桥本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌患者血清S100A4、HSP60和TK1检测的临床意义

殷晓星， 周 琨， 马保金

(上海市静安区中心医院,复旦大学附属华山医院静安分院普外科，上海 200040)



桥本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌患者血清S100A4、HSP60和TK1检测的临床意义

殷晓星， 周 琨， 马保金

(上海市静安区中心医院,复旦大学附属华山医院静安分院普外科，上海 200040)

目的 探讨桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis， HT)合并甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma， PTC)患者血清中钙结合蛋白A4(serum calcium-binding protein A4， S100A4)、热休克蛋白(heat shock protein， HSP)60和细胞质胸苷激酶(cytoplasmic thymidine kinase， TK1)水平变化的临床意义。方法 分别抽取2010年1月至2015年6月122例TH合并PTC(TH+PTC组)、43例HT(HT组)和20例正常体检人(健康对照组)的血清标本，酶联免疫法检测各组血清S100A4、HSP60、TK1水平及其治疗前后变化，并探讨这些血清标志与HT+PTC组患者的HT和AJCC分期的关系。结果 HT合并PTC组和HT组的血清S100A4、HSP60和TK1明显高于健康对照组(P<0.01)。其中，在HT合并PTC组，血清S100A4、HSP60和TK1随HT病情加重和PTC分期升高而升高(P<0.01)，但术后较术前明显降低(P<0.01)；S100A4与HSP60(r=0.865，P<0.05)、TK1(r=0.679，P<0.05)，HSP60与TK1(r=0.575，P<0.05)均呈正相关。结论 血清S100A4、HSP60、TK1联合检测有助于早期诊断HT合并PTC。

桥本甲状腺炎； 甲状腺乳头状肿瘤； 钙结合蛋白A4； 热休克蛋白-6； 细胞质胸苷激酶

桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis， HT)是一种常见的免疫性疾病，常伴发甲状腺结节，这种伴发的甲状腺结节癌变率较高，可达23%以上。癌变以乳头状甲状腺癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)多见，发病率呈逐年上升趋势[1-2]。如何早期监测HT合并PTC，早期干预治疗是提高PTC预后的关键。钙结合蛋白A4(calcium-binding protein A4， S100A4)是钙离子结合蛋白家族成员，可通过钙离子信号途径调控肿瘤的发生发展和侵袭、转移，对PTC预后预测亦具重要意义[3]。热休克蛋白(heat shock protein， HSP)60是一种热诱导形成的应激蛋白，对蛋白错误修复过程有重要作用，与肿瘤的发生发展密切相关[4]。细胞质胸苷激酶(cytoplasmic thymidine kinase， TK1)在正常人体内微量存在，在恶性肿瘤中有95%患者明显升高，是一种较有潜力的早期诊断肿瘤标记物[5]。本研究通过对HT合并PTC患者血清S100A4、HSP60和TK1检测，观察其在HT合并PTC的临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择2010年1月至2015年6月在复旦大学附属华山医院静安分院就诊的122例TH合并PTC患者(TH合并PTC组)、43例HT患者(HT组)和20例正常体检人(健康对照组)。其中，TH合并PTC组男46例，女76例，年龄20～60岁，平均年龄(46.97±9.78)岁，均被术后病理确诊，符合WHO诊断标准；按HT病理分期属早期27例、中期21例、晚期74例，按美国肿瘤协会(AJCC)临床分期属Ⅰ期65例、Ⅱ期16例、Ⅲ期27例、Ⅳ期14例；所有患者排除其他器官病变或其他恶性肿瘤，术前无放化疗、心肝肾等重要脏器衰竭和不配合研究者。HT组男15例，女28例，年龄20～60岁，平均年龄(46.17±8.87)岁，亦均经病理确诊。健康对照组男7例，女13例，年龄20～60岁，平均年龄(46.54± 9.63)岁。3组年龄、性别等一般资料差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 方法

HT合并PTC组和HT组均采用常规手术治疗。入院第1天各组和HT合并PTC组术后1周空腹抽取血液2～3ml，离心半径10cm，3000r/min，离心20min分离血清，保存于-70℃冰箱中待测。采用Freedom Evolyzer 2150型全自动酶标仪，以酶联免疫法按试剂盒(均购自美国R&D公司)测定各组血清S100A4、HSP60、TK1值。并观察各组血清S100A4、HSP60、TK1变化及HT合并PTC组血清S100A4、HSP60、TK1与HT分期和AJCC分期的关系。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 血清S100A4、HSP60、TK1

