长春七脂溶性成分的GC-MS分析*

倪文骐闫涵威李萍张雅李卫燕曹蔚

第四军医大学(西安710032)



长春七脂溶性成分的GC-MS分析*

倪文骐闫涵威李萍张雅李卫燕曹蔚△

第四军医大学(西安710032)

摘要目的：分析长春七脂溶性成分。方法：采用乙醇回流、乙醚萃取法，提取了三批长春七样品的脂溶性成分，结合气相色谱-质谱联用仪，对其化学成分进行分离、鉴定及分析。结果：从1号样品中鉴定出42个成分，主要为萜类(35.38%)、烷烃类(17.08%)、脂肪酸类(11.65%)和香豆素类(10.00%)。从2号样品中鉴定出39个成分，主要为萜类(37.60%)、香豆素类(14.06%)、脂肪酸类(11.65%)和烷烃类(10.88%)。从3号样品中鉴定出37个成分，主要为萜类(39.99%)、香豆素类(16.79%)、脂肪酸类(14.94%)和烷烃类(13.61%)。结论：本研究全面分析了长春七的脂溶性成分，为长春七的开发利用及质量评价提供了参考。

主题词 气相色谱-质谱法@长春七@脂溶成分

长春七[Libanotisbuchtormensis( Fisch) DC]是伞形科岩风属草本植物，性微甘、味酸，主要分布于甘肃、新疆、四川和陕西等省区，为陕西太白七药之一，在陕西民间有很好的应用疗效。一般以根茎入药，主治风寒感冒、咳嗽、跌打损伤、关节肿痛、风湿筋骨痛等病症[1]。近年来，国内学者对长春七的超临界提取物的镇痛、镇静和抗炎作用，异欧前胡素的提取工艺进行了深入的探讨和研究[2-3]。目前，对长春七的脂溶性成分未见报道，而长春七的脂溶性成分对于其药效活性具有一定的相关性。本研究组对长春七脂溶性成分进行了全面分析，为进一步研究和开发长春七提供依据。

1仪器与试药三批长春七药材样品于2014年9月从陕西太白山采得，晒干，分别编号1～3号，经本教研室曹蔚副教授鉴定。简单对三批长春七药材的形状特征进行描述。1号样品，外形：圆柱形、较直；表面特征：表面灰黄色，粗糙，皮孔突出；质地气味：质硬脆，易折断，气微，味酸。2号样品，外形：圆柱形，稍弯曲；表面特征：表面土黄色，粗糙，皮孔明显；质地气味：质硬脆，易折断，气强，味微酸)。3号样品，外形：圆锥形，稍弯曲；表面特征：表面灰棕色，粗糙，皮孔突出；质地气味：质硬脆，易折断，气微，味微酸。实验中所用试剂均为国产分析纯。

2方法与结果2.1脂溶性成分的提取取三批长春七的根状茎各200g，粉碎，乙醇回流法分别提取3次，提取液分别合并，减压回收乙醇，浓缩。用石油醚分别萃取3次，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，回收石油醚。

2.2脂溶性成分的测定条件GC-MS工作条件：仪器为Thermo Fisher SCIENTIFIC公司的GC-MS联用仪(型号为Trace ISQ)。色谱柱为DB-5MS(30×0.25mm，0.25μm)毛细管色谱柱。程序升温：初始温度50℃，然后以3℃/min升到260℃，保持3min，接着以20℃/min升至280℃，保持3min。载气为高纯氦气(99.99%)，进样不分流，载气流量1.0mL/min，进样口温度250℃。电子轰击(EI)离子源：电离能70eV，扫描范围50～650amu，扫描时间间隔0.2s，离子源温度260℃，传能线温度 280℃。

2.3结果按照上述色谱-质谱条件对样品进行分析，获得三批长春七样品脂溶性成分的总离子流图(见图1)，经GC数据处理机用峰面积归一化法测定各组分的相对含量，并结合GC-MS联用技术进行检测，所得质谱图参照NIST 2005标准质谱图库和WILE 275质谱图库检索确定三批长春七样品脂溶性提取物的化学成分。

