施灸赫依三穴对失眠模型大鼠镇静催眠作用机理研究

2016-05-20高玉峰

中国民族医药杂志 2016年12期

关键词：巴比妥钠赫依施灸

高玉峰

(内蒙古民族大学附属医院，内蒙古通辽 028007)

施灸赫依三穴对失眠模型大鼠镇静催眠作用机理研究

高玉峰

(内蒙古民族大学附属医院，内蒙古通辽 028007)

以蒙医灸疗法为处理因素，探寻施灸赫依三穴对睡眠紊乱模型大鼠行为学及脑组织神经细胞因子的影响。方法：将50只大鼠分为空白、模型、顶会穴、赫依穴、黑白际穴等5组，每组10只，空白与模型组大鼠经腹腔注射对氯苯丙胺酸(PCPA)使大鼠睡眠节律紊乱，顶会穴、赫依穴、黑白际穴组分别施灸相应穴位。观察各组大鼠腹腔注射戊巴比妥钠后的睡眠时间。检测大鼠脑组织NO与NOS含量。结果：(1)各组大鼠对戊巴比妥钠睡眠时间比较：治疗后与模型组比较空白组和治疗组均有显著性差异(P<0.05)；(2)各组大鼠脑组织中NO含量和NOS活性比较:与模型组比较空白对照组、顶会穴组和赫依穴组均有显著性差异(P<0.05)，黑白际穴组无明显差异(P>0.05)。结论：施灸赫依三穴对睡眠紊乱模型大鼠具有镇静催眠作用，顶会穴与赫依穴可能是通过抑制脑组织一氧化氮合酶(NOS)诱导产生过量的一氧化氮(NO)，降低神经细胞的兴奋性，起到神经保护作用，黑白际穴组对脑组织中NO与NOS无影响，可能是通过其他途径起到神经调节作用。

蒙医灸疗；赫依三穴；镇静催眠作用；机理研究

失眠是指患者对睡眠时间或质量不满足并影响白天社会功能的一种主观体验。失眠会引起人的全身不适、疲劳感、不安、无精打采，反应迟缓、记忆力不集中等症状，它的最大影响是精神方面的，严重一点会导致精神分裂。现如今，失眠症的发生率逐年增高，我国失眠障碍患者比例已超过20%。因睡眠质量问题导致的多种社会问题及事故发生几率较睡眠正常人高出2倍。

在市场上治疗失眠症的药物诸多。口服西药虽能迅速入眠，但容易成依赖或成瘾。因此人们越来越追求传统医学治疗失眠症的方法[1]。

灸法是蒙医传统“五疗”的重要内容之一。蒙医灸法是以蒙医基础理论为指导，经过长期的、大量的临床实践经验积累而形成的一种独特的非药物疗法。是在人体各部相关的固定穴位或不定穴位上通过“灼热”或“温热”刺激而达到调节气血、增强体质、防治疾病和保健的目的[2]。该法具有适应范围广，疗效卓著，见效快，复发率低，副作用小，经济方便等优点。对失眠症、健忘症、消化不良、胃火衰败、浮肿、癫狂等多中疾病疗效显著[3]。

赫依三穴是指顶会穴(位于从两眉正中，往上划一线，再从两耳叶上缘正中往上划一线，此二线在头顶之交叉处便是，即中医之百会穴)、赫依穴(位于第七颈椎棘突与第一胸椎棘突间隙窝中。即中医之大椎穴)、黑白际穴(位于两乳正中对直的心窝处，即中医之膻中穴。)等3个穴位。临床上针灸该3个穴位对赫依偏盛引起的疾病(如失眠症)有较好的疗效[3]。

该实验研究中我们以蒙医灸疗法为处理因素，选取赫依三穴作用于失眠伴焦虑模型大鼠，对其疗效机理加以验证，为今后的机制研究奠定基础。为临床辩证施治提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料：采用健康级Wister大鼠50只,体重180± 20g，由吉林大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(吉)2011-0004。药物：对氯苯丙胺酸(PCPA),由北京环亚太克生物医学技术有限公司提供，批号：sigma—c6506。NOS与NO试剂盒：上海泸尚生物科技有限公司提供。艾灸贴(苏州东方艾绒厂出品)直径约4mm，长约1cm，灸垫厚度为2mm。

1.2 方法：购买Wister大鼠后在饲料充足、无干扰的正常睡眠状态下饲养3d。称重后随机分为空白组、模型组、顶会穴组、赫依穴组、黑白际穴组等5组，每组10只。治疗组与模型组：将PCPA用生理盐水配置成混悬液(45mg/100g)，腹腔注射PCPA 混悬液(1mL/100g)，每日1次，连续注射2d；空白对照组常规喂养；当动物出现毛皮枯槁，举肢、理毛、走动次数明显，不能安卧等外部特征与文献报道一致[4],即造模成功。治疗组：d3起开始施灸，按参考文献[5，6]记载在大鼠顶会穴、赫依穴、黑白际穴剪去穴位周围鼠毛，进行施灸，每次行3个艾灸贴，时间5min,共施灸7d。空白组和模型组d3开始按程序抓取不施灸，连续7d。

