分析HBsAg与抗-HBs双阳患者血清模式与HBV DNA载量的临床意义

蒋莉 陈春华 濮翔科

分析HBsAg与抗-HBs双阳患者血清模式与HBV DNA载量的临床意义

蒋莉 陈春华 濮翔科

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染者乙型肝炎表面抗原（HBsAg）与乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）同时阳性的血清学模式的基因变异与HBV DNA的关系并探究其原因及临床意义。方法 乙肝HBV血清学标志物五项指标(HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb)采用时间分辨法定量测定，HBV DNA含量的检测采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)。结果 本研究入选的50例HBsAg与抗HBs双阳患者血清中共出现4种HBV血清学模式:(Ⅰ) HBsAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性模式占42.0%，HBV DNA阳性率占42.8%；(Ⅱ) HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc阳性模式占32.0%，HBV DNA阳性率占70.5%；(Ⅲ)HBsAg、抗-HBs、抗-HBc阳性模式占24.0%，HBV DNA阳性率占25.0%；(Ⅳ)HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc阳性模式占2.0%，HBV DNA阳性率占100.0%。其中含有HBeAg阳性的Ⅱ、Ⅳ模式与Ⅰ、Ⅲ模式的HBV DNA阳性率分别作两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 HBsAg与抗HBs双阳患者血清中伴有HBeAg阳性者血清中HBV DNA载量最高，HBsAg与抗-HBs双阳模式是免疫系统的个性化表现，应引起临床的重视。

乙肝；表面抗原；表面抗体；乙肝病毒(HBV)；基因变异

诊断HBV感染的重要标志是患者感染了乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。感染了乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）的患者，可发生急、慢性乙型肝炎。乙型肝炎经过治疗后数周有时HBsAg会转阴，经过一段时间的窗口期血清内会出现乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）。无症状HBV携带者和乙型肝炎患者均有可能会发生HBsAg和抗-HBs同时阳性的现象（简称双阳现象）。经过治疗HBV感染者和无症状HBV如果能完全清除病毒,那么HBsAg就会逐渐消失,自体血清中会逐渐产生抗-HBs，或在抗-HBs逐渐升高时HBsAg接近消失前,抗-HBs阳性意味着HBsAg可能已被清除,人体已产生了保护作用[1],患者均出现抗HBc阳性,有的患者出现HBeAg或抗HBe阳性，部分表现为血清中HBV DNA阳性，本研究旨在说明在当临床检验测定HBV抗原-抗体标志物出现HBsAg与抗HBs双阳性时，患者血清中伴有HBeAg阳性者血清中HBV DNA阳性率最高；伴有HBeAg阳性并伴有抗HBe阳性者HBV DNA阳性率次高，可能在药物、抗病毒治疗中或其他因素的作用下发生了基因突变。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2011年1月～2014年4月江苏省常州市第三人民医院收治乙肝HBsAg与抗-HBs双阳性住院患者50例为研究对象，诊断符合标准[2],其中男20例，女30例，年龄25～78岁，平均(45.2±16.3)岁。

1.2 方法与仪器 HBV DNA荧光定量检测仪器为美国应用生物公司ABI 7500基因扩增仪，由达安基因生物技术有限公司提供试剂盒，以IU/mL表示DNA的单位含量，检测时102IU／mL作为判断阳性。采用仪器为AD 1235全自动荧光免疫时间分辨仪，全自动时间分辨法，用定量测定的方法检测HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb，由中山大学达安基因股份有限公司提供试剂盒。

1.3 结果判断 HBsAg≥0.6 ng/mL为阳性；抗-HBs≥1 2 m I U/m L为阳性；H B e A g≥0.5 P E I U/m L为阳性；抗-HBe≥10 DRU/mL为阳性；抗-HBc≥0.1 DRU/mL为阳性；HBV DNA≥102IU/mL为阳性。

1.4 统计学方法 统计学分析采用SPSS 12.0软件进行统计。计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

