核桃叶提取液对小鼠心率、心电的影响

宋庆 范文凤 刘桂彪 许火龙 杨媛 黄勇胜 王彩冰

核桃叶提取液对小鼠心率、心电的影响

宋庆 范文凤 刘桂彪 许火龙 杨媛 黄勇胜 王彩冰

目的 探讨核桃叶提取液对小鼠心率和心电的影响。方法 选取小鼠40只，随机分为正常对照组(给予0.85%NaCl注射液)、普萘洛尔组(给予0.4mg/mL普萘洛尔)、核桃叶低浓度组和高浓度组(分别给予0.2g/mL、0.4g/mL核桃叶提取液)给予相应药物灌胃，各10只，每天灌胃1次，14d后用心电图机检测各组小鼠的心率和P波、QRS波、PQ间期。结果 核桃叶低浓度组P波时限与正常对照组和普萘洛尔组比较差异无统计学意义，而高浓度组P波时限明显长于正常对照组和普萘洛尔组(P＜0.05)；核桃叶低浓度组和高浓度组P波振幅明显低于正常对照组(P＜0.01)，而明显高于普萘洛尔组(P＜0.05)。核桃叶低浓度组和高浓度组QRS波时限与正常对照组比较差异无统计学意义，核桃叶低浓度组QRS波振幅明显低于正常对照组和普萘洛尔组(P＜0.05)，核桃叶高浓度组QRS波振幅与正常对照组、普萘洛尔组和核桃叶低浓度组比较差异无统计学意义；核桃叶低浓度组和高浓度组、正常对照组、普萘洛尔组的PQ间期各组间比较差异无统计学意义。普萘洛尔组的心率明显低于正常对照组(P＜0.01)，核桃叶低浓度组和高浓度组的心率与正常对照组比较差异无统计学意义，核桃叶低浓度组的心率与普萘洛尔组比较差异无统计学意义，但核桃叶提取液高浓度组的心率明显高于普萘洛尔组(P＜0.05)。核桃叶高浓度组的P波间期和振幅、QRS波时限和振幅、PQ间期、心率与核桃叶低浓度组比较差异无统计学意义。结论 核桃叶提取液能延长P波时限、降低P波和QRS波振幅，对心率无明显影响作用。

核桃叶提取液；心率；心电；小鼠

核桃是胡桃科核桃属(Juglans L.)植物，核桃仁具有补肾壮阳、健脑益智、养颜美容、温肺润肠、抗氧化、预防心血管疾病，核桃叶具有增强记忆力和免疫力、降低心肌收缩力的作用、增强小肠平滑肌收缩力、抑制肿瘤细胞生长、抗氧化、抗衰老、抗炎、生理性止血、不影响红细胞渗透脆性等作用，山核桃叶总黄酮还有保护心肌细胞和降低脐静脉内皮细胞表面黏附因子的黏附作用[1-12]。目前尚未发现有核桃叶对心电图影响的文献报道，本实验采用核桃叶提取液给小鼠灌胃，并与临床用于治疗心律失常药物普萘洛尔剂量换算成小鼠用量给小鼠灌胃后作比较分析[13-14]，观察核桃叶提取液对小鼠心电图的影响，为进一步开发利用核桃叶提供实验资料，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 健康KM小鼠40只，体质量20～30g，雌雄不限，由广西右江民族医学院实验动物中心提供。

1.2 药材、药品和仪器 核桃叶(采自广西百色市郊)晒干备用。0.85%NaCl注射液(贵州天地药业有限责任公司，批号：H52020069)，普萘洛尔(山西云鹏制药有限公司，批号：B140703)，氨基甲酸乙酯(成都市科龙化工试剂厂，批号：20121101)，心电图机(广州市艾迪科逊医疗器械有限公司，型号：ECG-6511)。

1.3 核桃叶提取液的制备 将400g核桃叶加入4000mL的水中浸泡1h，文火煮沸2h，16层纱布过滤后再用滤纸过滤，滤液用文火隔水浓缩至400mL(相当于生药1g/mL)，冷却后放入4℃冰箱保存，给小鼠灌胃时用蒸馏水分别配制成0.2g/mL、0.4g/mL的核桃叶提取液。

