白癜风初诊患者外周血细胞因子水平与临床分型、皮损面积的相关性研究

文昌晖

贵阳中医学院第一附属医院(贵阳 520100)



白癜风初诊患者外周血细胞因子水平与临床分型、皮损面积的相关性研究

文昌晖

贵阳中医学院第一附属医院(贵阳 520100)

【摘要】目的探讨白癜风初诊患者外周血细胞因子水平与临床分型、皮损面积的相关性。方法收集我院2009年7月—2013年7月4年间收治的初诊白癜风患者78例及健康志愿者37例，用ELISA检测外周血血清IL-6、IL-2, IFN-γ、TNF-α浓度并判断其与白癜风分型、皮损程度的相关性。结果与对照组相比，白癜风各分型组的IL-6、IL-2水平均升高，其中，散在性的升高幅度最为明显。IL-6及IL-2与皮损面积呈正相关，其相关系数分别为0.664及0.483，P值分别为0.021及0.014。结论IL-2及IL-6在白癜风的发病过程中起重要作用，且在不同的分型中的表达存在差异，并与皮损面积呈正相关。

【关键词】白癜风分型细胞因子相关性

白癜风是一种常见的后天获得性、进展性皮肤色素异常性疾病，表现为表皮黑素细胞功能进展性丢失和白斑形成[1]。全球发病率为10%～20%，且与人种、种族、社会经济因素无关。尽管其病因仍未阐明，但近年来的研究结果倾向于将其定位为自身免疫性疾病，而此类患者中并发桥本氏甲状腺炎、甲亢、1型糖尿病、肾上腺皮质机能减退的几率明显高于非白癜风患者[2-3]。 细胞因子(免疫分子)作为免疫系统的重要组成部分参与并介导免疫应答，因此，作为免疫功能紊乱所致的疾病—白癜风，从理论上而言其细胞因子的分泌应与非白癜风患者存在差异，而既往针对自身免疫性疾病的细胞因子研究中IL-6、IL-2及干扰素γ(IFNγ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)常作为重要的免疫因子用以判定其在自身免疫性疾病发生发展中的作用，但仅有较少的研究探讨其在白癜风发病中的作用，且这些研究仅针对某一特定细胞因子，而未将其进行综合性的评估。有鉴于此，本研究收集我院2009—2013年初诊白癜风患者78例，通过与体检健康志愿者的外周血血清IL-6、IL-2、IFN-γ、TNF-α进行比较，以期评估其在白癜风发生发展中的作用。

1资料与方法

1.1研究对象收集我院2009年7月—2013年7月4年间收治的初诊白癜风患者78例，其中男41例，女37例，中位年龄29岁(13～78岁)。患者的诊断及分型均参照中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病组制定的《白癜风临床分型及疗效标准(2003修订稿)》。其中寻常型70例(局限性33例，散在性24例，泛发性2例，肢端性11例)，节段型8例；发病时间为3月～2年，中位发病时间为7月。皮损面积为2～240 cm2。对照组为本院健康体检者37例。所有受检患者之前未进行任何针对白癜风的治疗。受检者均无其他严重系统性疾病，且无其他自身免疫性疾病及糖尿病、甲状腺炎、恶性贫血、牛皮癣、其他炎性皮肤疾病。本研究在研究前均告知受检者并获其同意，且经医院伦理委员会批注年后许可。研究符合赫尔辛基宣言中关于医学研究伦理学的相关规定。

1.2方法

1.2.1标本收集空腹抽取受检者静脉血5 mL，放入未抗凝普通管中，4℃冰箱静置2小时，用离心机分离血清，将血清抽吸至Ep管中，放-80℃冰箱保存，用于最后同批次进行。

1.2.2血清IL-6、IL-2、IFN-γ、TNF-α浓度检测采用酶联免疫吸附测定法对外周血血清IL-6、IL-2, IFN-γ、TNF-α浓度进行检测。

1.3统计学方法计量资料以均数±标准差的形式表示，根据比较组别的不同，采用One-Way ANOVA单因素方差分析进行比较。组内比较根据方差齐性采用LSD法或Games-Howell法进行比较。计数资料采用非参数检验的Kruscal-Wallis H检测进行评估。相关性检测采用pearson法。P<0.05为差异有统计学意义。统计学软件为SPSS 13.0。