1.3 指标检测：于末次灸疗1h后，每组大鼠分别给予戊巴比妥钠40 mg/kg，腹腔注射。记录大鼠的睡眠时间(以翻正反射消失为入睡时间，从翻正反射消失至恢复时间为睡眠持续时间)。之后将各组大鼠断头处死，即刻剥离出脑组织备用。脑组织中NO与NOS含量测定分别依据NOS与NO的测定试剂盒说明书进行。

1.4 统计学方法：数据用SPSS 17.0统计软件处理，结果用±S表示，两组间资料比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异有显著性意义。

2 结果

2.1 对大鼠戊巴比妥钠睡眠时间的影响：模型组与空白组比较，模型组大鼠睡眠时间短(P<0.05)。模型组和3个治疗组间比较，3个治疗组大鼠的睡眠时间均延长(P<0.05)，见表1。

表1 治疗后大鼠对戊巴比妥钠睡眠时间的影响

注:模型组与空白组比较，◆P<0.05；与各治疗组比较●P<0.05，●●P<0.05，●●●P<0.05；

2.2 对大鼠脑组织中NO与NOS的影响：各组大鼠脑组织中NO含量和NOS活性比较: 模型组和空白对照组之间有显著性差异(P<0.05)。与模型组比较顶会穴组和赫依穴组均有显著性差异(P<0.05)，黑白际穴组无明显差异(P>0.05)，见表2

表2 对大鼠脑组织中NO与NOS的影响

注:与空白组比较，◆P<0.05；与模型组比较，●P<0.05，●●P<0.05，●●●P>0.05

3 讨论

蒙医学认为失眠的主要原因是因赫依与血相搏而导致的，按三根病变说，赫依偏盛紊乱是其基本原因；就发病部位讲，失眠多合并于心、肾病、脑、神经病等。因语境行为过度、委屈或兴奋、愤怒、急躁等精神刺激、饥饿状态下过度劳累、饮食营养和热能缺乏、年老而心体素衰弱，导致赫依偏盛，与血交搏，侵入心、主脉、神经、白脉，导致其功能紊乱而发病。而施灸赫依三穴具有抑赫依，疏通赫依与血之运行路、促进白脉传导、宁心安神的功效。在临床实践中也证明了针灸赫依三穴对赫依偏盛引起的疾病有较好的疗效[7]。

NO既参与神经细胞间的信息传递过程，又参与多种神经系统疾病的病理过程。NO在体内由NOS催化而产生。由于NO是性质活泼的气体，因此人们多通过NOS合酶来反映NO的含量[8] [9]。NO在神经系统的活动中起重要作用，NO增多具有神经毒性作用[10]。因此,探寻NO、NOS与失眠症的关系具有一定的临床意义。

本课题通过观察施灸赫依三穴对睡眠紊乱模型大鼠腹腔注射戊巴比妥钠后睡眠时间的影响及大鼠脑组织中NO含量和NOS活性比较。进一步验证了灸疗法的镇静催眠作用，为进一步机理研究提供了行为学依据。

[1]张鹏，鼓建伟．中医疗法消除运动性失眠的研究进展[J]．中医药信息杂志，2014，31(6)：129.

[2] 蒙古学百科全书总编辑委员会．蒙古学百科全书(医学)[M]．内蒙古人民出版社，2012，7：137.

[3] 蒙古学百科全书编辑委员会．蒙古学学百科全书(医学)[M]．内蒙古人民出版社，2012，7：43.

[4] 李艳琴．实验性脑损伤中脑组织NO含量、NOS活性的改变及意义[J]．南通大学学报(医学版)，2012，32(6)：500.

[5]陈英松．蒙医实验疗术学[M]．内蒙古大学出版社,2008.

[6]斯钦图,于天源.蒙医灸疗法抗衰老二三穴组穴配伍规律实验研究[J]．世界科学技术-中医药现代化，2010，12(6)：976-980.

[7]策·苏荣扎布.蒙医内科学[M]．内蒙古民族出版社，1986，490-491.

[8]刘学松，安方玉，等.当归多糖对衰老模型小鼠学习记忆能力及NO、NOS表达水平的影响[J].中医医学, 2013，26(5)：75.

[9]阳晶晶，严洁，王超，等.针刺对吗啡戒断大鼠脑组织一氧化氮合酶基因表达的影响[J]．中国中医急症，2014，23(7)：1209.

[10]白丽敏，李亚东.神经解剖学[M]．中国中医药出版社，2003，8：190-191.

2016年 8月17日收稿