不同猪种肉质相关基因FTO多态性研究

杨 攀，许 栋，马海明(湖南农业大学动物科学技术学院，湖南 长沙 410128)



不同猪种肉质相关基因FTO多态性研究

杨 攀*，许 栋，马海明**
(湖南农业大学动物科学技术学院，湖南 长沙 410128)

摘 要：为了研究肉质候选基因FTO(fat mass and obesity associated)在中外不同猪种群体中的遗传变异，本试验以杜洛克猪、大白猪、宁乡猪、大围子猪4个猪种为研究对象，运用PCR-RFLP的方法检测了FTO基因g.276G>T(AM931150)位点的基因频率和基因型频率。结果表明，宁乡猪、大围子猪的优势基因型均为GG，G是杜洛克猪、宁乡猪和大围子猪的优势等位基因，而大白猪的优势等位基因是T。本研究发现FTO基因的基因型分布在国外2个猪种群和地方猪种群之间存在较明显的差异，且这种差异极有可能是影响不同猪种肉质性状的原因之一，为以后更深入的研究打下了基础。

关键词：猪；肉质性状；FTO基因

FTO(fat mass and obesity associated)是脂肪肥胖相关基因，表达于人体各组织，且在下丘脑中高表达。FTO基因多态性与体重和肥胖症密切相关。FTO基因能够影响能量摄入及能量消耗，并通过多种途径诱导人群中肥胖症及2型糖尿病等相关疾病的发生。该基因位于猪的6号染色体上，包括9个外显子。本文研究了FTO基因的多态性，旨在寻找与猪肉质性状相关的遗传标记，为深入研究中外猪种的肉质形成机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 样品采集

杜洛克猪24头，大白猪28头，宁乡猪67头，大围子猪43头。剪少量耳组织，-20 ℃保存。

1.2 DNA的提取与PCR扩增

常规酚/氯仿抽提法提取基因组DNA。根据L. Fontanesi等(2008)设计引物扩增FTO基因第4内含子长度为397 bp的g.276G>T(AM931150)位点，该位点的左右引物为：5′-ACAGGCCCTGAAGAGGAAAG-3′；5′-AGTAACCTGGAGTTCCTGTGG-3′

PCR产物经Tai I限制性内切酶酶切后确定基因型。PCR反应体系为Green PCR Master Mix (2X) 12.5 μL，正反引物各0.8 μL，加ddH2O至25 μL，PCR反应程序为95 ℃预变性5 min，95 ℃变性30 s，60 ℃复性30 s，72 ℃延伸30 s，35个循环，72 ℃延伸5 min。酶切反应体系均为20 μL，其中PCR扩增产物10 μL，限制性内切酶2U，65 ℃消化4 h，酶切产物用2 %琼脂糖凝胶电泳后确定基因型。

2 结果与分析

2.1 FTO基因g.276G>T位点与PCR-RFLP

FTO基因g.276G>T(AM931150)位点T等位基因为397 bp，G等位基因为275 bp+122 bp，组成3种基因型，TT为397 bp，TG为397 bp+275 bp+ 122 bp，GG为275 bp+122 bp。

2.2 基因型频率与基因频率

杜洛克猪G等位基因频率为0.521，宁乡猪等位基因G的基因频率为0.881，大围子猪种G等位基因频率为0.942，而大白猪中等位基因T的频率为0.768。经Hardy-Weinberg平衡适合性检测表明，除宁乡猪此位点处于不平衡状态(P<0.01),其余均处于平衡状态(P>0.05，表1)。

3 讨论和结论

在猪肉质性状的研究中，有大量的报道表明FTO基因的g.276G>T(AM931150)位点与猪的肌内脂肪的沉积有很大的关系，而肌内脂肪含量是评价肉质的重要方面。经检测的杜洛克和大白猪都呈现出多态，本地猪种宁乡猪和大围子猪则几乎表现为单态，均为GG型，有少量的TG基因型出现，说明本地猪种在此位点上已开始存在少量变异。本研究发现FTO基因的基因型分布在国外2个猪种群和地方猪种群之间存在较明显的差异，且这种差异极有可能是影响不同猪种肉质性状的原因之一，这为以后更深入的研究提供了科学依据。□□

参考文献：(略)

*作者简介：杨攀(1993.9- ），汉族，湖南郴州市人，本科在读，E-mail：503634405@qq.com。

基金项目：863项目(2011AA100304-3)和湖南省自然科学杰出青年基金(13JJ1021)。

中图分类号：S813.1

文献标识码：A

文章编号：1001-0769(2016)02-0045-02

** 通信作者：E-mail: mahaiming2000@163.com。