猪支原体肺炎的流行特点及其防控措施

吴斌



猪支原体肺炎的流行特点及其防控措施

吴斌

（福建省光泽县农业局动物疫病预防控制中心 354100）

猪肺炎支原体病是由猪肺炎支原体感染的一种接触性慢性呼吸道传染病。普遍存在不同规模的养殖场，极大危害养猪业的健康发展。本文简述了猪支原体肺炎的病原学特点、流行特点、临床症状、鉴别诊断及其综合防控措施。

猪支原体肺炎(Mycoplasmal Pneumonia of Swine，MPS)是猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae，Mhp)所引发的是一种以气喘为主要症状，以肺部对称性肉变为主要病理变化的慢性、接触性呼吸道传染病，其主要病变特征是融合性支气管肺炎，尖叶、心叶、中间叶和膈叶前缘呈“肉样”或者“虾肉样”实质性病变，不同年龄、性别、品种的猪均能感染，患病猪大多表现为生长发育不良，饲料的利用率会大大降低，给养猪的生产效益带来巨大损失，极大危害养猪业的健康发展。

1 病原学特点

（1）猪肺炎支原体无细胞壁，显微镜下呈多形态，有点状、丝状、杆状、球形等形状，直径0.2~0.5μm，革兰氏染色呈阴性，着色不佳，用姬姆萨和瑞特氏染色良好。Mhp是一种介于细菌和病毒之间，能自行繁殖的原核生物，结构简单，仅有细胞膜、核糖体及细胞核3种细胞器。外膜是厚度7.5~10nm的三层结构，中层含蜡质，内外层含有丰富糖类和蛋白质，细胞质内含有核糖体和染色体DNA。猪肺炎支原体的双股DNA全长为1070kb。由于染色体DNA中含有较低的G+C含量，被评价为系统发育上与革兰阳性菌最为接近，不同于一般基因密码子含义的支原体。（2）Mhp对外界自然环境及物理化学因素的抵抗力不强，随病猪咳嗽、喘气排出体外，污染猪舍墙壁、地面、用具、空气，日光、干燥及常用的消毒药液，都可在较短时间杀灭病原。Mhp在固体培养基上生长缓慢；在含有水解乳蛋白的猪血清、酵母浸液和组织缓冲液的液体培养基生长时，可以适当增加其中营养基质含量能促进Mhp菌落的繁殖。将病料人工接种乳兔，经连续传代至600多代后，病原致病力虽变弱，但仍保持着较良好的免疫原性。菌体的主要抗原物质存在于荚膜和细胞膜。荚膜中含有多种黏附蛋白和黏附相关蛋白等膜分子，而Mhp致病过程主要是由表面黏附蛋白介导完成的。蛋白质与脂质是Mhp主要的抗原组成成分，其中膜蛋白是产生免疫反应的主要免疫原之一。

2 流行病学特点

（1）目前，我国大部分养猪主产区均有猪支原体肺炎发生和流行，呈现发病率高、死亡率低特点。本病只感染猪，其他种家畜、动物和人都不感染。不同年龄、性别和品种的猪均可感染发病。病猪与健康猪直接接触均可经呼吸道感染发病。病猪和隐性带菌猪是本病的主要传染源，很多猪场由于购买种猪或互相买卖，将隐性病猪引入后，造成本病的流行。育肥猪发病较少，病情较轻，但是乳猪和断奶仔猪感染率、发病率和病死率较高。这主要是由于猪在初生长阶段时，未免疫接种Mhp疫苗，其母源抗体水平减弱，处于免疫力低状态所致，导致猪在初生长阶段感染的频率最高。在哺乳期，该病通过母猪传给小猪，小猪在6周龄时可能才出现临床症状；其次是怀孕末期和哺乳期的母猪，妊娠后期母猪经常急性发作，死亡率较高。本病一旦传入后，需要采取积极严密的措施，否则继发其他疾病，很难彻底扑灭。（2）本病发生无明显的季节性，一年四季均可发生，尤其是在气候多变、阴湿、寒冷的冬春季节发病严重，症状明显。因此，气候变化是影响本病发生和加剧病情的主要因素之一。此外，不良的饲养管理和卫生条件会降低猪只的抵抗力，特别是高密度饲养、通风不良、卫生条件差的猪场，发病情况更为严重，导致猪群整体生长速度下降，饲料利用率降低；存在猪圆环病毒病、猪流感、猪繁殖与呼吸综合征感染等免疫抑制性疾病以及饲料中霉菌素超标等免疫抑制因素的猪场更容易继发本病和死亡率明显上升。

