不同放疗剂量联合PF化疗食管癌患者外周血miR-21水平变化及其意义

2016-06-03李晓宁

中国老年学杂志 2016年8期

关键词：放化疗放射性外周血

李晓宁

(河北医科大学第四医院肿瘤学放疗，河北　石家庄　050017)

不同放疗剂量联合PF化疗食管癌患者外周血miR-21水平变化及其意义

李晓宁

(河北医科大学第四医院肿瘤学放疗，河北石家庄050017)

〔摘要〕目的探讨不同放疗剂量联合PF化疗食管癌患者外周血miR-21水平变化及其临床意义。方法回顾性分析该院肿瘤科收治的食管癌患者85例，全部患者均采用放疗联合PF方案化疗，根据不同放疗剂量将患者分为观察组(放疗剂量50 Gy，45例)，对照组(放疗剂量>50 Gy，40例)，采用RT-PCR法测定外周血miR-21水平，比较近远期疗效及其外周血miR-21水平的差异。结果两组总缓解率，1、2、3年生存率比较无统计学意义(P>0.05)，观察组平均生存时间明显高于对照组(P<0.05)，治疗前，两组外周血miR-21水平比较无统计学意义(P>0.05)，治疗后，全部患者外周血miR-21水平均明显低于治疗前(P<0.05)，其中观察组外周血miR-21水平明显高于对照组(P<0.05)。观察组放射性食管炎与骨髓抑制发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论低放疗剂量联合PF化疗通过显著降低外周血miR-21水平，而显著延长生存时间与降低放疗副作用，值得临床推广应用。

〔关键词〕放疗；化疗；食管癌；miR-21

手术治疗是可切除食管癌的最佳手术方案，但手术治疗食管癌的适应证仅约20%〔1〕。放疗同期化疗用于中晚期食管癌患者的临床疗效显著〔2〕。本文旨在探讨不同放疗剂量联合PF方案化疗食管癌患者外周血miR-21水平变化及其临床意义。

1资料与方法

1.1临床资料回顾性分析2010年1月至2012年1月我院肿瘤科收治的食管癌患者85例，年龄60～74岁，其中男65例，女20例。纳入标准：全部患者均经食管镜检测与病理组织学检查符合食管鳞癌的诊断标准〔3〕，对本研究试验知情同意，自愿参加并签署知情同意书，完善胸部CT、上腹部CT、腹部B超、食管钡餐造影检查，明确无食管癌远处器官转移。卡氏功能状态评分(KPS)标准〔4〕≥70分，具有完整的临床资料与随访资料。根据不同放疗剂量将患者分为观察组(45例)，对照组(40例)。观察组男35例，女10例，平均年龄(72.14±6.54)岁，病变部位：颈段5例，胸上段16例，胸中段16例，胸下段8例；病变长度≤5 cm 22例，>5 cm 23例，T分期：T2期8例，T3期22例，T4期15例；临床分期(参照非手术食管癌临床分期标准)：Ⅰ期5例，Ⅱ期24例，Ⅲ期16例；化疗周期：2个周期化疗8例，3个周期5例，4个周期32例。对照组男30例，女10例，平均年龄(72.22±6.48)岁，病变部位：颈段4例，胸上段14例，胸中段13例，胸下段9例；病变长度≤5 cm 19例，>5 cm 21例，T分期：T2期7例，T3期20例，T4期13例；临床分期：Ⅰ期4例，Ⅱ期23例，Ⅲ期13例；化疗周期：2个周期化疗7例，3个周期4例，4个周期29例；两组患者性别、年龄、病变部位、病变长度、T分期、临床分期与化疗周期等基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2治疗方法全部患者均采用放疗联合PF方案化疗。

1.2.1放疗采用直线加速器6-MV X线外照射，采用头颈肩膜，体膜或真空垫固定，CT定位扫描，肿瘤靶区外扩宽度(前后左右)5 mm，食管纵轴外延30 mm左右，计划靶区由临床靶区外延5 mm组成，并同时勾画出临近的组织以及器官，其中包括、肺脏、气管、脊髓。常规分割治疗，2 Gy/次，5次/w，观察组放疗剂量为50 Gy，对照组放疗剂量>50 Gy，平均(64.15±6.24)Gy，其中56 Gy 2例，59 Gy 3例，60～69 Gy 35例。

1.2.2PF化疗顺铂75 mg/m2，静脉滴注，分5 d静脉滴注，5-氟尿嘧啶600 mg/m2，第1～5天。化疗于放疗开始的第1、28、49天实施，共2～4个周期。

1.3检测方法放疗前、放疗结束后第3周采集外周血标本5 ml，2 h内离心分离血浆，高速离心去除杂质，液氮保存待测，采用miR VanaTM PARISTM microRNA 提取试剂盒(美国ABI公司)说明书操作，提取血浆总RNA，采用Nano Drop1000分光光度计测定RNA浓度，将RNA反转录成c DNA，以c DNA作为模版实时荧光定量PCR扩增miR-21与miR-1228，扩增引物由美国Life Technologies 公司提供，以miR-1228作为内参照。PCR反应采用Taqman small RNA assays 试剂盒(美国ABI公司)，PCR反应条件：96℃预变性10 min；95℃15 s、60℃1 min，45 个循环。以ΔCt值表示miR-21水平。全部样本设定3个重复孔。

