草莓枯萎病菌的分离鉴定及防治药剂筛选

伊海静，陈　艳，刘正坪，王有年，杨　晓，刘　俊

(1.北京农学院，农业部都市农业(北方)重点实验室，北京　102206；2.中国科学院 微生物研究所，北京　100101)



草莓枯萎病菌的分离鉴定及防治药剂筛选

伊海静1，陈艳1，刘正坪1，王有年1，杨晓1，刘俊2

(1.北京农学院，农业部都市农业(北方)重点实验室，北京102206；2.中国科学院 微生物研究所，北京100101)

摘要草莓枯萎病是目前危害北京草莓产业的主要病害，为筛选出安全有效的杀菌剂，采用组织分离法从北京昌平地区采集的草莓枯萎病株中分离到引起草莓枯萎病的病原菌。经形态学和分子生物学手段鉴定该病原菌为尖孢镰刀菌草莓专化型(Fusarium oxysporum Schlecht f.sp.fragariae Winks et Williams)。采用菌丝生长速率法对14种杀菌剂进行筛选，其中，206.7 g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、φ=25%腈菌唑、w=60%嘧菌酯、w=70%代森锰锌、w=75%百菌清、w=50%异菌脲7种杀菌剂对草莓枯萎病具有显著的抑菌效果，其EC50值分别为0.003、0.63、0.73、5.91、8.90、78.54、229.09 mg/L；另外，206.7 g/L 噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、w=70%代森锰锌和w=75%百菌清4种杀菌剂的药效可持续96 h以上，其他3种药剂处理48 h后对草莓枯萎病的抑制效果显著下降。因此，206.7 g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、w=70%代森锰锌和w=75%百菌清是草莓枯萎病防治的优先选择。

关键词草莓枯萎病；尖孢镰刀菌；EC50；杀菌剂防效

草莓(FragariaananassaDuchesne)，属宿根性多年生草本植物，具有易栽培、产量高、经济效益好等特点。近年来，草莓已成为重要的经济作物，随着草莓设施栽培面积的不断扩大，草莓枯萎病在一些主要种植区普遍发生，危害程度也逐年加重[1]。当草莓连作种植时，植株发病率可高达89.2%[2]。草莓枯萎病的致病菌为半知菌亚门、瘤座菌科、镰孢属、尖孢镰刀菌草莓专化型(FusariumoxysporumSchlecht. f. sp.fragariaeWinks et Williams)[3]，主要分布在日本和韩国，在中国的局部地区有分布[4]。该病菌不仅可以通过农具、种苗、土壤灌溉水等方式传播，也可以通过病残体传播，菌丝体或厚垣孢子随病残体遗落土中或在未腐熟的带菌肥料或种子上越冬，病菌在病株分苗时传播蔓延。当草莓栽培时厚垣孢子便开始萌发，从根部伤口侵入，在根和茎的维管束内繁殖、生长发育并形成小型分生孢子，并在导管中移动、增殖，堵塞维管束并分泌毒素破坏植株正常生长疏导机能从而引起植株萎蔫。该病可在苗期或开花至收获期发病，植株一旦发病将会造成结实率降低、果实膨大异常、品质下降、产量大幅度降低等后果，严重影响草莓产业的经济效益与持续发展[5]。

草莓连作所致枯萎病的防治技术包括农业防治、物理防治、生物防治和化学防治。农业防治主要采用作物轮作、移栽种苗前脱毒、选育抗病品种以及高架基质栽培等技术，但该技术大大提高劳动强度以及生产成本，未能在草莓种植中广泛应用。物理防治主要采用高温土壤消毒技术，但该类方法存在劳动强度大和严重的环境污染问题[6]。关于草莓枯萎病生物防治的研究也有报道，枯草芽孢杆菌DJ-6与吡唑醚菌酯及其混配对草莓枯萎病具有显著的室内抑菌活性与田间促生防病效果[7]，NF0919菌株发酵液和申嗪霉素对草莓枯萎病菌有显著抑制作用[8]。芽孢杆菌(Bacillussp.)B501和链霉菌(Streptomycessp.)S506对草莓枯萎病也有一定防治效果[9]。目前，草莓枯萎病的生物防治虽然前景较好，但技术尚不成熟，无法广泛应用于生产实践，因此，对该病害的防治仍以化学防治为主。长期以来，国内外防治草霉连作引起的根部病害主要依靠溴甲烷、氯化苦等[10-12]，但该措施带来的环境破坏和农残问题直接影响人类身体健康，引起人们的广泛关注。且溴甲烷已被多数国家禁用[12]，中国也于2011年禁止溴甲烷在草莓生产中使用(中华人民共和国农业部公告第1586号)。目前，常用百菌清、代森锰锌、多菌灵和甲基托布津等杀菌剂防治草莓枯萎病,因连续多年使用这些药剂，防治效果逐年降低，甚至达到无法控制的程度[7,13]。因此，寻找安全高效的替代防治措施迫在眉睫。

