欧洲药典法测定非洛地平含量

张建红，丁永英，张小红

(1.武汉市汉口医院药剂科，武汉　430012；2.武汉妇幼保健院，武汉　430000)



欧洲药典法测定非洛地平含量

张建红1，丁永英1，张小红2

(1.武汉市汉口医院药剂科，武汉430012；2.武汉妇幼保健院，武汉430000)

摘要：目的建立非洛地平的含量测定方法。方法使用硫代硫酸钠标定的硫酸铈滴定液(0.1 mol·L-1)对非洛地平含量进行测定，与《中国药典》中使用三氧化二砷标定的测定方法进行结果比较分析，这是该方法首次应用于非洛地平含量测定。结果在80%～120%范围内，校正体积与称样量呈良好线性关系，V=51.782 m+0.033 4(r=0.999 9)。2种方法测量值无显著性差异(P>0.05)。结论该方法简便、安全、快速、准确，适用于该产品的质量控制。

关键词：非洛地平；准确性；含量测定

高血压病是最常见的心血管病，是全球范围内的重大公共卫生问题之一。全世界高血压病患者大约有10亿人[1]。二氢吡啶类钙拮抗剂(CCB)早在20世纪90年代就被ISH和WHO推荐为一线降压药，非洛地平则是二氢吡啶类钙拮抗剂(CCB)中较为常用的一种抗高血压药。对于治疗老年高血压伴肾功能损害患者，非洛地平是一种安全、有效的降压药[2]，但《中国药典》2010年版对非洛地平原料药含量测定中的滴定液硫酸铈是用三氧化二砷来标定，砷对人体有害，砷剂可引起消化道反应、泌尿系统反应、神经皮肤反应[3]，因此参考欧洲药典(Ph.Eur.7.4)的含量分析方法，在确保药品安全、有效、质量可控的基础上，改用硫代硫酸钠标定硫酸铈，对非洛地平进行含量测定，并进行方法验证。结果表明，此法对人体无害、操作简便、对设备要求低、用时短，便于实验的进行。

1仪器与试药

1.1仪器鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)；电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)。

1.2试药叔丁醇(HPLC，天津科密欧化学试剂有限公司)；高氯酸(AR，天津政成化学试剂有限公司)；硫酸铈滴定液(0.1 mol·L-1，浓度因子：1.002)；邻二氮菲指示剂(天津科密欧化学试剂有限公司)。

2方法与结果

2.1溶液的配制与标定

2.1.1淀粉溶液的配制取可溶性淀粉1.0 g，置于5 mL的水中，溶解混匀后，将此混合物加到含10 mg碘化汞的100 mL沸水中，混匀，即得。

2.1.2硫代硫酸钠滴定液的配制与标定配制：取硫代硫酸钠25 g，碳酸钠0.2 g，加无二氧化碳的水溶解，并稀释至1 000 mL，摇匀，放置1个月后过滤，标定，即得。标定：量取0.33 mol·L-1溴酸钾溶液10.0 mL，加入水40 mL，碘化钾溶液10 mL及盐酸溶液15 mL。用硫代硫酸钠滴定液滴定至近终点时，加入淀粉溶液1 mL作为指示剂，继续滴定至蓝色消失[4]。

2.1.3硫酸铈滴定液的配制与标定配制：取硫酸铈0.4 g，溶解于含水500 mL和硫酸50 mL的混合溶液中，放冷，加水稀释至1 000 mL，即得。标定：用硫代硫酸钠(0.1 mol·L-1)滴定至接近终点时，加入淀粉溶液0.8 mL作为指示剂，继续滴定至蓝色消失。

2.1.4邻二氮菲指示剂的配制取0.7 g硫酸亚铁和1.76 g邻二氮菲，溶解于70 mL的新沸放冷至室温的纯化水中，并用新沸放冷至室温的纯化水稀释至100 mL，即得。

2.1.5其他溶液的配制高氯酸溶液：量取高氯酸8.5 mL，加纯化水稀释至100 mL，混匀，即得。空白溶液：含叔丁醇25 mL和高氯酸25 mL的混合溶液。供试品溶液：取供试品0.160 g，精密称定，置于碘量瓶中，加入叔丁醇和高氯酸各25 mL的混合溶液，超声使其完全溶解，即得。

2.1.6操作取供试品溶液，加入0.05 mL邻二氮菲指示液，用硫酸铈滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至粉色消失，并将滴定结果用空白实验校正，每1 mL硫酸铈滴定液(0.1 mol·L-1)相当于19.21 mg的C18H19Cl2NO4。空白溶液1份，测定1次；供试品溶液3份，各测定1次。