1.4 动物分组与给药方法 将40只小鼠随机均分为4组，正常对照组(给予0.85%NaCl注射液)、普萘洛尔组(给予0.40mg/mL普萘洛尔)、核桃叶低浓度组和高浓度组(组分别给予核桃叶提取液0.2g/mL、0.4g/mL)给予相应药物灌胃，灌胃量按小鼠体质量计算(10mL/kg)，每天灌胃1次，共14d。

1.5 小鼠心电图测量方法

1.5.1 小鼠心电图测定条件 小鼠禁食12h、禁水2h，末次灌胃10min用20%的氨基甲酸乙酯(10mL/kg)腹腔注射麻醉，通过心电图机测量小鼠肢体Ⅱ导联的心电图，定标电压2mV、纸速50mm/s。

1.5.2 心率测量 取心电图基线较稳定的连续5个R波，测量并计算R-R间期均值，计算心率(次/分)=60/R-R间期/2。

1.5.3 P波时限和振幅的测量 取心电基线较稳定的连续5个P波，测量并计算P波时限和振幅的均值。

1.5.4 QRS波时限和振幅的测量 取心电基线较稳定的连续5个QRS波，测量并计算QRS波时限和振幅的均值。

1.5.5 PQ间期的测量 取心电基线较稳定的连续5个PQ间期，测量并计算PQ间期的均值。PQ间期为P波起点至QRS波起始的时限。

1.6 统计学方法 利用SPSS16.0统计软件进行统计分析，计量资料采用“x±s”表示，组间比较采用t检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

小鼠心率及心电P波、QRS波、PQ间期的测定结果 普萘洛尔组的心率明显低于正常对照组(P＜0.01)，核桃叶低浓度组和高浓度组的心率与正常对照组比较差异无统计学意义，核桃叶低浓度组的心率与普萘洛尔组比较差异无统计学意义，但核桃叶高浓度组的心率明显高于普萘洛尔组(P＜0.05)。核桃叶低浓度组的心率与核桃叶高浓度组比较差异无统计学意义。P波：核桃叶低浓度组P波时限与正常对照组和普萘洛尔组比较差异无统计学意义，而高浓度组P波时限明显长于正常对照组和普萘洛尔组(P＜0.05)；核桃叶低浓度组和高浓度组P波振幅明显低于正常对照组(P＜0.01)，而明显高于普萘洛尔组(P＜0.05)；核桃叶高浓度组的P波时限和振幅与核桃叶低浓度组比较差异无统计学意义，普萘洛尔组的P波振幅明显低于正常对照组(P＜0.01)。QRS波：核桃叶低浓度组和高浓度组QRS波时限与正常对照组比较差异无统计学意义，核桃叶低浓度组QRS波振幅明显低于正常对照组和普萘洛尔组(P＜0.05)，核桃叶高浓度组QRS波振幅与正常对照组、普萘洛尔组和核桃叶低浓度组比较差异无统计学意义；核桃叶低浓度组和高浓度组、正常对照组、普萘洛尔组的PQ间期各组间比较差异无统计学意义。PQ间期：各组间的PQ间期两两比较差异无统计学意义。见表1。

表1 核桃叶提取液对小鼠心电图影响的比较（s，n=10）

表1 核桃叶提取液对小鼠心电图影响的比较（s，n=10）

注：与正常对照组比较，aP＜0.05，bP＜0.01；与普萘洛尔组比较，cP＜0.05，dP＜0.01

组别心率（次/分）P波QRS波PQ间期时限（s）振幅（mV）时限（s）振幅（mV）正常对照组617.93±27.380.028±0.0010.286±0.0190.043±0.0041.003±0.0660.033±0.001普萘洛尔组440.00±29.21b0.026±0.0010.137±0.012b0.047±0.0031.005±0.0860.034±0.002核桃叶低浓度组535.40±38.140.030±0.0030.200±0.026bc0.038±0.002c0.750±0.076ac0.039±0.003核桃叶高浓度组576.58±39.37c0.035±0.003ad0.198±0.020bc0.045±0.0020.874±0.0490.083±0.042

3 讨论

心脏是推动血液循环的重要动力器官，心电的变化会直接影响心脏的功能活动，P波是两心房的去极化波，QRS波是两个心室的去极化波；去极化的高低会影响收缩力的强弱[15]。本实验通过心电图的检测，了解核桃叶提取液对心脏的影响，并与生理盐水和临床用于降低心脏活动的普萘洛尔药物进行比较分析。

