中医温阳健脾法对泻药性便秘的治疗作用及其机制探究

程 辉，李艳茹

(山东万杰医学院，山东淄博 255213)

中医温阳健脾法对泻药性便秘的治疗作用及其机制探究

程 辉，李艳茹

(山东万杰医学院，山东淄博 255213)

目的:探究中医温阳健脾法治疗泻药性便秘的治疗作用及其机制。方法:复制便秘大鼠模型，通过温阳健脾颗粒对模型组大鼠进行治疗，1个疗程后比较实验组、模型组以及健康组大鼠肠道的运输功能以及c-kit、SCF蛋白的表达情况。结果:3种不同剂量治疗均有疗效，其中大剂量疗效最佳，健康组c-kit蛋白及SCF蛋白的表达均比模型组高。c-kit蛋白方面，小、中剂量组与阳性对照组比较差异有统计学意义;SCF蛋白方面，治疗后蛋白表达比较差异无统计学意义。结论:中医温阳健脾法治疗泻药性便秘的治疗效果确切，能够使c-kit及SCF蛋白表达提高。

温阳健脾法;泻药性便秘;疗效;机制

泻药性便秘的发病机制尚未完全清楚，可以确定的是与肠神经系统生理病理条件的变化密切相关［1］。已有众多临床研究以及实验研究表明，长时间服用泻药会造成药物依赖性只是一个方面，更严重的会导致泻剂结肠从而使病情加重，此外还会严重影响肠部神经系统，造成不良后果，产生泻药性便秘［2］。目前西医对泻药性便秘治疗尚无较理想的方法，而中医中药治疗泻药性便秘的优势十分明显［3］。本研究通过温阳健脾法对便秘型大鼠进行治疗，以研究其疗效及机制，现具体总结如下。

1 资料与方法

1.1 动物分组

80只SD大鼠随机分为16只健康组，64只模型组。造模成功后，取8只健康鼠、8只造模鼠实验判定是否造模成功。剩余8只健康鼠，56只造模鼠，将造模大鼠分为12只大剂量组，12只中剂量组，11只小剂量组，11只阳性对照组，10只空白对照组。造模方法参考文献［5］。

1.2 主要药物、试剂与仪器

治疗药物为30 g生白术的配方颗粒，15 g肉苁蓉的配方颗粒;CMC购自西安裕华生物科技有限公司;Bradford蛋白定量所用试剂盒购自北京百泰克生物技术有限公司;Western Blot中所用抗体均购自Gibco公司(美国)。

1.3 造模方法

64只模型组大鼠体质量为180～200 g，不同性别分笼饲养，室温保持在18～27℃，相对湿度保持在40%～70%，且通风良好，安静清洁。对照组大鼠喂饲普通干饲料，实验组喂饲含大黄粉干饲料。第1次给药剂量是每天200 mg/kg，之后剂量每日增加1倍，到剂量为1600 mg/kg时，一半动物粪便出现变稀，保持剂量至80%大鼠稀便消失，然而于此基础加倍给药，再出现近半数大鼠粪便变稀。循环3次，等到最后1次有80%大鼠的稀便消失7 d后终止给药，并饲以普通饲料。

1.4 治疗方法

模型组大鼠治疗1个疗程为4周，治疗药物用量为成人用量，按照《中药药理研究方法学》对中药人鼠的等效剂量进行计算，分成小、中、大剂量，于4 mlCMC中溶解并灌胃，每日1次;阳性对照组使用溶于4 mlCMC的莫沙比利进行灌胃，每日1次，1个疗程为4周;空白对照组使用4 mlCMC灌胃，每日1次，1个疗程为4周。

1.5 实验方法

1.5.1 肠道的传输功能检测 大鼠停药1周之后禁食24 h，使用10%活性炭混悬液1～2 ml进行灌胃，30 min之后处死(颈椎脱臼)。即刻解剖，将幽门至直肠末端全部肠道摘出，于松弛状态对肠道全长和肠道内混悬液推进长度进行测量，计算混悬液的推进长度与肠道全长比值。

1.5.2 c-Kit蛋白及SCF蛋白表达测定 留取大鼠的结肠组织，液氮中冻存样本研成粉末，然后加500 ul裂解液及10 ul蛋白酶抑制剂，使用超声破碎液体澄清为止，14000×g离心 40 min取上清。Bradford蛋白定量后Western blot进行检测。

1.6 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件进行统计分析，非正态分布计量资料和计数资料采用非参数检验，计数资料之间采用卡方检验进行比较分析，使用t检验比较分析计量资料之间的差异，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 各组大鼠肠道的传输功能、c-kit蛋白及SCF蛋白的表达比较

表1显示，3种不同剂量治疗均有疗效，其中大剂量疗效最佳，且优于阳性对照组;健康组c-kit蛋白及SCF蛋白的表达均比模型组高，治疗后模型组2种蛋白表达有所增高。c-kit蛋白中，小剂量组、中剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05);SCF蛋白中，治疗后蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05)。