2结果

2.1不同疾病分期组患者基线资料比较结果以临床分型进行分组，并对各组患者的年龄、性别、是否合并严重慢性疾病及其他自身免疫性疾病、平均病程等基线资料进行比较可知各组患者在基线资料的分布方面无差异(P>0.5)，具有可比性。见表1。

2.2IL-6、IL-2、IFN-γ、TNF-α结果血清IL-6、IL-2及IFN-γ水平在白癜风不同分型中的变化有统计学差异(P<0.05)。其中，IL-6的变化趋势如下：与对照组相比，白癜风各分型组的IL-6水平均明显升高，其中，散在性的升高幅度最为明显，其次为局限性、肢端性、节段性，但此三组之间两两比较差异并无统计学意义。与IL-6相似，IL-2以散在性升高最为明显，其次为节段型，再次为肢端性及局限性，但肢端性组与局限性组之间两两比较并差异无统计学意义。IFN-γ变化趋势如下：与对照组相比，各白癜风分型中血清IFN-γ水平均降低，但各分型之间两两比较差异均无统计学意义；而通过对照组及白癜风各临床分型的比较，TNF-α在白癜风患者于正常者之间的变化并差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3IL-6、IL-2、IFN-γ、TNF-α与皮损面积的相关性通过Pearson相关分析可知：IL-6及IL-2与皮损面积呈正相关，其相关系数分别为0.664及0.483，P值分别为0.021及0.014。而IFN-γ及TNF-α则与皮损面积无相关性，其相关系数分别为0.114及0.249，P值分别为0.441及0.375。

表1　以白癜风临床分型进行分组后各组患者临床资料描述

表2　IL-6、IL-2、IFN-γ、TNF-α在不同分型中的变化趋势(均数±标准差，pg/mL)

3讨论

白癜风的病因学尽管仍未彻底阐明，但就目前的研究基础来看，遗传因素及免疫因素在白癜风的发病中起重要作用，尤其是自身免疫介导的黑素细胞凋亡一直是白癜风研究的热点。其中。淋巴细胞CD4+/CD8+T细胞失衡及细胞毒性T细胞的过度活化是目前较为明确的两个病因[4]。此外，免疫负调节性细胞Treg细胞数量的减少及质量的降低，说明白癜风与自身抗体的生成及不恰当的自体免疫应答密切相关。本研究中，白癜风患者IL-6的水平明显的高于对照组，且与皮损面积呈正相关。这一结果与之前的研究结果类似[5-8]。IL-6是单个核细胞分泌的细胞因子，其可以诱导黑素细胞细胞连接分子1(ICAM-1)的表达并进而促进淋巴细胞与黑色素细胞的相互作用，导致B淋巴细胞激活并促进自身抗体的生成，从而导致黑色素细胞的免疫破坏[9-10]。此外，本研究亦发现IL-2水平在白癜风患者中明显升高。IL-2主要由活化的T细胞分泌，并促进受抗体活化的T淋巴细胞增殖及凋亡。Yeo等及Galadari等[11-12]通过对79及32名白癜风患者的研究发现可溶性IL-2受体在白癜风患者体内的表达高于正常人，而可溶性IL-2受体与IL-2呈正相关，因此，上述研究间接证实IL-2有可能参与了白癜风的自身免疫过程并促进黑色素细胞的自身免疫性凋亡。此外，本研究亦发现IL-2与皮损面积呈正相关，而类似的结果尚未见于其他文献报道。

而对于IFN-γ 的研究结果表明白癜风患者体内的IFN-γ含量明显降低，该结果与Yu HS[7]等的结果类似。该结果或可对白癜风患者体内弱炎性反应进行解释。此外，TNF-α在本研究中的结果与之前的研究结果不一致。既往研究结果认为TNF-α参与了线粒体依赖性的细胞凋亡及炎性因子的激活，从而在角质细胞的凋亡中发挥作用，并进一步导致自身免疫应答最终导致黑色素细胞死亡[7]。但本研究结果表明其在白癜风发病中的作用并非像过去所认为的那样重要(其在正常者与白癜风患者中的水平并无明显差异)。

综上，IL-2及IL-6在白癜风的发病过程中起重要作用，且在不同的分型中的表达存在差异，并与皮损面积呈正相关。

参考文献：

[1] YAGHOOBI R，0MIDIAN M，BAGHERANI N. Vitiligo：a review of the published work[J]. J Dermatol，2011，38(5)：419- 431.

