脂代谢异常实证病人载脂蛋白E基因型分布及与血清胰岛素水平的关系

严　羽，任炜炜，蒋卫民



脂代谢异常实证病人载脂蛋白E基因型分布及与血清胰岛素水平的关系

严羽1，任炜炜1，蒋卫民2

1.南京中医药大学(南京 210029)；2.南京中医药大学附属医院

摘要：目的探讨中医辨证为实证的脂代谢异常病人载脂蛋白E(ApoE)基因型分布及与血清胰岛素水平的关系。方法采用全序列基因测序法检测119例中医辨证为实证的脂代谢异常病人和100名健康体检者ApoE基因型，并检测脂代谢异常病人空腹血糖、胰岛素水平，分析其与ApoE基因多态性的相关性。结果中医辨证为实证的脂代谢异常病人E3/3基因型及ε3等位基因频率显著低于健康体检者(P<0.01)，而E3/4基因型及ε4等位基因频率则显著高于健康体检者(P<0.01)；E3/4+E4/4型空腹胰岛素显著高于E2/2+E2/3型(P<0.05)。结论ε4等位基因可能是中医辨证为实证的脂代谢异常病人的易感基因，且含ε4等位基因者具有更高的空腹胰岛素水平。

关键词：脂代谢异常；载脂蛋白E；基因多态性；胰岛素；中医辨证

载脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)是脂蛋白的结构成分，其具有结合和运转脂质的功能，在血脂代谢中发挥重要作用[1]。在前期纳入的212例脂代谢异常病人的研究中发现，脂代谢异中医辨证特点与ApoE基因多态性可能相关[2]，同时ApoE基因差异分布在胰岛素抵抗病人中同样存在[3]。本研究进一步探讨中医辨证为实证的脂代谢异常病人ApoE基因分布及与血清胰岛素水平的关系。

1资料与方法

1.1研究对象119例中医辨证为实证的脂代谢异常病人全部选自江苏省中医院心脏科门诊和住院病人，其中门诊病人62例，住院病人57例。脂代谢异常诊断参照《中国成人血脂异常防治指南》2007年版[4]，男54例，年龄 34岁～78岁(50.3岁±12.7岁)，女65例，年龄 45岁～80岁(51.3岁±11.3岁)，所有病例均排除糖尿病糖尿病和继发性脂代谢异常病人。同时选择年龄、性别匹配的100名无血缘关系的健康江苏地区汉族人群(男52例，女48例)，年龄(50.2±15.1)岁。

1.2中医辨证分型标准参照《中药新药临床研究指导原则》提出的中医高脂血症诊断分型标准[5]。

1.3观察指标及检测方法采用全序列基因测序法检测ApoE基因多态性[3]。所有脂代谢异常病人空腹12 h后采集2 mL静脉血，由江苏省中医院检验科采用全自动生化仪测定空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素(FINS)水平。

2结果

2.1脂代谢异常实证病人及健康体检者ApoE表型分布及等位基因频率比较119例中医辨证为实证的脂代谢异常病人检出三种纯合子，分别为E2/2、E3/3、E4/4；三种杂合子分别为E2/3、E2/4、E3/4，100名健康体检者则未检出E2/2和E4/4纯合子，余纯合子和杂合子的检出则与实证病人相同，脂代谢异常病人及健康体检者ApoE基因分布符合Hardy-Weinberg(H-W)平衡法则，提示各组数据分布具有群体代表性。实证脂代谢异常病人E3/3基因型及ε3等位基因频率均显著低于健康体检者(χ2=19.58，P<0.01；χ2=24.01，P<0.01)，而E3/4基因型及ε4等位基因频率则显著高于健康体检者(χ2=14.59，P<0.01；χ2=24.6，P<0.01)，说明实证脂代谢异常病人较健康人群ApoE基因型及等位基因分布存在差异。详见表1。

表1　高脂血症实证病人及健康体检者ApoE表型分布及等位基因频率比较 　例(%)

2.2ApoE不同基因型实证脂代谢异常病人血清血糖、胰岛素水平比较因纳入样本有限，检出的部分基因型含量很低，参照相关文献[6]将意义相近的基因型进行合并分析，结果E3/4+E4/4基因型FINS水平与E3/3基因型比较差异无统计学意义，但显著高于E2/2+E2/3基因型(P<0.05)，提示FINS水平含ε4等位基因者显著高于含ε2等位基因者，而3组FBG比较差异无统计学意义。详见表2。

表2　不同ApoE基因型FBG、FINS水平比较(±s)