HT合并PTC组和HT组的血清S100A4、HSP60及TK1值均明显高于健康对照组(P<0.01)；HT合并PTC组则明显高于HT组(P<0.01)，见表1。

2.2 血清S100A4、HSP60、TK1与HT合并PTC患者TH严重程度关系

HT合并PTC患者血清S100A4、HSP60、TK1随HT严重程度加深而升高(P<0.01)，见表2。

2.3 血清S100A4、HSP60、TK1与HT合并PTC患者PTC分期关系

HT合并PTC患者血清S100A4、HSP60及TK1随PTC分期升高而升高(P<0.01)，见表3。

2.4 HT合并PTC患者治疗前后血清S100A4、HSP60及TK1变化

HT合并PTC患者术后血清S100A4、HSP60及TK1较术前明显降低(P<0.01)，见表4。

表1 各组S100A4、HSP60及TK1比较

与健康对照组比较，*P<0.01；与HT组比较，#P<0.01

表2 血清S100A4、HSP60、TK1与HT合并PTC患者TH严重程度关系

与早期比较，*P<0.01；与中期比较，#P<0.01

表3 血清S100A4、HSP60、TK1与HT合并PTC患者PTC分期关系

与Ⅰ期比较，*P<0.01；与Ⅱ期比较，#P<0.01；与Ⅲ期比较，△P<0.01

表4 HT合并PTC患者治疗前后血清S100A4、HSP60及TK1变化

与术前比较，*P<0.01

2.5 HT合并PTC患者血清S100A4、HSP60及TK1相关性分析

在HT合并PTC患者，血清S100A4与血清HSP60(r=0.865，P<0.05)和血清TK1(r=0.679，P<0.05)呈正相关，血清HSP60与血清TK1呈正相关(r=0.575，P<0.05)。

3 讨 论

有研究[6]显示，S100A4在正常甲状腺组织不表达而在甲状腺癌高表达，且与肿瘤患者预后相关，在肿瘤侵袭和转移中扮演重要角色[7]。本组HT合并PTC患者血清S100A4明显高于HT组和健康对照组，且随HT严重程度和PTC分期升高而升高，提示S100A4可能参与了HT合并HT的发生发展，并与PTC预后相关，与文献报道一致，但具体机制尚不清楚。S100A4蛋白与liprinβ1结合，抑制跨膜酪氨酸磷酸酶磷酸化，与非骨骼肌肌浆球蛋白重链、原肌球蛋白等骨架结构相互作用，导致细胞骨架结构改变，增加肿瘤细胞游出血管能力[8]；还通过促进新生血管生成增加实体瘤新生血管生成，促进肿瘤生长；并致同型细胞不能正常黏附，导致肿瘤从母体肿瘤中脱落，从而发生转移。本组HT合并PTC患者术后血清S100A4较治疗前明显降低，说明S100A4与肿瘤负荷有一定联系，故对肿瘤负荷具有监测作用。

HSPs是一类高度保守的蛋白质，广泛存在真核生物细胞中，在维持细胞的正常活动中有重要作用，参与多种疾病的发生发展[9]。HSP60是HSPs家族的重要成员，在多种肿瘤中异常高表达，参与肿瘤的发生发展和细胞周期调节、DNA修复和细胞凋亡，在肿瘤生物学行为方面有重要作用。据报道[10-11]，HSP60在结直肠、胃和子宫颈癌中异常高表达，并与肿瘤恶性程度、浸润和预后相关。但在甲状腺癌中表达研究较少。本研究HT合并PTC组血清HSP60明显高于HT组和健康对照组，且随HT和PTC分期升高而升高，术后明显下降，亦表明HSP60参与了PTC的发生发展，有助于PTC的早期发现和治疗预后监测。其机制可能与PTC发生过程中癌细胞的原癌基因突变、扩增和激活，抑癌基因突变、失活和缺失，致HSP60在PTC中高表达并释放入血有关[12]。故血液HSP60检测对监测PTC严重程度有重要意义。

TK1在正常成人含量极低，当机体细胞大量增殖时迅速增高，癌变时因肿瘤细胞增殖加剧，可至正常的2～100倍，并随细胞周期变化使细胞增殖期TK1明显增加，是评价细胞增殖的重要指标，临床上可作为肿瘤早期筛查、诊断、监控和预后随访的重要标记[13-15]。本研究HT合并PTC组血清TK1明显高于HT组和健康对照组，且随HT和PTC分期升高而增高，术后明显降低，提示TK1可作为HT合并PTC细胞增殖、肿瘤发生发展和预后的重要血清标记和早期预警指标[16]。

本组结果还表明，HT合并PTC患者血清S100A4与HSP60、TK1，HSP60与TK1呈正相关，说明S100A4、HSP60、TK1共同参与了HT合并PTC的发生发展，联合检测这些指标可能有助于HT合并PTC的早期诊断。

[1] 白建平，卢建跃，孙新增，等.乳头状甲状腺癌合并桥本甲状腺炎患者临床特点分析[J].中国医学前沿杂志： 电子版，2015(5)： 61-63.

[2] 徐倍，钱明平，柴丽，等.超声引导下细针穿刺抽吸活检在TI-RADS 4a类甲状腺结节中的应用[J].同济大学学报： 医学版，2015，36(2)： 93-96.

[3] 黄隽，苏榕.钙结合蛋白S100A4和信号传导及转录活化因子3在甲状腺癌及腺瘤组织中表达及其临床意义[J].中华实验外科杂志，2015，32(5)： 1144-1146.

