烫伤药水喷雾剂对大鼠烫伤创面疗效的病理研究*

2016-04-05吴晓斌陈德轩马朝群

陕西中医 2016年3期

关键词：喷雾剂药水毛细血管

吴晓斌　陈德轩　张　星　马朝群

江苏省中医院病理科(南京 210029)

·实验研究·

烫伤药水喷雾剂对大鼠烫伤创面疗效的病理研究*

吴晓斌陈德轩△张星▲马朝群△

江苏省中医院病理科(南京 210029)

摘要目的：探讨应用烫伤药水喷雾剂对烫伤大鼠创面治疗作用的病理机制。方法：50只浅II°烫伤SD大鼠随机分为烫伤药水喷雾剂高、中、低剂量治疗组，磺胺嘧啶银组，基质软膏组，判断创面病理组织学炎症程度，观察创面新生毛细血管数目。结果：烫伤药水喷雾剂高、中剂量组有创面炎症轻、烫伤创面毛细血管数量，促进创面愈合作用。烫伤药水喷雾剂中剂量组和基质软膏组新生毛细血管数有显著性差异。结论：烫伤药水喷雾剂中剂量对浅II°大鼠烫伤创面有减轻创面组织炎症程度，增加新生毛细血管数量，促进烫伤创面愈合的功效。

主题词烫伤，实验性@烫伤药水大鼠

烫伤在现代社会的发病率呈上升趋势。烫伤是临床常见热力烧伤的一种，因热力、炽热金属、火焰、蒸气和高温气体等所致的体表组织损害，主要是皮肤损害，以中小面积Ⅱ°烧伤为主[1]。临床表现为：红肿、热痛等改变，损伤主要发生在皮肤、黏膜，治疗效果主要与病变的范围和深度相关。长期以来，没有一种较为理想的治疗药物和方法，始终难以解决患者的疼痛、感染、结痂、留疤、植皮、致残等问题[2]。烫伤药水喷雾剂由地榆、虎杖、黄连等药物组成，具有清热解毒、化腐生肌的功效，治疗各种原因导致的烫伤不感染，愈合好，费用低。本实验通过烫伤药水喷雾剂治疗浅Ⅱ度烫伤大鼠动物模型，对烫伤创面修复进行病理观察。

1材料1.1实验动物SD大鼠50只，体重190～220g，动物合格证号：SCXK(浙)2008-0033，南京中医药大学动物实验中心提供。置室温26℃,湿度50%环境，正常摄食摄水，常规喂养1周后用于实验。

1.2材料及仪器苏木素-伊红染液，南京宇盛达科技有限公司；70%酒精500mL；10%水合氯醛50mL；烫伤药水喷雾剂由黄连、忍冬藤、地榆等中药组成、江苏省中医院院内制剂(苏药制字Z0400054)，主要制作工艺流程：以浸渍法等提取相关成分，致测定乙醇为75%，分别制备浓度为10g、20g、30g的低中高浓度药水；磺胺嘧啶银软膏(国药准字H44020614)；Leica TP 1020自动脱水机，SAKURA Tissue-Tek.TEC组织包埋机，Leica RM 2235切片机，Leica DM 2000显微镜，捷达病理图文信息系统。

2方法2.1模型建立及分组SD大鼠按照常规饲养1周后，称重剃毛，70%酒精消毒，然后以10%水合氯醛3mL/kg腹腔注射麻醉后，将制作好的动物固定板覆盖在大鼠背部，恒温水浴箱温度设定在75℃，将4层无菌纱布浸泡在水浴箱内，10s后取出，均匀覆盖在大鼠背部裸露处15s，用0.9%氯化钠注射液冲洗，无菌纱布擦干水分，形成浅Ⅱ度烫伤模型。

2.2给药方法烫伤后30min将50只大鼠随机分为5组，即基质软膏组(模型组)、磺胺嘧啶银软膏组(阳性对照组)、烫伤药水喷雾剂低剂量组(相当于含提取液10g)、烫伤药水喷雾剂中剂量组(相当于含提取液20g)、烫伤药水喷雾剂高剂量组(相当于含提取液30g)。模型组给予基质软膏烫伤部位外涂，阳性对照组予磺胺嘧啶银软膏烫伤部位外涂每次20mg/只，1d1次。按高、中、低剂量组分别外喷相应药物，3喷约10mL，1d1次。