1.4观察指标(1)近期疗效：治疗结束1个月后完善胸部CT、食管造影检查，评估近期疗效，根据世界卫生组织(WHO)疗效标准〔5〕，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、疾病稳定(SD)和疾病进展(PD)，总缓解率=(CR+PR)/研究例数×100%。(2)远期疗效：全部患者均随访至2015年1月，每3个月随访1次，采用电话、门诊与住院随访方式，全部患者均获得随访。比较两组患者平均生存时间与1、2、3年生存率的差异。(3)比较两组患者治疗前后外周血miR-21水平的差异。(4)参照美国肿瘤放疗协作组制定的放疗副作用标准〔6〕，比较两组患者放射性食管炎、放射性肺炎、胃肠道反应与骨髓抑制等副作用发生率的差异。

1.5统计学方法采用SPSS18.0软件进行t检验、χ2检验。

2结果

2.1两组近远期疗效比较观察组总缓解率低于对照组，但无统计学意义(P>0.05)，见表1。观察组平均生存时间(22.65±3.21)个月，明显高于对照组(19.06±2.14)个月(t=5.99，P<0.05)，观察组1、2、3年生存率〔35例(77.78%)，19例(42.22%)，15例(33.33%)〕稍高于对照组〔28例(70.00%)，14例(35.00%)，10例(25.00%)〕，但差异无统计学意义(P>0.05)。

表1两组近期疗效比较〔n(%)〕

2.2两组外周血miR-21水平比较治疗前，观察组和对照组外周血miR-21水平比较(6.29±0.79，6.28±0.81)差异无统计学意义(P>0.05)，治疗后，全部患者外周血miR-21水平均明显低于治疗前(P<0.05)，且观察组(4.26±0.28)明显低于对照组(5.11±0.36)(P<0.05)。

2.3两组副作用比较观察组放射性食管炎与骨髓抑制发生率明显低于对照组(P<0.05)，两组放射性肺炎、胃肠道反应发生率比较无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2两组副作用比较〔n(%)〕

组别n放射性食管炎放射性肺炎胃肠道反应骨髓抑制观察组4539(86.67)11(24.44)37(82.22)35(77.78)对照组4040(100.00)12(30.00)35(87.50)39(97.50)χ2值3.890.330.467.31P值<0.05>0.05>0.05<0.05

3讨论

大部分食管癌确诊时已处于中晚期，容易发生淋巴结转移。放疗对原发病灶治疗疗效满意，但对于淋巴结转移治疗具有一定的局限性〔7〕。因此，放化疗成为了中晚期食管癌的主要治疗手段。相关文献证实，放化疗在改善食管癌长期生存率与局部控制率中显著优于单纯化疗〔8〕。但关于放疗剂量对食管癌的近远期疗效的影响及其机制研究甚少。相关文献显示，50.44 Gy与61.25 Gy放疗剂量联合PF方案化疗食管癌的临床疗效相当，揭示了增加放疗剂量并不能不增加食管癌生存率与局部控制率，故采用50.44 Gy作为食管癌同步放化疗的标准剂量，且50.44 Gy放疗剂量有助于降低放疗副作用〔9〕。但也有研究显示，50.44 Gy联合PF方案化疗显著提高食管癌局部控制率，降低毒副作用，改善患者生活质量〔10〕。

本研究结果揭示了低放疗剂量显著延长生存时间，其可能与低放疗剂量显著降低放疗副作用有关。放疗副作用主要为放射性食管炎、放射性肺炎、胃肠道反应与骨髓抑制，不同放疗剂量患者放射性肺炎、胃肠道反应发生率比较差异无显著性，而低放疗剂量患者放射性食管炎、骨髓抑制发生风险显著降低，由于高放疗剂量导致食管局部黏膜组织损伤与白细胞减少，这可能是明显缩短生存时间的重要原因〔11〕。低放疗剂量在一定程度上延长生存时间可能与低放疗剂量显著降低外周血miR-21水平有关。外周血miR-21是新型恶性肿瘤的生物调控靶向指标，通过动态观察外周血miR-21动态变化，有助于评估食管癌放化疗患者的预后状况。miR-21是内源性非编码miRNA，在调控基因表达，维持细胞周期与分化形态中具有重要的作用，且miR-21与肿瘤放化疗敏感程度具有重要的意义。相关研究显示，早期胰腺癌患者血浆miR-21水平明显高于慢性胰腺炎，可作为早期胰腺癌的生物学诊断标记〔12〕。同时，外周血miR-21在结肠癌患者中显著增高，且与预后状况具有明显的正相关〔13〕。因为低放疗剂量患者生存时间明显延长，放疗副作用显著降低，导致外周血miR-21水平下降幅度最为明显〔14〕。根据不同患者把握合理的放化疗剂量、放化疗时间序贯与靶向治疗方案是食管癌个性化治疗的重点。

4参考文献

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