北京市的设施草莓种植面积已经超过500 hm2[14]。调查发现，目前草莓枯萎病在北京地区发生严重，设施栽培模式形成的高温高湿小气候环境加剧病害的发生。为防止单一、频繁、过量地使用化学杀菌剂，使病菌产生抗药性，本研究以广谱杀菌剂百菌清为阳性对照，选择14种(包括百菌清)低毒、安全且未被广泛应用于防治草莓枯萎病的生物或化学农药，测定各药剂对草莓枯萎病菌生长的抑制作用，以期对比筛选出防效明显、环境友好的草莓枯萎病杀菌剂。

1材料与方法

1.1病样采集

草莓枯萎病样本于2014年10月采集于北京市昌平区草莓基地。草莓苗为组培脱毒幼苗，品种为红颜。

1.2供试杀菌剂及来源

供试杀菌剂及来源见表1。

1.3草莓枯萎病原菌分离、纯化及形态鉴定

采用组织分离法分离草莓枯萎病病原菌[15]，即用剪刀把病健交界处剪下，剪成长约0.5 cm的小段，于φ=75%酒精浸泡30 s后在10 g/L次氯酸钠溶液中浸泡3 min，再用无菌水冲洗3次。将表面消毒过的病组织置于PDA(potato dextrose agar)培养基，28 ℃恒温光照/黑暗(12 h/12 h)培养3～5 d，待菌落形成后挑取少量菌丝移植至新的PDA培养基培养，并进一步通过单孢分离法纯化培养，于PDA斜面培养基保存，备用。

表1　供试杀菌剂及来源

1.4草莓枯萎病原菌分子生物学鉴定

采用生工生物工程(上海)股份有限公司生产的新型基因组DNA快速抽提试剂盒(真菌)提取草莓枯萎病菌DNA。用真菌rDNA-ITS(Nuclear ribosomal internal transcribed spacer)序列通用引物ITS4和ITS5[16](ITS4：5′-R GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3′；ITS5：5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)及草莓枯萎病菌EF-1α(translation elongation factor 1-alpha gene)序列引物EF1ya 和EF2ya[17](EF1ya:5′-ATGGGTAAGGARGACAAGAC-3′；EF2ya：5′-GGARGTACCAGTSATCATGTT-3′)，草莓枯萎病菌Btub (Beta-tubulin gene)序列引物bt2a和bt2b[18](bt2a：5′-GGTAACCAAATCGGTGCTGCTTTC-3′；bt2b：5′- ACCCTCAGTGTAGTGACCCTTGGC-3′)。PCR反应体系(50 μL)：2×TaqPCR StarMix with loading Dye (GenStar) 25 μL，10 μmol/L的上/下游引物各1 μL，50 mg/L真菌DNA提取液1 μL，加纯净水定容至50 μL。扩增反应条件：94 ℃变性5 min；94 ℃变性30 s，55 ℃退火30 s,72 ℃延伸40 s，35个循环；72 ℃最后延伸10 min。PCR产物于12 g/L琼脂糖凝胶电泳检测后送北京六合华大基因科技股份有限公司测序，将测序结果通过NCBI数据库进行BLAST比对，在GenBank的核酸序列库进行同源性分析，选取同源性较高的菌株，通过MEGA 5.0 软件的MCL(Maximum Composite Likelihood)法计算进化距离，构建种间系统发育树。

1.5草莓枯萎病原菌致病性测定

草莓人工培养接种方法见文献[15]，接种后，转入28 ℃温室培养，14 d后调查病害，记录植株的发病严重程度，计算发病率和病情指数。同时，再次分离发病植株的病原菌。