本实验结果显示：普萘洛尔组的心率明显低于正常对照组(P＜0.05)，普萘洛尔组的P波振幅明显低于正常对照组(P＜0.05)，说明用于实验的小鼠对药物有正常的反应；核桃叶高浓度组的P波时限明显长于正常对照组(P＜0.05)，核桃叶低浓度组和高浓度组的P波振幅明显低于正常对照组(P＜0.05)，核桃叶低浓度组的QRS波振幅明显低于正常对照组(P＜0.05)，提示核桃叶能降低心房和心室的收缩力；核桃叶高浓度组的P波时限明显长于正常对照组(P＜0.05)，提示核桃叶能延长心房去极化时间。核桃叶低浓度组和高浓度组的QRS波时限、PQ间期与正常对照组比较差异无统计学意义，提示核桃叶不缩短心室去极化时间；核桃叶提取液低浓度组和高浓度组的心率与正常对照组比较差异无统计学意义，提示核桃叶提取液不影响心率活动。本研究表明，核桃叶提取液可降低心脏的收缩力而不影响心率，这一现象与本课题组之前研究的离体心脏活动结果一致[5]。

综上所述，核桃叶不影响心率，核桃叶通过延长P波时限、降低P波和QRS波振幅的作用，从而引起心收缩力减弱。核桃叶不影响心率而能降低心收缩力，这对中老龄人冠心病引起的心绞痛可能有缓解作用，而核桃叶是否有望成为中老龄人的保健品和治疗药物，这还有待今后的开发研究。

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Objective The paper explores the impact of walnut leaves extract upon the heart rate and electrocardiograph (ECG) of rats. Methods Take 40 rats; divide them at random into normal control group (provided with 0.85%NaCl of injections), propranolol group (provided with 0.4mg/mL of propranolol), low concentration group and high concentration group of walnut leaves (provided with 0.2g/mL and 0.4g/mL of walnut leaves extract) with intragastric infusion with corresponding amounts of drugs; conduct intragastric infusion once every day. Use the ECG machine after 14 days to test the heart rate, P wave, QRS wave and PQ intervals of different groups of rats. Results The difference is not signifcant about the P wave duration of the low concentration group of walnut leaves, normal control group and propranolol group, while the P wave duration of the high concentration group of walnut leaves is longer than the normal control group and propranolol group’s (P＜0.05); the P-wave amplitude of the low concentration group and high concentration group of walnut leaves is lower obviously than the normal control group’s (P＜0.01) and higher obviously than the propranolol group’s (P＜0.05). The difference is not signifcant about QRS duration of the low concentration group and high concentration group of walnut leaves, compared with the normal control group’s. The QRS amplitude of low concentration group of walnut leaves is lower obviously than the normal control group and propranolol group’s (P＜0.05). The difference is not signifcant about the QRS amplitude of high concentration group of walnut leaves, the normal control group and propranolol group; the difference is not signifcant about the PQ intervals of the propranolol group, the low concentration group and high concentration group of walnut leaves. The heart rate of propranolol group is lower obviously than the normal control group’s (P＜0.01). The difference is not signifcant about the heart rate of the normal group, low concentration group and high concentration group of walnut leaves. The difference is not signifcant about the heart rate of low concentration group of walnut leaves and the propranolol group. But the heart rate of low concentration group of walnut leaves extract is higher obviously than the propranolol group’s (P＜0.05). The difference is not signifcant about the P-wave interval and amplitude, the QRS duration and amplitude and the PQ interval and heart rate of high concentration group and low concentration group of walnut leaves. Conclusion The walnut leaves extract can extend the P-wave duration, reduce the amplitude of P wave and QRS wave and has little impact on the heart rate.

Walnut leaves extract; Heart rate; Electrocardiograph; Rats

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.18.002

2014年广西壮族自治区级大学生创新创业训练计划项目（201410599004） 2014年右江民族医学院大学生创新研究团队校级科研课题（10）

广西 533000 右江民族医学院2012级临床医学本科 （宋庆 刘桂彪 杨媛 黄勇胜） 右江民族医学院2013级临床医学本科全科班 （范文凤）右江民族医学院2013级临床医学本科（许火龙） 右江民族医学院生理学教研室（王彩冰）

王彩冰 E-mail：wangcb4444@163.com