3讨论

脂代谢异常是动脉粥样硬化性疾病重要的风险因素，而胰岛素抵抗及代偿性的高胰岛素血症是高脂血症常合并伴有的代谢异常，两者的重叠发生则更进一步增加了心血管事件的风险。深入研究脂代谢异常和胰岛素抵抗两者复杂的相关性是临床积极控制代谢紊乱的迫切需求。作为脂蛋白配体、结构与功能蛋白的载脂蛋白E，由于不同等位基因所编码的3种异构体具有不同的与其自身受体及低密度脂蛋白(LDL)受体的结合能力，对脂质代谢发挥着重要影响[7]。国内不同种族人群研究结果均显示：高脂血症病人与同种族健康人群存在ApoE基因型及等位基因分布的差异[8]，而对江苏汉族胰岛素抵抗人群进行研究也发现，ApoE基因可能是胰岛素抵抗重要的易感基因[3]，Dembinskakiec等[9]研究结果提示在高胰岛素血症病人中E4/3基因型的频率明显高于正常胰岛素水平组。

脂代谢异常是西医学概念，中医古代文献一般以“膏浊”“血浊”“痰浊”记载，如《灵枢·逆顺肥瘦》有曰：“……此人重则气涩血浊”，中医临床辨证多从虚实论治，且以实证居多。脂代谢异常虽与后天饮食、运动等生活方式密切相关，但其发生与遗传背景也具有重要关系，探寻中医虚实辨证的遗传学基础也将对进一步提高中医的临床疗效具有重要意义。本研究采用了较以往免疫印迹、双相电泳等方法更为可靠的全序列基因测序法，检测119例中医辨证为实证的脂代谢异常病人及100名健康体检者ApoE基因型，并分析不同基因分布者血糖及胰岛素水平，结果可以发现含ε4等位基因的实证脂代谢异常者空腹胰岛素水平显著高于含ε2等位基因者，提示含ε4等位基因的中医辨证为实证的脂代谢异常病人可能具有更为明显的胰岛素抵抗特点。本研究为在冠心病、脂代谢异常、胰岛素抵抗等疾病表现为实证的病人中寻找共同的遗传学基础提供了可能，当然，由于时间有限，且测序法经费高昂等原因，纳入的总体样本含量偏小，因此得出的初步结论是否可靠还有待于今后大样本人群研究的证实。

参考文献：

[1]Saito H，Dhanasekaran P，Baldwin F，et al.Effects of polymorphism on the lipid interaction of human apolipoprotein E[J].J Biol Chem，2003，278(42)：40723-40729.

[2]蒋卫民，朱长乐，刘健，等.212例高脂血症患者中医证候特点与ApoE基因多态性的相关性分析[J].中华中医药杂志，2012，27(5)：1458-1460.

[3]顾萍，蒋卫民，王坚.载脂蛋白E基因多态性与高血压胰岛素抵抗的相关性研究[J].中华实用诊断与治疗杂志，2009，23(3)：214-216.

[4]中国成人血脂异常防治指南制定联合委员会.中国成人血脂异常防治指南[J].中华心血管病杂志，2007，35(5)：390-413.

[5]中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则[M].北京：人民卫生出版社，2002：85-89.

[6]Saidi S，Slamia LB，Ammou SB，et al.Association of apolipoprotein E gene polymorphism with ischemic stroke involving large-vessel disease and its relation to serum lipid levels[J].J Stroke Cerebrovasc Dis，2007，16(4)：160-166.

[7]Souza DR，Nakachima L，Biagioni RB，et al.Relevance of apolipoprotein E4 for the lipid profile of Brazilian patients with coronary artery disease[J].Braz J Med Biol Res，2007，40(2)：189-197.

[8]钱净，胡大春，赵晓丽，等.昆明地区汉族人群载脂蛋白E基因多态性频率分布及与高脂血症患者关系的研究[J].实验与检验医学，2010，28(2)：107-110.

[9]Dembiska-kiec A，Kawecka-Jaszcz K，Kwasniak M，et al.ApoE isoforms，insulin output and plasma lipid levels in essential hypertension[J].Eur J Clin Invest，1998，28(2)：95-99.

(本文编辑郭怀印)

基金项目：江苏省自然科学基金资助课题(No.BK20131456)；江苏省中医药局资助课题(No.LZ13030)；江苏高校优势学科建设工程资助项目(No.PAPD)

通讯作者：蒋卫民，E-mail：jwm0410@163.com

中图分类号：R589R259

文献标识码：B

doi：10.3969/j.issn.1672-1349.2016.11.022

文章编号：1672-1349(2016)11-1252-02

(收稿日期：2016-01-16)

·心血管病临床观察/研究·