子痫前期患者血浆中Ghrelin 与VEGF、sFlt-1的相关性

王晓琴　　费　何　　陈亚萍　　张丽文

复旦大学附属上海市第五人民医院妇产科，上海　200240

子痫前期患者血浆中Ghrelin 与VEGF、sFlt-1的相关性

王晓琴费何▲陈亚萍张丽文

复旦大学附属上海市第五人民医院妇产科，上海200240

目的研究子痫前期患者血浆中Ghre1in水平与血管内皮生长因子（VEGF）和可溶性Fms样酪氨酸激酶-1 （sF1t-1）表达的相关性。方法 选取2013年12月～2015年6月于复旦大学附属上海市第五人民医院产科住院分娩的子痫前期患者36例、正常妊娠妇女36例为研究对象，分别设为子痫前期组和对照组。采用酶联兔疫吸附试验检测两组妇女血浆Ghre1in、VEGF、sF1t-1浓度，并分析其相关性。结果 与对照组比较，子痫前期组患者血浆中sF1t-1水平明显升高（P＜0.05），而VEGF水平明显降低（P＜0.05）。与对照组比较，子痫前期组患者血浆中Ghre1in水平明显升高（P＜0.05），Ghre1in与VEGF呈正相关（r=0.837，P＜0.05），与sF1t-1呈负相关（r=-0.797，P＜0.05）。结论 子痫前期患者血浆中Ghre1in水平与VEGF、sF1t-1具有相关性，提示Ghre1in可能通过影响内皮细胞功能参与子痫前期的发生、发展。

子痫前期；Ghrelin；血管内皮生长因子；可溶性Fms样酪氨酸激酶-1

［Abstract］Objective To investigate the association of Ghre1in with vascu1ar endothe1ia1 growth factor（VEGF）and serum so1ub1e Fms-1ike tyrosine kinase-1（sF1t-1）in patients with preec1ampsia.Methods 36 cases of preec1ampsia and 36 cases of normotensive pregnancy who given birth in the Department of Obstetrics of the Fifth Peop1e's Hospita1 of Shanghai，Fudan University from December 2013 to June 2015 were se1ected，and they were divided into preec1ampsia group and the contro1 group.Leve1s of Ghre1in，VEGF and sFIt-1 proteins in p1asma of two groups were detected by enzyme 1inked immunosorbent assay，the re1ationships between them were ana1yzed.Results Leve1s of sF1t-1 in preec1ampsia group were significant1y higher（P＜0.05），whereas the 1eve1s of VEGF in preec1ampsia group were significant1y 1ower than those in contro1 group（P＜0.05）.Compared with the contro1 group，1eve1s of Ghre1in in preec1ampsia group was significant1y higher（P＜0.05）.There was obvious1y positive corre1ation between 1eve1s of Ghre1in and VEGF in preec1ampsia group（r=0.837，P＜0.05），and negative corre1ation between 1eve1s of Ghre1in and sFIt-1（r=-0.797，P＜0.05）.Conclusion Ghre1in is c1ose1y corre1ated with 1eve1s of VEGF and sF1t-1 in preec1ampsia serum.Ghre1in may participate in the occurrence and deve1opment of preec1ampsia by inf1uencing the endothe1ia1 ce11 function.

［Key words］Preec1ampsia；Ghre1in；VEGF；sF1t-1

子痫前期是妊娠期特有的疾病，典型临床表现为妊娠20周后出现高血压、蛋白尿、水肿等，甚至出现全身多脏器功能衰竭，常常危害母婴生命健康。子痫前期的发病原因至今尚无定论，其中内皮损伤学说是研究热点之一［1］。近年大量研究表明，血管内皮生长因子（vascu1ar endothe1ia1 growth factor，VEGF）作为重要血管生长因子之一，在胎盘形成过程中参与胎盘血管网形成，与可溶性Fms样酪氨酸激酶-1（serum so1ub1e Fms-1ike tyrosine kinase-1，sF1t-1）、胎盘生长因子（p1acenta grouth factor，PIGF）共同作用，可能是子痫前期的发生、发展的重要因素［2］。

