新型防霉剂对墙体霉菌抑制效果的评价

卢鸿 侯渊博 陈志明

摘 要：为检测与评价自配新型防霉剂对墙体霉菌的抑菌、杀菌效果，采集墙体上的霉菌，分离、纯化及18S-rDNA测序鉴定，确定优势菌株；将鉴定出的优势霉菌接种在沙堡培养基中，37 ℃恒温培养2～3 d，采用某市售品牌防霉剂A，不同浓度H2O2及自配防霉剂BIT进行抑菌处理，通过比较抑菌圈大小评估抑制效果。次共分离出3种霉菌属，分别是毛霉菌属、曲霉菌属、毛壳霉菌属；三种方式处理后都能抑制霉菌生长，从抑菌圈大小进行比较得出自配防霉剂的抑菌效果更好。自配新型防霉剂可以用于处理墙体霉变。

关 键 词：防霉剂；霉菌；抑菌效果

中图分类号：TQ 028 文献标识码： A 文章编号： 1671-0460（2016）08-1685-03

Abstract： In order to detect and evaluate the antibacterial effect of new self-made mildew-proof agent， the mildews from the wall were collected， isolated and purified. The dominant mildews were determined by sequencing of 18S rDNA. And then， the dominant mildews were cultured in the PDA agar medium， and incubated at 37 ℃ for 2～3 d. Using the inhibition zone method， the antibacterial effects of market mildew-proof agent （A）， self-made mildew-proof agent （BIT）， and H2O2 on the mildews were compared. The results show that Mucor， Aspergillus and Chaetomium are the major mildews. The above three kinds of mildew-proof agents show antibacterial effect on the walls mildews， the self-made mildew-proof agent has the best antibacterial effect. So this self-made mildew-proof agent can be used as an anti- mildew regent to deal with the walls mildews.

Key words： mildew-proof agent； mildew； antibacterial effect

溫州属亚热带季风气候，温度适中，雨水充沛。潮湿的环境容易引起墙体发霉。墙体由于霉菌的生长导致装饰涂层褪色乃至脱落，不仅影响了建筑的美观，还破坏了墙体结构，降低墙体的使用寿命[1]。墙体发霉也极大地危害了人类健康，长期接触和吸入霉菌会引发呼吸道炎症及过敏性疾病，产生鼻炎、过敏反应、肺部疾病等症状[2]。目前市售防霉剂种类繁多，但墙体专用防霉剂研究较少。本次实验旨在研发一种新型的墙体专用防霉剂，使其能有效地抑制墙体表面霉菌生长。

1 试验部分

1.1 试验菌种

从我校教学楼霉变的墙体分离得到的毛霉、曲霉和毛壳霉作为试验测试菌株。

1.2 培养基

从我校教学楼霉变的墙体分离得到的毛霉、曲霉和毛壳霉作为试验测试菌株。

1.3 试剂

实验室自配防霉剂BIT；市场购买某品牌防霉剂A；30%双氧水；无菌生理盐水。

1.4 主要仪器与设备

恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂）；高压灭菌锅（上海生银医疗仪器仪表有限公司）；空白滤纸片，直径6 mm（杭州天和微生物有限公司）；打孔器及其他常规仪器。

2 试验方法

2.1 防霉剂的制备

自配防霉剂BIT用蒸馏水稀释3个浓度即1/1000，2/1000和3/1000；双氧水共2个浓度（5%，10%）；市售某品牌防霉剂A按说明书制备，稀释为3个浓度即1/1000，2/1000和3/1000；无菌生理盐水做空白对照。

2.2 墙体霉菌的分离、纯化和鉴定

参照文献方法，对墙体霉菌进行分离、纯化和鉴定[3]。用无菌生理盐水浸湿的棉签拭子在发霉的墙体擦拭，然后均匀涂布在沙堡氏培养基平板，在温度（28±2） ℃、湿度大于90% 培养箱中培养2～3 d。对生长出的霉菌进行分离、纯化，直至获得纯化的菌种。并根据菌落形态（大小、颜色、质地、有无气生菌丝体、渗出物、气味等 ）、菌体特征（菌丝形态、孢子形态、孢子产生方式、排列特征）进行鉴定，综合观察到的菌落特征、镜检特征、菌种的培养特点和个体形态；采用NCBI 中BLAST 工具进行查看和比对分析DNA 序列，鉴定霉菌优势菌种。将鉴定好的纯菌用于后续实验。