2.2干燥质量测定取恒质量的空瓶，分别称取样品30.458 85和31.255 00 g；干燥后的质量分别为30.456 92和31.253 16 g；干燥失质量分别为0.019 30%和0.018 40%。非洛地平2次干燥失质量值均≤0.2%，符合欧洲药典规定[5]。

2.3专属性该方法基于非洛地平二氢吡啶环上活泼氢具有还原性，因此选择在酸性介质中，通过铈量法测定其含量。

2.3.1溶液配制空白溶液：配制方法见2.1.5，平行配制2份。

2.3.2空白滴定分析分别量取空白溶液0.03和0.04 mL，按照2.1.6项下描述的滴定条件，平行测定2次，得均值0.035 mL，空白消耗体积不超过0.15 mL，小于可接受标准，符合专属性要求。

2.4精密度

2.4.1空白溶液、供试品溶液配制方法见2.1.5，空白溶液配制1份，供试品溶液平行配制6份；取上述空白溶液和6份供试品溶液，加入0.05 mL邻二氮菲指示液，用硫酸铈滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至粉色消失，并将滴定结果用空白实验校正。计算供试品中C18H19Cl2NO4的含量，并报告结果的RSD值。

2.4.2可接受标准重复测定6份供试品溶液，C18H19Cl2NO4的含量在99.0%～101.0%范围内，RSD<0.5%。

2.4.3实验结果所测6个样品的RSD值为0.01%，小于可接受标准，符合重复性要求。见表1～3。

表1重复性实验测定

Tab.1 Results of repeatability test

测定次数称样量/g消耗体积/mL空白溶液体积/mL1-S/%含量/%平均含量/%RSD/%10.16048.340.0499.9899.6299.620.0120.16028.330.0499.9899.6230.16088.360.0499.9899.6140.16008.320.0499.9899.6350.16068.350.0499.9899.6260.15968.300.0499.9899.64

注：1-S为干燥质量测定后非洛地平的真实质量。

表2重复性实验结果

Tab.2 Results of repeatability test

测定次数称样量/g消耗体积/mL空白溶液体积/mL1-S/%含量/%平均含量/%RSD/%10.16058.340.0399.9899.6899.690.1220.16098.380.0399.9899.9130.15988.300.0399.9899.6440.16018.310.0399.9899.5750.16028.320.0399.9899.6360.15068.350.0399.9899.74

注：1-S为干燥质量测定后非洛地平的真实质量。

表3重复性与中间精密度实验

Tab.3 Repeatability and precision tests

结果分析人A结果/%分析人B结果/%199.6299.68299.6299.91399.6199.64499.6399.57599.6299.63699.6499.74平均值/%99.66RSD/%0.09

结果显示，所测12个样品的RSD值为0.09%，符合规定(由重复性和中间精密度得到的12个结果的RSD应≤0.5%)，符合重复性要求。

2.5溶液稳定性取非洛地平0.160 g，精密称定，置于碘量瓶中，分别加入25 mL的叔丁醇与高氯酸溶液，超声使其完全溶解。配制时间为0 h，分别在配制后0，0.5，1.0，1.5，2.0和3.0 h(可根据实际操作延长或更改时间)，加入0.05 mL邻二氮菲指示液，用硫酸铈滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至粉色消失，并将滴定结果用空白实验校正；计算放置后不同时间点非洛地平的含量，并将结果与0 h比较，其比值应在0.990～1.010之间。结果表明，各个时间点非洛地平的含量与0 h相比，其比值在均在0.990～1.010之间，非洛地平溶液在该段时间内稳定。见表4。

表4稳定性实验结果

Tab.4 Results of stability tests

时间/h称样量/g消耗体积/mL空白溶液体积/mL1-S/%含量/%与0h的比值0 0.16098.380.0499.9899.790.50.16078.380.0499.9899.921.00121.00.16058.390.0499.98100.161.00361.50.15998.310.0499.9899.579.97802.00.16088.390.0499.9899.971.00183.00.15108.400.0499.9899.971.0018

注：1-S为干燥质量测定后非洛地平的真实质量。

2.6线性与范围精密称定非洛地平0.127 0，0.142 8，0.158 6，0.175 1和0.190 3 g；0.129 4，0.145 6，0.161 7，0.178 3和0.193 9 g，分别置于碘量瓶中，各加入25 mL叔丁醇与高氯酸溶液，超声使其完全溶解，制成含非洛地平80%～120%的2组线性溶液。取空白溶液和80%～120%线性溶液，加入0.05 mL邻二氮菲指示液，用硫酸铈滴定液(0.1 mol·L-1)滴定至粉色消失，并将滴定结果用空白实验校正。以其每个浓度点的2次称样量的平均值(X)对校正后消耗滴定液的平均体积(Y)进行二元线性回归，见表5。