1.6不同杀菌剂对草莓枯萎病原菌的室内药效测定

杀菌剂毒力测定方法采用菌丝生长速率法[19]。每个药剂根据预试验结果设5个质量浓度处理(表2)，供试药剂按有效成分含量分别用无菌水稀释成相应质量浓度梯度的母液。

表2　14种杀菌剂的质量浓度

将相应体积药剂分别加入到灭菌且降温至45～50 ℃的PDA培养基，充分混匀后倒入灭菌培养皿，制成一系列设定质量浓度的含药培养基平板(表2)，每平板培养基的体积均为15 mL，冷却后备用。每处理重复3次，以不加药剂的PDA平板为对照(CK)。草莓枯萎病菌在PDA培养基生长4 d后，从菌落边缘用打孔器(直径为5 mm)打取菌饼，分别接种于预先准备好的含药PDA培养基平板中央，每皿接1个菌饼，每质量浓度药剂设3次重复。

平板在28 ℃恒温培养箱培养48 h和96 h后，分别用十字交叉法测量菌落直径，计算抑菌率。抑制率=(对照菌落直径-处理菌落直径)/(对照菌落直径-菌饼直径)×100%。将抑菌率换算成抑制机率值作为纵坐标，药剂质量浓度转化为质量浓度对数值作为横坐标，根据抑菌率机率值(y)与药剂质量浓度对数(x)间的线性回归关系，求毒力回归方程和相关系数，计算有效中质量浓度(Median effective mass concentration 50，EC50)，比较各供试药剂的抑制效果及病原菌对各供试药剂的敏感性。

1.7数据统计与分析

采用DPS7.5软件的Duncan’s新复极差法进行多重比较分析。采用SPSS 20软件计算不同杀菌剂的EC50值。

2结果与分析

2.1草莓枯萎病菌形态学及分子生物学鉴定结果

从发病草莓根部病健交界处分离到5个菌株(编号为CM001～CM005)，其菌落和形态学特征无明显差异。选择代表菌株CM001进行Koch’s准则的验证。

平板培养与显微观察结果表明(图1)，病原菌在PDA培养基培养4 d后，菌落呈白色，气生菌丝绒状。镜下小型分生孢子较多，卵形或肾形，0～1个隔膜，无色。大型分生孢子弯月形、镰刀形，较匀称，具1～4个隔膜，多数为3～4个隔膜。厚垣孢子单生或串生，球形[20]。

使用通用引物ITS4/ITS5对菌株CM001的rDNA-ITS基因进行PCR扩增得到长度为512 bp的DNA序列(GenBank No. KT833080)，该序列与GenBank中尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)的rDNA-ITS(GenBank: KJ699122.1)序列相似度达到100%；同时，使用镰刀菌特有引物EF1ya/EF2ya对菌株CM001的转录延长基因EF-1α进行PCR扩增，结果发现其DNA长度为648 bp(GenBank No. KT895270)，与尖孢镰孢菌的EF-1α(GenBank: KP025958.1)序列相似度也达到100%；另外，通过使用β-微管蛋白基因Btub的引物(bt2a/bt2b)对菌株CM001进行PCR扩增，获得1条约291 bp的序列片段(GenBank No. KT895271),与NCBI比对后发现待测真菌与尖孢镰孢菌的Btub(GenBank: KR072629.1)相似度也达到100%。另见MEGA5.0软件构建Btub基因的系统发育树(图2)。因此，通过和GenBank库中的3个重要鉴别基因(rDNA-ITS,EF-1α,Btub)的序列比对，可以证明：分离到的草莓枯萎病菌为尖孢镰刀菌草莓专化型FusariumoxysporumSchlecht f. sp.fragariaeWinks et Williams。

A. PDA培养基上的菌落形态　Colony morphology in PDA medium；B. 大型分生孢子　Macroconidia；C. 小型分生孢子　Microconidia

图2　CM001菌株的系统发育树

2.2草莓枯萎病菌致病性测定结果

待测菌株接种草莓幼苗14 d后观察幼苗发病症状，结果显示，发病初期叶片卷缩或呈波状产生畸形叶茎，老叶呈紫红色萎蔫，后叶片枯黄，最后全株枯死(图3-B)；对照无发病症状，正常生长(图3-A)。

