-64.

①中国中医科学院西苑医院检验科 北京 100091

②涉县第一人民医院检验科 河北 邯郸 056400

［文章编号］1672-8270（2016）05-0034-04 ［中图分类号］ R-331

［文献标识码］A

DOI:10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.05.012

作者简介

收稿日期：2015-10-23

*通讯作者：shangxh2056@sina.com

Optimization and validation of hematology review criteria in Sysmex HST-302 hematology analyzer assembly line

TANG Yu-feng， CHEN Yan-pei， DONG Mei-chen， et al

China Medical Equipment，2016，13（5）:34-37.

［Abstract］ Objective: To optimize and validate hematology analyzer review criteria and establish a new hematology review criteria suitable for Clinical Laboratory of Xiyuan hospital based on bidirectional communication according to the 41 items of blood cell analysis review rules recommended by the International Consensus Group for Hematology Review. Methods: The 1072 whole blood samples collected randomly for two weeks were detected by Sysmex HST-302 hematology analyzer assembly line and pushed piece dyeing automatically. The samples were examined by two experienced morphological physician using double-blind microscopic examination based on the microscopy positive standard of the 12 items established by the International Consensus Group for Hematology Review. The two physicians analyzed 200 white blood cells respectively and observed the size， shape and distribution of the red blood cells and platelets. The false positive ratio（FP）， true positive ratio（TP），false negative ratio（FN）， true negative ratio（TN） and recheck rate were evaluated compared the ninth review criteria and the optimized ones by Labman software. Results: The FP， TP， FN， TN and recheck rate of the samples was 11.94%， 13.15%， 4.85%， 70.06%， 25.09% for the ninth review criteria and 7.65%， 11.75%， 3.45%， 77.15， 19.4% for the optimized ones respectively. None of blood cells of diagnostic value was missed for the two review criteria. Conclusion: The sensitivity， specificity， positive predictive value and negative predictive value are all increased， and recheck rate decreased using the optimized review criteria. The work efficiency improved obviously.

［Key words］Hematology analyzer； Microscopic examination； Review criteria； Recheck rate； Cell morphology