Ghre1in是由28个氨基酸残基组成的多肽，是生长激素释放激素受体的内源性配体。可显著抑制内皮素诱导的血管内皮损伤及血管收缩效应，与高血压、冠心病等心血管疾病有关［3］。在胎盘组织、微血管内皮细胞中均发现有Ghre1in的表达［4］，张玲等［5］发现Ghre-1in与妊娠期高血压疾病存在相关性。结合Ghre1in的生理作用及子痫前期的内皮细胞损伤学病因机制，猜想Ghre1in可能通过影响内皮细胞功能参与子痫前期的发病。故本研究分别检测了正常妊娠妇女与子痫前期患者血浆Ghre1in、VEGF、sF1t-1的浓度，并分析其Ghre1in水平与VEGF、sF1t-1的相关性。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取2013年12月～2015年6月复旦大学附属上海市第五人民医院（以下简称“我院”）产科住院分娩的子痫前期患者36例，作为子痫前期组，子痫前期的诊断标准参照第8版《妇产科学》：孕20周出现收缩压≥140 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）和/或舒张压≥90 mmHg，伴尿蛋白≥0.3 g/24 h或随机尿蛋白（+）。另随机选取我院同期体检的血压正常的产妇36例作为对照组。所有研究对象均为单胎产妇。排除标准：有原发性高血压、心脏病、糖尿病、慢性肾病、内分泌疾病、肝炎等病史者；有其他妊娠合并症及并发症者；4周内有急、慢性感染等疾病者。本研究经我院医学伦理委员会批准，参与研究者均知情同意并签署知情同意书。

1.2标本采集

清晨7：00～7：30抽取两组孕妇空腹肘静脉血5 mL，注入枸橼酸钠抗凝玻璃试管中，室温静置30 min，用常温离心机3000 r/min离心10 min，用无菌吸管将上层血浆转移至高压灭菌的1.5 mL EP管中，置于-80℃冰箱中保存，以备用于同批测定血浆中Ghre1in、VEGF、sF1t-1水平。

1.3实验方法

采用酶联兔疫吸附试验（ELISA）检测患者血浆Ghre1in、VEGF、sF1t-1浓度。ELISA试剂盒由上海康稳生物科技有限公司提供，具体操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。

1.4统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用X2检验；采用直线相关系数分析各变量间的相关性，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组孕妇一般情况比较

两组间的年龄、孕龄比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05），具有可比性。见表1。

表1　两组孕妇一般资料比较（±s）

表1　两组孕妇一般资料比较（±s）

组别　　例数　年龄（岁）　　孕龄（周）子痫前期组对照组36 36 29.55±5.62 28.81±3.71 37.12±2.25 38.31±1.84

2.2两组孕妇血浆Ghrelin、VEGF、sFlt-1浓度比较

子痫前期组血浆中Ghre1in水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；子痫前期组血浆中VEGF水平明显低于对照组，差异有高度统计学意义（P＜0.01）；子痫前期组血浆中sF1t-1水平明显高于对照组，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。见表2。

表2　两组血浆Ghrelin、VEGF、sFlt-1浓度比较

2.3Ghrelin与VEGF、sFlt-1的相关性分析

子痫前期患者血浆中Ghre1in水平与VEGF呈正相关（r=0.837，P＜0.05），子痫前期患者血浆中Ghre1in水平与sF1t-1呈负相关（r=-0.797，P＜0.05）。见图1～2。

图1　子痫前期组患者血浆Ghrelin与VEGF的相关性分析

图2　子痫前期组患者血浆Ghrelin与sFlt-1的相关性分析

3　讨论

子痫前期是一种妊娠期特有的多系统疾病，发病机制主要有以下学说：子宫螺旋小动脉重铸不足、炎症兔疫过度激活、血管内皮细胞受损、遗传因素、营养缺乏、胰岛素抵抗等，但至今病因未明，目前公认子痫前期是母体、胎儿、胎盘等多因素作用的结果。全身小动脉痉挛是子痫前期的基本病理、生理变化，大量研究提出了子痫前期发病可能为怀孕早期，即胎盘形成期间，某种因素导致子宫螺旋小动脉重铸不足，胎盘缺血、缺氧，导致胎盘释放多种胎盘因子进入母体血循环，促进血管内皮损伤［6］。其中血管内皮细胞受损贯穿了子痫前期发生、发展的整个过程，可以解释子痫前期的多种临床改变。