2.3病理检查烫伤后第5、10、15 d，每组大鼠麻醉后截取1.5cm×1.5cm创面皮肤，每次取两块，取材后即刻置于10 %中性福尔马林液中，经 24h固定后，按外检病理要求取材，标本经脱水、浸蜡处理、石蜡包埋切片，苏木素-伊红(HE)染色，光镜观察病理组织学，每个标本随机观察5个视野(在切片中心及四周各取1个视野)，病理图文分析系统计算各组大鼠新生毛细血管数目。

2.4统计学方法采用SPSS19.0统计学软件进行分析，数据以均数±标准差表示，采用t检验。

3结果3.1大鼠烫伤创面病理组织学正常大鼠皮肤在第5、10、15d病理组织学示表皮结构清晰层次分明，真皮中见毛囊分布，多量汗腺结构，胶原纤维呈编织状形态。烫伤后第5d，模型组小鼠表皮层细胞变性水肿，大量急性炎细胞浸润，间质水肿明显，细胞结构紊乱，坏死组织丰富。烫伤药水喷雾剂高、中、低剂量组和阳性对照组创面组织水肿较轻，组织学结构明显，坏死少见，炎症程度较轻，创面肉芽组织生长活跃。烫伤后10d，创面开始愈合，治疗组急慢性炎细胞浸润，成纤维细胞增生，胶原纤维形成。模型组大鼠表皮坏死明显，真皮层部分液化性坏死且间质大量急性炎细胞浸润。烫伤药水喷雾剂高、中、低剂量组和阳性对照组大鼠创面部分表皮结构初步形成，炎性渗出物少见。真皮汗腺毛囊增生，肉芽组织形成，新生毛细血管丰富，真皮层结缔组织完整。烫伤后15d，模型组肉芽组织比较明显，成纤维细胞部分产生胶原，多量急慢性炎细胞，皮肤异常增生严重，纤维无规则排列。烫伤药水喷雾剂高、中、剂量组和阳性对照组大鼠愈合创面见少量急慢性炎细胞，毛细血管管腔闭合，肉芽组织减少，皮肤结构基本完整，排列规则。以烫伤药水喷雾剂中剂量组和阳性对照组最佳。

3.2大鼠创面组织毛细血管数量比较用药后第5d、10d、15d，烫伤药水喷雾剂高、中剂量组和磺胺嘧啶银组创面肉芽组织新生毛细血管数量均高于基质软膏组(P<0.05)。第10d，烫伤药水喷雾剂中剂量组创面肉芽组织中毛细血管数均高于烫伤药水喷雾剂高、低剂量组(P<0.05)。烫伤药水喷雾剂低剂量组(相当于含提取液10g)、实验中剂量组(相当于含提取液20g)、实验高剂量组(相当于含提取液30g)均明显促进大鼠烫伤创面脱痂愈合；病理组织学可见：大鼠烫伤后第 5、10、15d烫伤创面炎症明显得到抑制。以实验中剂量组效果最佳。

4讨论烧烫伤由于热力高温气体、强酸强碱等导致多发性体表组织损害，以中小面积Ⅱ°烧伤为主。皮肤损伤中烫伤较为常见，烫伤创面修复是一个复杂的病理生理过程，包括炎症反应、肉芽组织形成以及基质形成与重新塑形等[3]。祖国医学总结出清热解毒、养阴生津、益气理脾、活血逐瘀、托里排脓等治疗理念及烧伤内外兼治的原则[4]。烫伤药水喷雾剂方中虎杖清热解毒，散瘀止痛，易收敛，为君药；地榆凉血止血，解毒敛疮；忍冬藤清热疏风，通络止痛；大黄、黄连清热泻火，凉血解毒，逐瘀活血，均为臣药。冰片清热止痛，止痒防腐，为佐使[5]。烫伤药水喷雾剂临床用于浅Ⅱ°烫伤，减轻烫伤创面早期水肿抑制肉芽组织炎症，加速创面愈合及减轻疤痕形成，恢复毛囊、皮脂腺等皮肤附属器，对创面愈合后皮肤功能有很好改善作用，伤口恢复加快，病程明显缩短。