表5滴定实验结果

Tab.5 Results of titration test

体积分数/%称样量平均值/g消耗平均体积/mL空白溶液体积/mL含量/%800.12826.720.04100.32900.14427.540.04100.131000.16028.340.0499.681100.17679.240.04100.241200.192110.010.04100.32

线性方程:V=51.782m+0.033 4(V为校正体积，m为称样量)，r=0.999 9。表明样品在80%～120%范围内，校正体积与称样量线性关系良好。

表62种方法测定3批样品含量结果

Tab.6 Comparison of content determination of 3 batches of samples by 2 methods

制剂批号样品编号EP法测定含量/%Ch.P法测定含量/%130121199.3299.31299.3699.33399.4499.34130122499.4699.50599.4499.41699.6399.71130123799.8399.81899.8499.73999.7799.82x±s99.56±0.2099.55±0.22t测0.610.54F测0.020.90

由表6可知，2种不同检测方法，对同一样品检测结果不存在显著性差异，所以2种方法可以互相替代(P≥0.05)。

3结论

非洛地平为选择性钙离子拮抗药，由阿斯利康公司开发和推出，是一种对血管有高度选择性的二氢吡啶类钙离子拮抗剂，本品化学名称为4-(2，3-二氯苯基)-1，4-二氢-2，6-二甲基-3，5-吡啶二羧基乙基甲基酯[6]。二氢吡啶类钙拮抗剂是通过减少细胞内钙离子的含量，舒张血管平滑肌，从而达到降低血压的目的。近年来，通过不断研究发现，非洛地平药物治疗慢性充血性心力衰竭效果明显[7]。本文在质量控制方面，也做了一些方法改进，《中国药典》对非洛地平含量测定是用三氧化二砷标定的硫酸铈滴定液，但砷对人体有害，因此本法参考Ph.Eur.7.4中非洛地平的含量测定方法，改用硫代硫酸钠标定的硫酸铈滴定液(0.1 mol·L-1)对非洛地平进行含量测定，避免了砷离子在质量检测中的应用，为确保检验数据的科学性、准确性和真实性，对该方法进行验证，经过验证比较，该方法专属性强，精密度(RSD<0.5%)和稳定性都符合要求，在80%～120%范围内，校正体积与称样量线性关系良好(r=0.999 9)，最后通过比较2种方法测定3批样品含量结果，采用F检验和配对t检验，结果显示，2种不同检测方法对同一样品检测结果不存在显著性差异(P≥0.05)，所以2种方法可以互相替代。此方法只是将标定液做了改进，但这是该方法首次应用于国内该仿制药的检测，选用比较安全无害的硫代硫酸钠，操作简便、用时短、提高了质检员的依从性，便于实验的进行。

参考文献：

[1]赵敏军，韦永强.抗高血压药的研究进展[J] .医学综述，2010，16(24)：3790-3792.

[2]王海峰，韩亚兰，郭兰凤．非洛地平对老年高血压伴肾功能损害患者降压疗效的探讨[J]．西北药学杂志，2003，18(1)：27-28．

[3]张西春，曹晓莉，李皓，等.砷剂治疗恶性肿瘤的临床探讨[J]．西北药学杂志，2005，20(2):83.

[4]欧洲药典委员会.欧洲药典(6.0)[S]，2007：515.

[5]欧洲药典委员会.欧洲药典(6.0)[S]，2007：53-54.

[6]刘杰，朱杰华.浅论非洛地平的药理作用及临床应用[J].中国医药指南， 2010，8(19)：214-215.

[7]耿永方.对非洛地平治疗慢性充血性心力衰竭的临床药学效果分析[J].当代医学，2013，19(29):93-94.

Content determination for felodipine by using European Pharmacopoeia method

ZHANG Jianhong1，DING Yongying1，ZHANG Xiaohong2

(1.Department of Pharmacy，the Hankou Hospital，Wuhan 430012，China；2.Wuhan Maternity and Child Health Care Hospital， Wuhan 430000，China)

Abstract:Objective To establish a method for the content determination of felodipine. Methods Cerous sulfate standard solution demarcated by sodium thiosulfate was used to measure the content of felodipine，and compared with the results obtained by the method of Ch.P. Results The titration volume and the drug ammount showed a good linear relationship in the range of 80%-120%.The regression equation was V=51.782 m+0.033 4(r=0.999 9).There was no significant difference between the results obtained from the two methods(P>0.05).Conclusion The method is simple，safe，quick and accurate.It is suitable for the quality control of the product.

Key words:felodipine；accuracy；content determination

(收稿日期：2015-08-01)

中图分类号：R927.2

文献标志码：A

文章编号：1004-2407(2016)03-0257-03

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.03.011