1号样本共鉴定了42个化合物，占总含量的94.38%。按照含量从大到小的顺序依次：α-甜没药醇(14.28%)；蛇床子素(10%)；蛇麻烯(9.64%)；(Z，Z)-9，12-亚油酸(9.46%)；α-甜没药烯(7.35%)；4-亚甲基-1-甲基-2-(2-甲基-1-丙烯-1-基)-1-乙烯基-环庚烷(6.28%)；(1S-顺式)-1，2，3，5，6，8A-六氢化-4，7-二甲基-1-(1-甲乙基)-萘(2.81%)；4-(1，5-二甲基-1，4-己二烯基)-1-甲基环己烯(2.74%)；庚醛(2.7%)；5，8，11-十七碳三炔酸甲酯(1.98%)；正十六烷酸(1.83%)；(E)-α-金合欢烯(1.75%)；α-谷甾醇醋酸酯(1.67%)；4'-叔丁基-2'，6'-二甲基-苯丁酮(1.55%)；1-甲基-3-(1-甲乙基)-苯(1.42%)；N-(1-乙基-1，2，3，4-四氢化-2，2，4-三甲基-7-喹啉)-丙酰胺(1.39%)；(3α，5α)-5-氯-豆甾烷-3-醇醋酸酯(1.31%)；1，2，4A，5，6，8A-六氢化-4，7-二甲基-1-(1-甲乙基)-萘(1.27%)；十六烷酸乙酯(1.2%)；[2S-[2α，5α(R*)]]-四氢化α，α，5-三甲基-5-(4-甲基-3-环己烯-1基)-2 -呋喃甲醇(1.13%)；[1S-(1α，4α，5α)]-1，8-二甲基-4-(1-丙烯基)-螺[4.5]癸-7-烯(1.05%)；(Z，Z)-9，12-亚油酸酰氯(1.03%)；1-氯-7-十七碳炔；8，9-脱氢-9-甲酰基-环异长叶烯(0.83%)；(E)-3，7，11-三甲基-1，6，10-十二烷三烯-3-醇(0.79%)；(R)-9，10-二氢-9-羟基-8，8-二甲基-2H，8H-苯并[1，2-b:3，4-b']二吡喃-2-酮(0.75%)；2-溴-4-氟苯基辛酸酯(0.63%)；α-衣兰油烯(0.61%)；豆甾-3，5-二烯(0.56%)；[1-(1α，4Aα，8Aα)]-1，2，4A，5，6， 8A-六氢化-4，7-二甲基-1-(1-甲乙基)-萘(0.51%)；Platambin(0.48%)；2-甲基-4-孕甾-3，20-二酮(0.47%)；喇叭烯氧化物-(II)(0.44%)；γ-谷甾醇(0.44%)；异丁酸香叶酯(0.41%)；5，8，11-二十碳三炔酸甲酯(0.4%)；8，11-亚油酸甲酯(0.39%)；4-(3，3-二甲基-1-丁炔)-4-羟基-2，6，6-三甲基环己-2-烯酮(0.38%)；4-亚甲基-1-(1-甲乙基)二环[3.1.0]己-3-醇醋酸酯(0.37%)；6-乙基-3-辛基-邻苯二甲酸丁酯(0.36%)；5 -(4-甲苯基)呋喃甲酸(0.36%)；(3A)-△5，22-豆甾烯-3-醇醋酸酯(0.36%)。