[4] 李荣，陈传奇，孙岩.热休克蛋白60在胆囊癌组织中的表达及临床意义[J].中国现代普通外科进展，2015，18(3)： 221-223.

[5] Jagarlamudi KK， Hansson LO， Eriksson S. Breast and prostate cancer patients differ significantly in their serum Thymidine kinase 1(TK1) specific activities compared with those hematological malignancies and blood donors： implications of using serum TK1 as a biomarker[J]. BMC Cancer， 2015，15： 66.

[6] 侯继院，刘兴安，单国用，等.S100A4调节MMP-13表达对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响[J].中华肿瘤防治杂志，2015，22(7)： 514-518，523.

[7] 尚培中，南润玲，谷化平.S100A4蛋白在甲状腺良恶性病变组织中的表达及其意义[J].中华内分泌外科杂志，2010，04(6)： 375-378.

[8] 唐颖，崔全才.S100A4和hMLH1在甲状腺腺瘤和滤泡癌中的表达及其鉴别诊断意义[J].诊断病理学杂志，2011，18(4)： 285-288.

[9] Hamelin C， Cornut E， Poirier F， et al. Identification and verification of heat shock protein 60 as a potential serum marker for colorectal cancer[J]. FEBS J， 2011，278(24)： 4845-4859.

[10] Campanella C， Rappa F， Sciume C， et al. Heat shock protein 60 levels in tissue and circulating exosomes in human large bowel cancer before and after ablative surgery[J]. Cancer， 2015，121(18)： 3230-3239.

[11] Li XS， Xu Q， Fu XY， et al. Heat shock protein 60 overexpression is associated with the progression and prognosis in gastric cancer[J]. PLoS One， 2014，9(9)： e107507.

[12] Marino GA， Rizzo M， Citarrella R， et al. Elevated blood Hsp60， its structural similarities and cross-reactivity with thyroid molecules， and its presence on the plasma membrane of oncocytes point to the chaperonin as an immunopathogenic factor in Hashimoto’s thyroiditis[J]. Cell Stress Chaperones， 2014，19(3)： 343-353.

[13] Aufderklamm S， Todenhofer T， Gakis G， et al. Thymidine kinase and cancer monitoring[J]. Cancer Lett， 2012，316(1)： 6-10.

[14] Nisman B， Nechushtan H， Biran H， et al. Serum thymidine kinase 1 activity in the prognosis and monitoring of chemotherapy in lung cancer patients： a brief report[J]. J Thorac Oncol， 2014，9(10)： 1568-1572.

[15] Fiala O， Finek J， Buchler T， et al. The Association of Serum Carcinoembryonic Antigen， Carbohydrate Anti-gen 19-9， Thymidine Kinase， and Tissue Polypeptide Specific Antigen with Outcomes of Patients with Metastatic Colorectal Cancer Treated with Beva-cizumab： a Retrospective Study[J]. Target Oncol， 2015，10(4)： 549-555.

[16] Xiang Y， Zeng H， Liu X， et al. Thymidine kinase 1 as a diagnostic tumor marker is of moderate value in cancer patients： A meta-analysis[J]. Biomed Rep， 2013，1(4)： 629-637.

Serum S100A4， HSP60 and TK1 leves in Hashimoto’s thyroiditis patients with papillary thyroid carcinoma

YINXiao-xing，ZHOUKun，MABao-jin

(Dep. of General Surgery， Jing’an District Central Hospital, Jingan Branch of Huashan Hospital， Fudan University, Shanghai 200040， China)

Objective To investigate serum calcium-binding protein A4(S100A4)， heat shock protein(HSP) 60 and cytoplasmic thymidine kinase(TK1) in Hashimoto’s thyroiditis(HT) patients with papillary thyroid carcinoma(PTC). Methods One hundred and twenty two TH patients with PTC(HT + PTC group)， 43 patients with HT(HT group) and 20 healthy subjects(control group) were recruited in the study from January 2010 to June 2015. Serum levels of S100A4， HSP60 and TK1 were measured by ELISA method. The correlation of these indicators with HT and AJCC staging was analyzed. Results Serum levels of S100A4， HSP60 and TK1 were significantly higher in HT with PTC group and HT group than those in control group(P<0.01)， and increased as the severity of HT and the raise of PTC stages in HT with PTC group(P<0.01)， and significantly lower after postoperation than before operation(P<0.01). Serum levels of S100A4 were positively correlated with HSP60(r=0.865，P<0.05) and TK1(r=0.679，P<0.05)， and serum levels of HSP60 was positively correlated to serum TK1(r=0.575，P<0.05) in HT with PTC group. Conclusion The combined detections of serum levels of S100A4， HSP60 and TK1 are helpful for early diagnosis of HT with PTC.

Hashimoto’s thyroiditis； papillary thyroid carcinoma； calcium-binding protein A4； heat shock protein-6； cytoplasmic thymidine kinase

10.16118/j.1008-0392.2016.04.018

2016-01-13

殷晓星(1979—)，男，主治医师，学士.E-mail： alex9601136@163.com

R 736.12

A

1008-0392(2016)04-0088-05