烧伤创面愈合由炎性细胞、修复细胞、细胞外基质、炎性介质及生长因子等多个因素在机体的调控下，完整而有序的进行一系列修复活动，影响创面修复局部因素主要是感染和血液供应[6]。烫伤后皮肤表皮细胞坏死，组织液渗出，创面因炎性反应微循环通透性增加，微血管扩张等导致体液渗出和组织水肿，微循环的瘀滞则可造成局部栓塞或者组织缺血造成氧平衡破坏、局部坏死，使创面加深。研究提示，烧烫伤创面感染中革兰阴性菌不动杆菌比例最高。烫伤药水喷雾剂能抑制细菌生长，降低创面炎症程度，减少急慢性炎细胞浸润，减轻创面水肿；增加新生微血管，改善创面血液供应，促进创面肉芽组织修复。

烧烫伤时大面积创面未及时封闭、修复，会导致患者体液大量流失，出现感染、休克、多器官功能障碍综合征等连锁病理变化，也会影响创面愈合后瘢痕深度和面积。烧伤创面愈合后，皮肤瘢痕组织既影响美观，又因缺少汗腺、毛囊等皮肤附属物，影响皮肤组织功能[7]。病理组织学显示，烫伤药水喷雾剂中剂量组结痂消失，表皮局部形成，皮肤基底层细胞排列整齐，真皮中成纤维细胞多见，中性粒细胞基本消失，局部见淋巴单核细胞散在，肉芽组织较薄，毛细血管有闭合现象。新生汗腺皮脂腺分布在真皮中，纤维排列齐整。与基质软膏组相比有显著性差异。

新生毛细血管是创伤后创面肉芽组织中的主要成分，在创伤愈合过程中起着重要作用，创面组织中新生血管形成，可以改善局部缺血、缺氧状态，达到氧平衡。烧伤创面修复过程中过强、过弱的炎症反应都不利于创面愈合。本研究显示烫伤药水喷雾剂低剂量组由于有效药物浓度不高，在烫伤创面达不到最佳治疗药物浓度，抑菌消炎效果略差。而高剂量组各种成分有效浓度偏高，刺激炎症组织，造成创面渗液较多。两组创面愈合程度与中剂量组相比略逊。中剂量组能使创面毛细血管增加，减轻炎症程度，使肉芽组织中炎症程度加快组织从炎症期过渡到修复期。促进烫伤创面微血管新生及血液循环，丰富烫伤部位的氧、营养物质及生物活性因子的供应，增强创面组织修复能力。烫伤药水喷雾剂有效减轻烫伤创面炎症，促进烫伤创面微血管新生及血液循环，增强创面组织修复能力。体现了祖国医学对溃疡创面以祛腐生肌的理念。

综上研究显示：烫伤药水喷雾剂可以减少创面炎症因子，增加新生毛细血管数目，促进创面愈合减少皮肤疤痕的功效。我们观察烫伤创面皮肤病理学改变和新生毛细血管数量，研究烫伤药水喷雾剂治疗烫伤创面机理, 为中医药治疗烫伤创面提供实验依据，有助于发挥临床作用。

参考文献

[1]刘天舒,朱克俭,尹天雷，等.复方桐叶烧伤油治疗新鲜中、小面积Ⅱ°烧烫伤的多中心临床研究[J].中药新药与临床药理,2012,23(3):350-353.

[2]袁汀,周瑜妹.外用中药治疗烧烫伤的研究进展[J].光明中医,2010,25(11):2151.

[3]Schreml S,Szeimies RM,Ppantl L,et al.Wound healing in the 21st century[J].Am Acad Dermatol,2010,63(5):866-881.

[4]贾德文,黄秀琴,张尊迅.湿润烧伤膏治疗136例小面积烧烫伤[J].中国现代医生,2007,45(18):102.

[5]赵前思.外用中药促进烧伤创面愈合机制的研究进展[J].医学综述,2014,20(16):3003-3005.

[6]屈纪富,程天民,郝利.参与皮肤伤口愈合的细胞及其作用的研究进展[J].中国临床康复,2001,24(5):74.

[7]武永刚,陈君长,王坤正.血管内皮细胞生长因子在骨折愈合过程中的表达[J].西安医科大学学报,2001,22(1):51-53.

(收稿2015-10-20；修回2015-12-13)

【中图分类号】R541.4

【文献标识码】A