2号样本共鉴定了39个化合物，占总含量的92.31%。按照含量从大到小的顺序依次：α-甜没药醇(23.78%)；蛇床子素(14.06%)；(Z，Z)-9，12-亚油酸(8.48%)；[ S-(E，E)]-1-甲基-5-亚甲基-8 -(1-甲乙基)-1，6-环癸二烯(7.66%)；5，8，11-十七碳三炔酸甲酯(7.15%)；蓝桉烯(4.41%)；正十六烷酸(2.84%)；(E)-α-金合欢烯(2.05%)；N-(1-乙基-1，2，3，4-四氢化-2，2，4-三甲基-7-喹啉)-丙酰胺(1.74%)；[1S-(1α，4Aα，8Aα)]-1，2，4A，5，8，8A-六氢化-4，7-二甲基-1-(1-甲乙基)-萘(1.58%)；镰叶芹醇(1.54%)；α-甜没药烯(1.33%)；[2S-[2α，5α(R*)]]-四氢化-α，α，5-三甲基-5-(4-甲基-3-环己烯-1基)-2-呋喃甲醇(1.28%)；α-香茅醇，氯二氟醋酸酯(1.22%)；顺式-α-甜没药醇(1.19%)；2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚-3-胺(0.97%)；(1α，4Aα，8Aα)-1，2，3，4，4A，5，6，8A-八氢化-7-甲基-4-亚甲基-1-(1-甲乙基)-萘(0.77%)；(E)-3，7，11-三甲基-1，6，10-十二烷三烯-3-醇(0.77%)；9，12-亚油酸乙酯(0.73%)；角鲨烯(0.67%)；1，2，4A，5，6，8A-六氢化-4，7-二甲基-1-(1-甲乙基)-萘(0.58%)；Platambin(0.56%)；(R)-9，10-二氢-9-羟基-8，8-二甲基-2H，8H-苯并[1，2-b:3，4-b']二吡喃-2-酮(0.55%)；5，8，11-二十碳三炔酸甲酯(0.54%)；(Z，Z，Z)-9，12，15-十八碳三烯酸-2，3-二羟基丙酯(0.53%)；3-(1，1-二甲基-2-丙烯基)-7-羟基-6-甲氧基-2H-1-苯并吡喃-2-酮(0.53%)；3α，7α，12α，24α，25-五羟基四甲基硅烷-5α-胆甾烷(0.52%)；α-依兰烯(0.49%)；2-亚甲基-6，8，8-三甲基三环[5.2.2.0(1，6)]十一烷-3-醇(0.47%)；9-羟基-7H-呋喃[3，2-g][1]苯并吡喃-7-酮(0.37%)；雪松醇(0.36%);[1AR-(1AR*,2R*,3S*,4AR*,6S*,7S*,7AS*,8E,10R*,11R*,11AS*)]-2,7,10-三乙酰氧基-1，1A,2,3,4,6,7,10,11,11A-十氢-1，1，3，6，9-五甲基-4-氧-4A,7A-环氧-5H-环戊二烯并[α]环丙基[f]环十一碳-11-烯基-3-吡啶羧酸酯(0.36%)；豆甾烷-3，5-二烯(0.35%)；1，3，4-三甲基-3-环己烯-1-甲醛(0.34%)；4'-apo-α，psi-胡萝卜素甲酸(0.33%)；(6α)-6，17，21-三[(三甲基硅基)氧基]-3，20-双(w邻甲基肟)-孕-4-烯 -3，11，20-三酮(0.31%)；[3R-(3α，5Aα，9α，9Aα)]-八氢化-2，2，5A，9-四甲基-2H-3，9A-亚甲基-1-恶庚因(0.31%)；邻苯二甲酸-丁基-2-戊酯(0.3%)；顺式-1-甲基-3-(1-甲基乙烯基)-环己烷(0.29%)。