2.3不同杀菌剂对草莓枯萎病原菌防治效果评价

草莓枯萎病菌的抑菌作用测定结果表明，14种药剂对FusariumoxysporumSchlecht f.sp.fragariaeWinks et Williams 的抑制效果差异明显(图4)，在设定质量浓度范围内，随药剂质量浓度的增加，抑菌效果呈现明显增强的趋势。其中，草莓枯萎病原菌菌丝生长48 h后的测定结果表明， 7种杀菌剂，包括206.7 g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、φ=25%腈菌唑、w=60%嘧菌酯、w=70%代森锰锌、w=75%百菌清和w=50%异菌脲的抑菌效果显著，在质量浓度Ⅰ时，206.7 g/L 噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉(Pythiumoligandrum)、w=70%代森锰锌和w=75%百菌清的抑菌率均达到100%；w=50%异菌脲、φ=25%腈菌唑、w=60%嘧菌酯的抑制率均达到50%以上；其他杀菌剂抑菌效果不显著。

A.健康草莓植株(对照)Heathy plant (CK)；B.感病草莓植株Diseased plant

图3人工接种草莓幼苗14 d后植株发病情况

Fig.3The symptom of infected strawberry

seedlings on 14 d post inoculation

菌落为草莓枯萎病菌在不同质量浓度含药培养基上生长48 h后的状态 The colonies growth state ofFusariumoxysporumSchlecht f.sp.fragariaeWinks et Williams cultivated for 48 h in media included different concentrations fungicides；A. 206.7 g/L噁酮·氟硅唑206.7 g/L Famoxadone · Flusilazole；B. 寡雄腐霉Pythiumoligandrum；C.φ=25%腈菌唑φ=25% Myclobutanil；D.w=60% 嘧菌酯w=60% Azoxystrobin；E.w=70%代森锰锌w=70%Mancozeb；F.w=75%百菌清w=75%Chlorothalonil；G.w=50%异菌脲w=50%Iprodione；质量浓度Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ依次降低10倍，对照无药剂添加Mass concentration from 1 to 5 decreases with 10 times,the concentrations ofⅠ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,and Ⅴwere decreased 10 times in sequence,the control (CK) is no fungicides addition

图47种杀菌剂对草莓枯萎病菌菌丝的抑制效果

Fig.4The inhibiting effect of 7 fungicides on the mycelial growth of the strawberryFusariumwilt pathogen

草莓枯萎病原菌菌丝生长48 h的测定结果表明，206.7 g/L 噁酮·氟硅唑抑制作用最强， EC50均值为3×10-3mg/L,其次为寡雄腐霉、φ=25%腈菌唑、w=60%嘧菌酯、w=70%代森锰锌、w=75%百菌清和w=50%异菌脲，EC50值分别为0.63、0.73、5.91、8.90、78.54和229.09 mg/L。毒力回归方程的斜率反映病原菌对药剂的敏感性，斜率越大，病原菌对药剂的敏感性越高，即随着质量浓度的增大，抑菌率明显增大。求得的毒力回归方程的斜率表明，草莓枯萎病菌对寡雄腐霉最敏感，其次为代森锰锌和噁酮·氟硅唑(表3)。

14 种杀菌剂抑制草莓枯萎病菌的持效期差异明显，噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、百菌清、代森锰锌4种杀菌剂不仅抑菌效果显著，且持效期比其他杀菌剂长，其抑制效果未随施药时间延长而显著降低，在最大施用质量浓度下(质量浓度Ⅰ)，206.7 g/L噁酮·氟硅唑的抑制率分别为100%(48 h)、100%(96 h)；寡雄腐霉的抑菌率分别为100%(48 h)、80.81%(96 h)；w=70%代森锰锌的抑制率分别为100%(48 h)、100%(96 h)；w=75%百菌清的抑菌率分别为83.78%(48 h)、81.25%(96 h)，这4种抑菌效果显著、药效持续时间长的杀菌剂是田间药剂施用的最佳选择。而另外4种杀菌剂的抑制率随施药时间延长而显著下降，如φ=25%腈菌唑的抑制率分别为77.67%(48 h)、58.69%(96 h)；w=60%嘧菌酯的菌率分别为89.06%(48 h)、79.34%(96 h)；w=50%异菌脲的抑菌率分别为87.74%(48 h)、83.29%(96 h)(图5)。

表3　不同杀菌剂对草莓枯萎病菌的EC50值

注： EC50值为抑制菌丝生长50%时的药剂质量浓度。

Note：EC50represents the mass concentration of the fungicides of mycelial growth is inhibited 50%.