VEGF是一种特异的血管内皮细胞有丝分裂原，VEGF的表达异常参与了机体多种疾病的发病过程［7］，如肿瘤、心血管疾病、眼科疾病等。sF1t-1是胎盘来源的血管生长因子，由VEGF受体-1胞外域剪接而成，能影响血管壁的完整性和通透性，导致血管生成障碍［8］。在妊娠期间，VEGF及其受体在母体、胎儿、胎盘中均有表达，在血管形成、胎盘形成、胎盘植入，及维持内皮细胞功能方面起到了关键的作用［9-10］。大量研究发现子痫前期患者外周血中，sF1t-1水平显著增高而VEGF水平下降，且均发生于子痫前期症状出现前5周［11］。目前sF1t-1/PIGF已作为早期预测子痫前期的潜在生物标志物［12］。本研究检测发现子痫前期组患者静脉血清中sF1t-1水平较正常孕妇显著升高，VEGF水平较正常孕妇显著降低，差异有统计学意义，这与以往的研究［11］结论一致。VEGF作为重要血管生长因子之一，在妊娠期能够促进胎盘血管网形成及滋养细胞生长［13］，sF1t-1通过阻断VEGF的生物学活性，导致胎盘血管形成障碍［14］，两者相互作用，影响子痫前期的发生、发展。

Ghre1in除了具有强大的促生长激素释放的作用，还具有多种生物学功能，如能量平衡、调节代谢、细胞增殖和凋亡等［15］，Ghre1in及其功能性受体在下丘脑、垂体、卵巢（睾丸）、胎盘等机体多脏器上广泛发布，可能通过内分泌和/或旁分泌的方式参与下丘脑-垂体-性腺轴的调控。在未孕及蜕膜化的子宫内膜上有Ghre1in和GHS-R基因表达，Ghre1in可明显促进小鼠子宫内膜间质细胞的蜕膜化［16］。Tanaka等［17］研究发现，Ghre1in强烈表达于产前3个月的胎盘特别是绒毛膜滋养层细胞上，可能也参与人的子宫内膜的蜕膜化，提示Ghre1in可能参与胚胎植入和胎盘的发育。Makino等［18］研究发现在妊娠妇女中，Ghre1in水平与血压呈负相关；而正常非妊娠妇女Ghre1in与其血压之间却无相关性，这提示Ghre1in可能参与妊娠过程中机体血压的调节。本研究发现子痫前期患者血浆中Ghre1in水平明显高于正常孕妇，与张玲等［5］的研究结论一致，可能是机体的一种代偿性表现，这种代偿是对高血压的代偿，进而导致了VEGF的显著下降，或者是VEGF的显著下降导致了Ghre1in代偿性升高，还有待进一步探索，但研究结果提示Ghre1in可能参了子痫前期的发生、发展。

Ghre1in及受体在人的微血管内皮细胞中存在表达，且通过一系列的机制保护血管内皮细胞［19］。Ghre1in可促进组织中VEGF mRNA的表达，反义抑制Ghre1in可下调VEGF mRNA的表达［20］。本研究结果显示，子痫前期患者血浆Ghre1in水平与VEGF呈正相关，与sF1t-1呈负相关，三者之间的相关性符合其生物学特性。这与在子痫前期组Ghre1in明显升高，VEGF明显降低并不矛盾，子痫前期组中Ghre1in明显升高可能是机体的一种代偿性表现。因此可以推测，Ghre1in、VEGF可能在子痫前期的发生、发展过程中起保护因子的角色，而sF1t-1可能是“毒性因子”的角色。

笔者将在后续的研究中从细胞层面及子痫前期动物模型干预，从而进一步探讨Ghre1in与VEGF、sF1t-1在子痫前期这一疾病中的相互作用关系，深入研究Ghre1in在子痫前期的发生、发展中的作用机制。

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Correlation of serum Ghrelin with VEGF and sFlt-1 in patients with preeclampsia

WANG Xiaoqin FEI He▲CHEN Yapin ZHANG Liwen
Department of Obstetrics and Gyneco1ogy，the Fifth Peop1e's Hospita1 of Shanghai，Fudan University，Shanghai 200240，China

R714.24

A

1673-7210（2016）04（c）-0117-04

上海市闵行区自然科学研究课题资助项目（2014MHZ014）。

王晓琴（1990.10-），女，复旦大学上海医学院2014级妇产科专业在读硕士研究生；研究方向：产科子痫前期。

费何（1982.8-），女，硕士；研究方向：子痫前期及稽留流产的发病机制。

2016-01-16本文编辑：任 念）