[2] 中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组．白癜风临床分型及疗效标准 [J]. 中华皮肤科杂志，2004，37(7)：440.

[3] ARYA RK，GUPTA DK，CHAUDHARY SC. A rare case of autoimmune polyglandular syndrome type IIIc[J]. Indian J Endoerinol Metab，2012，16(3)：480．

[4] 张孟丽，马鹏程．白癜风免疫学研究进展[J]. 中国美容医学，2011，20(7)：1181-1183．

[5] PICHLER R, SFETSOS K, BADICS B, et al. Lymphocyte imbalance in vitiligo patients indicated by elevated CD4C/CD8C T-cell ratio[J]. Wien Med Wochenschr，2009，159:337- 341.

[6] ZHOU L,LI K，SHI YL, et al. Systemic anaIyses of immunopheno-types of peripheral T ceIls in non-segmental vitiligo：implication of defective nalural killer T celIs[J]. Pigment cell Melanoma Res，2012,25(5)：602- 611．

[7] YU HS, CHANG KL, YU CL, et al. Alterations in IL-6, IL-8, GM-CSF, TNF-alpha, and IFN-gamma release by peripheral mononuclear cells in patients with active vitiligo[J]. Invest Dermatol，1997，108:527- 529.

[8] ZAILAIE MZ. Decreased proinflammatory cytokine production by peripheral blood mononuclear cells from vitiligo patients following aspirin treatment[J]. Saudi Med，2005，26:799- 805.

[9] KIRNBAUER R, CHARVAT B, SCHAUER K, et al. Modulation of intercellular adhesion molecule-1 expression on human melanocytes and melanoma cells: Evidence for a regulatory role of IL-6, IL-7, TNF-α and UVB light[J]. Invest Dermatol，1992，98:320- 326.

[10] MORELLI JG, NORRIS DA. Influence of inflammatory mediators and cytokines on human melanocyte function[J]. Invest Dermatol，1993，100:191-195.

[11] YEO UC, YANG YS, PARK KB, et al. Serum concentration of the soluble interleukin-2 receptor in vitiligo patients[J]. Dermatol Sci，1999，19:182-188.

[12] GALADARI I. Serum levels of the soluble interleukin-2 receptor in vitiligo patients in UAE. Eur Ann Allergy[J]. Clin Immunol， 2005，37:109-111.

The correlation of cytokine level of peripheral blood cells, clinical classification and skin lesion in primary diagnosis patients with vitiligo

WenChanghui.

TheFirstAffiliatedHospitalofGuiyangCollegeofTraditionalChineseMedicine,Guiyang520100,China

【Abstract】ObjectiveTo evaluate the correlation of cytokine level of peripheral blood cells, clinical classification and skin lesion in preliminary diagnosis of vitiligo.MethodsA total of 78 patients with vitiligo of preliminary diagnosis and 37 health volunteers were collected from July 2009 to July 2013. The peripheral blood were collected for ELISA measurement of IL-6, IL-2, IFN-γand TNF-α, and evaluated whether the cytokines concentration was correlated to clinical classification and skin lesion.ResultsCompared to control group, IL-6 and IL-2 in all of classification of vitiligo was higher, and the most increase was observed in scattered group. Both IL-6 and IL-2 showed the positive correlation with skin lesion (CI: 0.664 and 0.483,P=0.021 and 0.014).ConclusionIL-2 and IL-6 maybe play a key role in vitiligo etiology, and showed different level in different classification of vitiligo. Besides, they showed a positive correlation with skin lesion.

【Key words】Vitiligo; Classfication; Cytokine; Correlation

DOI：10.3969/j.issn.1000-8535.2016.03.012

(收稿日期：2016- 01-26)