3结论与讨论

草莓根腐病是近几年温室草莓生产上遇到的较难防治的土传病害，尤其是在多年种植草莓的重茬地块， 严重时可造成整个草莓区的毁园。草莓根腐病的致病菌种类繁多，目前世界草莓主产区报道的草莓根腐病致病菌已达20多种。北京地区也先后鉴定出立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)、木贼镰刀菌(Fusariumequiseti)、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)等多种致病真菌[20]。然而，有关致病菌的种下划分尚未见报道。草莓枯萎病菌(FusariumoxysporumSchlecht f. sp.fragariaeWinks et Williams)是引起草莓根腐的一种重要病原菌，引起草莓根部腐烂，进而使整株枯萎死亡。主要分布在日本、韩国，在中国的局部地区有分布[4]。近年来，草莓枯萎病在中国的一些主要种植区普遍发生，危害程度也逐年加重。多种致病真菌引起的症状相似，容易混淆，对病害防治带来一定的困难。因此，正确鉴定草莓根腐的病原菌及筛选防治药剂对田间防治病害有重要的指导意义。根据北京昌平地区草莓根腐病样的组织分离，得到致病菌分离物，致病性测定结果表明，该菌株为草莓枯萎病的病原菌。在传统的形态学基础上，结合rDNA-ITS、 EF-1α和Btub序列分析，对草莓枯萎病的病原菌进行鉴定，结果表明，该病原菌为半知菌亚门、瘤座菌科、镰孢属、尖孢镰刀菌草莓专化型(FusariumoxysporumSchlecht f. sp.fragariaeWinks et Williams)。在对采集到的草莓病原真菌进行分子鉴定时，除采用真菌通用的核糖体rDNA内转录间隔区(rDNA-ITS)序列的引物外，还针对镰刀菌转录延长因子基因( EF-1α)和β-微管蛋白基因(Btub)设计引物，2对引物补充使用可以避免ITS无法避免的自身缺陷，即种内差异的现象。可为草莓枯萎病致病菌的快速鉴定提供依据。

A. 206.7 g/L噁酮·氟硅唑206.7 g/L Famoxadone · Flusilazole；B. 寡雄腐霉Pythiumoligandrum；C.φ=25%腈菌唑φ=25% Myclobutanil；D.w=60%嘧菌酯w=60% Azoxystrobin；E.w=70%代森锰锌w=70%Mancozeb；F.w=75%百菌清w=75%Chlorothalonil；G.w=50%异菌脲w=50%Iprodione

图57种杀菌剂对F.oxysporum菌丝生长的抑制作用

Fig.5Inhibitory effect of 7 fungicides on the growth ofF.oxysporum

同时，通过菌丝生长速率法，筛选14种容易获得且低毒的生物农药和化学农药对草莓枯萎病菌进行室内毒力测定，旨在筛选出抑菌效果显著、药效持续时间较长的杀菌剂。杀菌剂室内药效试验结果表明，在供试的14种杀菌剂中，206.7 g/L噁酮·氟硅唑乳油可湿性粉剂对草莓枯萎病菌药效最强，EC50值为0.003 mg/L,其次为寡雄腐霉、腈菌唑、嘧菌酯、w=70%代森锰锌、w=75%百菌清、异菌脲，EC50值分别为0.63、0.73、5.91、8.90、78.54和229.09 mg/L。对杀菌剂抑制草莓枯萎病菌的持效期测定结果表明，206.7 g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、w=70%代森锰锌以及w=75%百菌清不仅抑菌效果显著，持效期也较长，是田间施药较为理想的选择。因此，除所选的阳性对照百菌清以外，206.7 g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、w=70%代森锰锌是新筛选的效果较为理想的杀菌剂。