2.3 对比不同防霉剂对菌种的抑菌作用

2.3.1 霉菌孢子悬液制备

将分离得到的菌种在PDA培养基中培养2～3 d，然后用无菌水洗涤斜面，软毛刷轻刷菌落表面，经过滤除去菌丝，洗涤所得到的菌悬液倒入盛有玻璃球的三角瓶中振荡分散，获得霉菌单孢悬液，配成106个/mL备用。

2.3.2 纸片抑菌圈法

将制备好的试验菌种孢子悬液，用无菌棉签蘸取后密涂于PDA培养基，并贴入不同防霉剂不同浓度浸泡过的无菌滤纸片，在温度（28±2） ℃、湿度大于90% 培养箱中培养2～3 d观察抑菌圈大小，进而评价防霉剂的抑菌效果。

3 试验结果

3.1 霉变墙体上的霉菌

本次试验从墙体上分出的菌种经鉴定后共有3种优势霉菌种，分别是毛霉菌属、曲霉菌属和毛壳霉菌属。

3.2 抑菌效果评价

抑菌效果评价结果如下表1，表2。

4 结 论

通过对墙体表面的真菌分离培养，鉴定出主要有三种优势菌属：毛霉菌属、曲霉菌属、毛壳霉菌属。毛霉菌又叫黑霉菌、长毛霉菌，毛霉菌属广泛存在于土壤、粪便及禾草等环境中，在高温、高湿度以及通风不良的条件下生长良好；曲霉菌属是引起多种物质霉腐的主要微生物之一（如面包腐败、煤生物分解及皮革变质等），为条件致病菌[4]；毛壳霉菌属属于子囊菌纲球壳菌目毛壳菌科的真菌，大多数具有较强的纤维素降解能力，能引起人体感染性真菌疾病[5]。

目前，采用防霉剂进行墙体防霉是有效抑制墙体长霉的好方法，但安全高效的墙体防霉剂甚少。墙体防霉主要采用在墙体建筑沙石、涂料中加入一些防霉剂组分，如：五氯酚钠、苯环烷酸汞、醋酸苯汞、氯化异肽腈等，此类防霉剂只能保证在较短的时间内具有较好的效果，时间太久之后霉菌仍会滋生[6]。因此，我们根据墙体霉菌分离情况来制备有针对性的防霉剂BIT，并评价其防霉效果。由表1结果可以看出，培养2～3 d，5%和10%浓度的H2O2抑菌效果最明显，但由于H2O2容易分解，随着培养时间的延长，抑菌圈处会有霉菌再次生长，不利于墙体霉菌实际处理；而市售防霉剂和自配防霉剂抑菌圈处随着培养时间的延长不会有霉菌再次生长；自配新型防霉剂抑菌圈直径大约为市售某品牌防霉剂的2倍；由于一定浓度的H2O2（如5%，10%）在初期对墙体霉菌有较好的抑制效果，将自配防霉剂与H2O2联合运用效果更佳（表2）。同一防霉剂处理条件下，毛壳霉菌属的抑菌圈直径小于另外两种霉菌属，说明该菌属对防霉剂的抵抗性较强，应引起重视。

综上，自配新型防霉剂BIT与市面最常用的防霉剂A相比具有更为高效的防霉效果，并且BIT中所应用的防霉成分安全、环保、成本较低，因此该自配防霉剂具有较大的實用的价值。

参考文献：

[1] 张玉波，凌琪，等. 墙体霉变的成因及应对措施[J]. 安徽建筑工业学院学报，2012，20（10）：75-76.

[2] 苏泽斌. 墙面发霉的原因及对策[J]. 山西建筑，2010，36（19）：144-145.

[3] 刘俊，刘佳明，周铁丽，等. 温州地区皮革制品霉菌分离及自配防霉剂研究[J]. 中国皮革，2013，42（11）：23-24.

[4] 王红，刘维达. 曲霉病研究的某些新进展.国外医学皮肤性病学分册[J] . 1998，24（3）：150-151.

[5] 李国友. 五种毛壳霉属和曲霉属真菌代谢产物及细胞毒活性[D].成都：中国科学院成都生物研究所，2007.

[6] Vacher S， Hernandez C， Ba rtschi C， et a1. Impact of paint and wall paper on mould growth on plaster boards and aluminum [J]. Building and Environment， 2010， 45（4）：916-921.