3号样本共鉴定了37个化合物，占总含量的91.99%。按照含量从大到小的顺序依次：蛇床子素(16.79%)；α-甜没药醇(13.56%)；α-甜没药烯(11.94%)；(Z，Z)-9，12-亚油酸(11.69%)；蛇麻烯(8.96%)；(1α，3Aα，7α，8Aα)-2，3，6，7，8，8A-六氢化-1，4，9，9-1H-3A,7-四甲基-亚甲基薁(4.08%)；正十六烷酸(3.25%)；(1S-顺式)-1，2，3，5，6，8A-六氢化-4，7-二甲基-1-(1-甲乙基)-萘(2.69%)；γ-衣兰油烯(1.45%)；1-甲基-2-(1-甲乙基)-苯(1.43%)；9，12-亚油酸乙酯(1.22%)；(R)-1H-2，4A，5，6，7，8-六氢化-3，5，5，9-四甲基-苯并环庚烯(1.21%)；5，8-二甲氧基-2，3，10，10A-四氢化-1H，4AH-菲-4，9-二酮(1.21%)；顺式-α-金合欢烯(1.1%)；3，6，6-三甲基二环[3.1.1]-2-庚烯(1.08%)；庚醛(1.04%)；顺式-α-甜没药烯(0.76%)；亚油酸乙酯(0.73%)；豆甾烷-3，5-二烯(0.7%)；α-衣兰油烯(0.63%)；1-甲基-4-(1-甲乙基)-1，3-环己二烯(0.61%)；[2S-[2α，5α(R*)]]-四氢化α，α，5-三甲基-5-(4-甲基-3-环己烯-1-基)-2-呋喃甲醇(0.6%)；1-壬烯(0.58%)；α-荜澄茄油烯(0.58%)；4-甲基-1-(1-甲乙基)二环[3.1.0]-2-己烯(0.51%)；γ-松油烯(0.48%)；辛醇(0.38%)；1，2，3，4，4A，7-六氢化-1，6-二甲基-4-(1-甲乙基)-萘(0.34%)；邻异丙烯基甲苯(0.29%)；[1S-(1α，7α，8Aα)]-1，2，3，5，6，7，8，8A-八氢化-1，4-二甲基-7-(1-甲基乙烯基)-薁(0.29%)；3，4-二氢-4-羟基-2H-吡喃(0.27%)；石竹烯氧化物(0.27%)；(R)-9，10-二氢-9-羟基-8，8-二甲基-2H，8H-苯并[1，2-b:3，4-b']二吡喃-2-酮(0.26%)；1，10-二氯癸烷(0.26%)；(-)-α-波旁烯(0.26%)；6-甲基-5-庚烯-2-酮(0.25%)；Z，Z，Z-1，4，6，9-十九烷四烯(0.24%)。

三种长春七样品的脂溶性成分含量总结为：萜类{样品1 (35.38%)、样品2(37.60%)、样品3(39.99%)}；烷烃类化合物{样品1(17.08%)、样品2(10.88%)、样品3(13.61%)}；脂肪酸类化合物{样品1(11.65%)、样品2(11.65%)、样品3(14.94%)}；香豆素类化合物{样品1(10.00%)、样品2(14.06%)、样品3(16.79%)}；酯类化合物{样品1(5.74%)、样品2(9.61%)、样品3(1.95%)}；甾体化合物{样品1(4.81%)、样品2(1.18%)、样品3(0.70%)}；酮类化合物{样品1(2.68%)、样品2(1.45%)、样品3(1.72%)}；醇类化合物{样品1(1.92%)、样品2(2.52%)、样品3(0.98%)}；醛类化合物{样品1(2.70%)、样品2(0.34%)、样品3(1.04%)}；胺类化合物{样品1(1.39%)、样品2(2.71%)}；杂环化合物{样品2(0.31%)、样品3(0.27%)}；酰氯类化合物{样品1(1.03%)}。

依据本研究的实验结果，将三批长春七脂溶性成分的共有成分总结见表1。

3讨论本文首次对长春七的脂溶性成分进行了系统的分析研究，采用GC-MS检出丰富的化学成分，此次实验研究中，三批长春七的脂溶性成分的化学组成相似，萜类、烷烃类、脂肪酸类和香豆素类成分为长春七脂溶性物质的主要组成部分。长春七脂溶性成分中含有大量的萜类成分，其中，α-甜没药醇具有抗溃疡、抗炎、灭菌、溶解胆石的作用，可用于胃肠道溃疡及胆结石的治疗[4]。香豆素类成分，如蛇床子素具有强力的抗心律失常、扩血管、保护心血管、提高记忆力、镇静、抗骨质疏松、抗炎、抗癌药理作用，肝保护作用，在临床上可用于治疗酒精性脂肪肝；不饱和脂肪酸及其酯，如(Z，Z)-9，12-亚油酸，亚油酸甲酯，亚油酸乙酯具有降血脂、降血压、软化血管、促进微循环、抗氧化、抗炎、抗衰老和防止动脉硬化等活性，广泛用于医药保健产品等开发[5-8]。本次研究阐明了长春七脂溶性成分的物质基础，为其药效作用的深入研究提供了良好的理论基础，同时研究表明α-甜没药醇，蛇床子素，(Z，Z)-9，12-亚油酸等为该植物脂溶性成分的主要特征和活性成分，含量较高，可以作为该药材品质分析的指标成分。

参考文献

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(收稿2015-10-21；修回2015-12-10)

通讯作者△

【中图分类号】R282

【文献标识码】A

doi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.03.046

*陕西省中医药管理局课题(13-ZY037)