在14种待筛选的杀菌剂中，有4种生物制剂，10种化学制剂。在4种生物制剂种，寡雄腐霉属于微生物制剂，φ=0.5%大黄素甲醚属于植物源杀菌剂，还有2种为抗生素类杀菌剂分别为w=72%硫酸链霉素和φ=4%农抗120， 这4种对人畜低毒的环境友好型杀菌药剂适合应用到有机蔬菜的生产中。除上述4种生物制剂外，还测试了其余10种化学杀菌剂，结果显示，206.7 g/L噁酮·氟硅唑乳油对草莓枯萎病菌的抑菌效果最好，并且持效期也较长。206.7 g/L噁酮·氟硅唑是由噁唑菌酮和氟硅唑2种杀菌剂组成，复配具有增效作用，兼具触杀和内吸的功能，可抑制甾醇脱甲基化，延缓抗性菌株的产生[19,21]。而寡雄腐霉的抑制作用仅次于前者，寡雄腐霉作为微生物杀菌剂，其本质是自然界中存在的一种攻击性很强的寄生真菌，也能在多种农作物根围定殖，是下一步对控制草莓枯萎病的田间试验的较好的药剂选择[22-23]。作为阳性对照，百菌清的抑菌效果显然低于206.7 g/L 噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉和w=70%代森锰锌。综上所述，本研究结果对防治草莓枯萎病的农药选择具有重要意义。

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Isolation and Identification of StrawberryFusarium

Received 2015-10-23Returned2015-11-26

Foundation itemThe Scientific Research Foundation of Beijing Municipal Education Commission in 2015 (No.KM201510020004); Key Laboratory of Urban Agriculture (North) Ministry of Agriculture (No.KFK2015001).

First authorYI Haijing,female,master student. Research area:research control technology of plant disease. E-mail:345736209@qq.com

WANG Younian,male,professor. Research area:fruit ecological security. E-mail:wyn1951@126.com

(责任编辑：郭柏寿Responsible editor:GUO Baishou)

Wilt Pathogen and Fungicides Screening

YI Haijing1,CHEN Yan1,LIU Zhengping1,WANG Younian1,YANG Xiao1and LIU Jun2

(1. Key Laboratory of Urban Agriculture (North) Ministry of Agriculture,Beijing University of Agriculture,Beijing102206,China; 2. Institute of Microbiology,Chinese Academy of Sciences,Beijing100101,China)

AbstractStrawberry Fusarium wilt is a major threat of strawberry industry in Beijing. In order to screen for the safe and effective fungicides to control strawberry Fusarium wilt spreading in Beijing area,tissue isolation method were used to isolate the casual agent that caused Fusarium wilt of the strawberry in Changping district of Beijing.The pathogen was identified as Fusarium oxysporum Schlecht f. sp. fragariae Winks et Williams through morphological,molecular biological methods and pathogenicity analysis. Subsequently,14 fungicides were screened by the mycelium growth rate method. According to the value of EC50,7 fungicides showed significant inhibitory effect on the pathogen of strawberry Fusarium wilt,which were 206.7 g/L famoxadone · flusilazole,Pythium oligandrum,φ=25% myclobutanil,w=60% azoxystrobin,w=70% mancozeb,w=75% chlorothalonil,and w=50% iprodione,which EC50value is respectively 0.003,0.63,0.73,5.91,8.90,78.54,and 229.09 mg/L. Moreover,inhibitory effect of 4 fungicides,including 206.7 g/L famoxadone · flusilazole,Pythium oligandrum,w=70% mancozeb,and w=75% chlorothalonil,lasted for 96 h; however,the inhibitory effect of the remaining 3 fungicides significantly decreased after 48 h. Therefore,4 fungicides,including 206.7 g/L famoxadone · flusilazole,Pythium oligandrum,w=70% mancozeb and w=75% chlorothalonil,are the best choice of field fungicide application for strawberry Fusarium wilt.

Key wordsStrawberry; Fusarium wilt; Fusarium oxysporum; EC50; Efficacy of fungicides

收稿日期：2015-10-23修回日期：2015-11-26

基金项目：北京市教委2015年度科研计划(KM201510020004)；农业部都市农业(北方)重点实验室项目(KFK2015001)。

通信作者：陈艳，女，讲师，博士，从事植物病害防治技术研究。E-mail：cheny@bua.edu.cn

中图分类号S432

文献标志码A

文章编号1004-1389(2016)04-0626-10

Corresponding authorCHEN Yan,female,lecturer,Ph.D. Research area:research control technology of plant disease. E-mail:cheny@bua.edu.cn

网络出版日期：2016-04-02

网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1220.S.20160402.1118.040.html

第一作者：伊海静，女，硕士，研究方向为植物病害防治技术。E-mail：345736209@qq.com

王有年，男，教授，从事果品优质生态安全研究。E-mail：wyn1951@126.com