其中，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ模式分别占有42.0%、32.0%、24.0%、2.0%,含有HBeAg阳性的Ⅱ模式与Ⅰ、Ⅲ模式的HBV DNA阳性率分别作两两比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；Ⅳ模式与Ⅰ、Ⅲ模式的HBV DNA阳性率分别作两两比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 50例HBsAg和抗-HBs双阳性患者HBV血清学模式和HBV DNA测定结果（阳性＋，阴性－）

3 讨论

出现HBsAg和抗-HBs共存的现象是由于当HBV基因发生突变时，其编码的氨基酸发生改变或影响蛋白翻译后的修饰，导致HBsAg抗原性发生改变，突变后的抗原无法与原先产生的抗体结合。HBV感染的特异性指标就是表现为患者血清HBsAg阳性，HBsAb的产生是由HBsAg暴露的抗原决定簇刺激机体产生的一种特异性保护抗体，一般在HBV感染机体使用了药物等至HBsAg消失后或健康带病毒者注射乙肝疫苗后出现阳性，HBsAb是一种保护性抗体，是HBV感染后有免疫力及终止的标志，它能中和HBsAg，具有防御HBV感染的作用。理论上两者是不会同时出现阳性，但我们在临床实际检测中确发现了有一些患者表现为两者同时存在。据报道，国内采用酶免法，HBsAg与HBsAb同时检出的病例约占总送检标本的0.3%[3]，本研究显示，在HBV感染者中，确实存在HBsAg与HBsAb同时阳性的现象，而且占有HBsAg阳性患者一定的比例。本研究中，血清学Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ模式的HBV DNA阳性率出现了42.8%、70.5%、25.0%和100.0%，HBsAg与抗HBs双阳患者血清中有HBeAg阳性并伴有抗Hbe阳性的Ⅱ模式血清中HBV DNA阳性率70.5%，次于有HBeAg阳性并伴有抗HBe阴性的Ⅳ模式(HBV DNA阳性率100.0%)，机体感染HBV后产生抗-HBs，在机体的免疫压力、药物或其他因素的作用下HBV可发生基因突变。Ⅱ、Ⅳ模式分别与Ⅰ、Ⅲ模式相比较，差异有统计学意义（P＜0.05），说明有病毒复制和伴有基因突变，少数慢性乙型肝炎患者可出现HBsAg和抗-HBs阳性[4]；不同亚型HBV的感染,针对于免疫优势表位“a”表位的抗体可对所有亚型HBV的感染提供保护性免疫，但其他亚型抗体并无交叉保护性[5]；感染过HBV或接种乙型肝炎疫苗后，虽有正常的HBsAb应答，由于机体的免疫力不同，仍能感染a决定簇变异的免疫逃逸病毒株，从而产生了HBsAg与HBsAb并存的现象；由于干扰素既能抑制病毒复制，又能调节宿主免疫，但由于s基因的变异，对于干扰素治疗的慢性乙肝患者，在治疗中虽出现会HBsAb血清转换，也会出现不能将HBsAg清除[6]。本研究中有产生了抗HBe，使HBV DNA阳性率有所下降，如Ⅱ模式血清中HBV DNA阳性率70.5%，较Ⅳ模式(HBV DNA阳性率100.0%)有下降，因此目前临床分析和判断乙型肝炎患者病程和传染性的重要指标是依靠乙型肝炎病毒血清免疫学标志检查，乙型肝炎病毒血清免疫学检测实际检测的是人体对乙型肝炎病毒的免疫反应状态[7]。检测HBV DNA水平的临床意义是可以反映体内HBV复制情况，是评价药物抑制HBV效果的有效方法[8]。因此，HBsAb和HBsAg同时阳性，与HBV DNA载量相互关联，是有多种原因引起的，是免疫系统的个性化表现，也是病毒基因变异、病毒复制的表现。实验室检测应尽量避免应检测因素引起的误差，进一步进行HBV基因测序，以确定HBV的基因变异，临床治疗过程中应注意抗病毒治疗以后乙肝患者的基因突变。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.17.027

江苏 213001 江苏省常州市第三人民医院检验科 （蒋莉 陈春华濮翔科）

陈春华 E-mail:cchczsy@126.com