表1 各组大鼠肠道传输功能、c-kit蛋白及SCF蛋白表达比较

3 讨论

泻药性便秘是指长时间服用泻药造成的结肠运动状态出现紊乱，患者排便无法自然解决，而需依靠泻药使排便功能得以维持的一种疾病，也称作泻药依赖性便秘或泻剂结肠［6］。

历代中医文献并无泻药性便秘记载，然而对泻药所导致的便秘认识很深刻。金元时期的李东垣［7］明确提出，泻药性便秘的表现为反复泻下、反复秘结而最终泻下药失效的一个过程。此外《杂病源流犀烛·大便秘结源流》［8］提出，老人使用硝黄类有刺激性的泻药，其气血津液更易受损，便秘症状进而加重，也就更容易导致泻药性便秘。中医认为，泻药性便秘的主要病因为苦寒泻药的过度使用，使脾胃受损、化源不足，进而亏虚气血津液，日久则累及肾造成阳气不足，因而泻药性便秘应属脾阳虚型。

泻药性便秘病理特点是由于长期服用泻药，患者的病程较长，且排便间隔时间延长，可能导致不服泄药则无法排便、无明显便意，或者完全无便意，患者大便干结、排便困难，有时需要通过洗肠或灌肠以排便，常伴随腹部不适、腹胀等症状［9］。

本药方以生黄芪、生白术健脾益气升阳，其中白术温、甘、苦，归脾胃经，可以益气补中健运脾胃，乃治疗脾虚诸证的要药，因此重用白术益气健脾运转中焦，从而有助于大肠运动［10］;益智仁、肉苁蓉、附子补脾阳温肾阳，其中肉苁蓉温、咸、甘，归肾大肠经，具有益精血、补肾阳、通便润肠之功效;黑芝麻、何首乌通便润肠，当归、白芍养血滋阴，甘草调和诸药，使配伍得当故而疗效较好［11］。

Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal，ICC)最初于胃肠道中被人们所了解。现已证实，ICC为胃肠道起搏细胞，其功能包括产生和传播慢波以及对肠神经系统起到平滑肌信号的传导。ICC细胞膜可对酪氨酸的激酶受体(C-kit)进行特异表达，同时与同配体的干细胞因子(stem cell factor，SCF)相结合后启动的SCF/c-kit信号通路特异表达，对ICC的分化、发育和胃肠道的节律活动稳定有着重要作用。因此我们选择检测c-kit和SCF蛋白表达以评估中医温阳健脾法的疗效及机制。

大鼠实验结果表明，3种不同剂量治疗均有疗效，其中大剂量疗效最佳且优于阳性对照组，说明中医温阳健脾颗粒存在一定的剂量依赖性。健康组ckit蛋白及SCF蛋白的表达均比模型组高，治疗后模型组2种蛋白表达有所增高。c-kit蛋白中，小、中剂量组表达均高于阳性对照组;SCF蛋白中，治疗后蛋白表达有上升但差异不够显著，可能是由于样本量不足。研究表明，大鼠泻药性便秘产生的原因可能是C-kit、SCF蛋白表达量的下降，而中药温阳健脾法能够使c-kit及SCF蛋白表达提高，从而达到改善便秘的效果。

综上所述，使用中医温阳健脾法治疗泻药性便秘疗效确切，能使c-kit及SCF蛋白表达提高。

［1］吴至久，代渊，王飞．益气养血温阳方对泻药性便秘大鼠结肠SP、NOS-1的影响［J］．辽宁中医药大学学报，2012，14 (9):70-72．

［2］曾华，田社清．肛管松解术配合养阴汤治疗泻药性便秘的疗效观察［J］．中西医结合研究，2014，6(2):57-60．

［3］冯硕，刘绍能．中医药治疗功能性便秘机制的研究进展［J］．世界华人消化杂志，2013，21(6):459-463．

［4］任驰，周思远，牟建蛟，等．针刺对功能性便秘ENS-ICC调节机制的研究进展［J］．世界华人消化杂志，2012，20(19): 1758-1762．

［5］吴至久，代渊，王飞．益气养血温阳方对泻药性便秘大鼠结肠SP、NOS-1的影响［J］．辽宁中医药大学学报，2012，14 (9):70-72．

［6］李敏利，张晓华，朱人敏，等．不同类型通便药物治疗老年功能性便秘疗效的临床研究［J］．中国全科医学，2013，16 (25):2976-2978．

［7］金·李杲．兰室秘藏［M］．刘更生，臧守虎，点校．天津:天津科学技术出版社，2000:75．

［8］清·沈金鳌．杂病源流犀烛［M］．李占永，李晓林，校注．北京:中国中医药出版社，1994:144-145．

［9］方健．慢性功能性便秘患者的全程健康教育［J］．护理学杂志:综合版，2012，27(8):77-78．

［10］刘薇，刘仍海．温阳健脾法治疗泻药性便秘30例的临床研究［J］．中国临床医生，2013(11):61-63．

［11］刘仍海，刘薇，王蓬文，等．温阳健脾法对慢传输型便秘模型大鼠结肠神经递质影响的研究［J］．北京中医药，2013，32(9):698-701．

R256．35

A

1006-3250(2016)02-0186-02

2015-05-23