3 临床症状

（1）本病多呈慢性经过，主要临诊症状为咳嗽和气喘，体温、食欲和精神都无明显变化，随着病情的发展，症状会表现明显和加重。早期症状咳嗽，多为单声干咳；中期喘气，腹式呼吸；后期呼吸急促，次数增多；重病猪呈犬坐姿势，张口呼吸，表情痛苦，咳嗽次数少而沉弱，似有分泌物堵塞，难以咳出；听诊肺部有干性或湿性啰音，呼吸音似拉风箱样；病猪精神委顿，食欲废绝，体温可能超过40.5℃，最后可因衰竭窒息而死亡。（2）病理变化主要体现肺门淋巴结和肺纵膈淋巴结肿大，在肺心叶、尖叶的背侧和横膈膜叶的前端肉样病变，肺部气管出现卡他性分泌物。病变过程大多从肺心叶开始，初始为点状或絮状病变，进而逐渐大面积扩散成炎性病变及肺气肿，肺部结缔组织增生、实质性变化，呈现对称性肉样病变或对称性胰腺样典型病变。

4 鉴别诊断

根据临床症状和病理变化的特征可做出初步判断，必要时可做实验室检验以确诊。（1）X线对本病诊断具有重要价值。检查时，病猪在背腹位肺野中央区域的两心膈角区域或心脏外围呈现不规则大片弥漫性的云絮状渗出性阴影。（2）通过检测血清抗体水平可以判断猪是否患有MPS，其中ELISA检测方法最为常用。刘茂军等(2007)选用猪肺炎支原体MhpJ株培养物制备抗原，建立了检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA方法。结果显示，ELISA试验的最佳反应条件为：抗原包被浓度为1.5μg/ml，待检血清的最佳稀释浓度1:100，2%明胶作封闭液，抗原抗体最佳结合时间为90min，酶标抗体1:10000(体积比)稀释，最佳作用时间为60min。对136份样品检测结果表明，建立的猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法与美国IDEXX公司生产的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒检测的符合率达到83.8%，假阴性率8.8%，假阳性率1.5%。祝永琴等(2010)将已构建的含有猪肺炎支原体P36基因的酵母表达质粒pPICZα-A-P36在酵母菌X-33里进行表达，并对表达的蛋白进行Western-blotting鉴定。将其作为包被抗原包被酶标板，用羊抗猪IgG-HRP作为酶标二抗，并分别对抗原浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度以及作用时间等进行了优化，最终建立了稳定的抗猪肺炎支原体IgG的间接ELISA检测方法。应用该方法检测猪鼻支原体、猪絮状支原体、猪圆环病毒阳性血清等都是阴性，说明该方法具有良好的特异性。批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均小于8%，说明该方法具有良好的重复性。利用该方法检测猪肺炎支原体活疫苗(168株)免疫猪血清中IgG的动态变化，结果表明，免疫猪血清中的IgG在免疫后分泌逐渐增加，直至免疫后8周，而经强毒攻毒后抗体滴度明显增高。（3）分子生物学诊断方面：逯晓敏等(2010)根据猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列，建立了猪肺炎支原体套式PCR检测方法。运用该方法猪肺炎支原体不同菌种均能扩增出427bp的目的条带，而其他病原菌未出现特异性扩增条带，最低检测限度为10个CCU(颜色变化单位)。武昱孜等(2012)根据猪肺炎支原体(Mhp)P97基因序列设计，建立了一种快速检测Mhp的TaqMan-BHQ荧光定量PCR方法。结果显示，该方法特异性良好，与其他病原不发生交叉反应；最低检测限可达10copies/μl，敏感性高；不同梯度定量模板的拷贝数的对数值与Ct值之间有良好的线性关系，扩增效率为95.85%，重复性良好。朱凤琼等(2012)通过设计1对针对16srDNA的引物，建立了该病原的PCR检测方法，该方法能从标准株和分离株中获得阳性扩增，但不会与其他种类支原体或者是猪呼吸道中的常见微生物发生交叉反应。为证实扩增产物的特异性，对2个PCR产物进行纯化、测序和序列分析，证实为肺炎支原体。（4）华利忠等(2013)建立了一个猪场猪肺炎支原体气溶胶富集及检测技术。实验室模拟采样的采集效率达到(37.04±6.43)%，人工感染猪肺炎支原体后7d即在饲养房间的气溶胶中检到猪肺炎支原体；2个猪场共11个不同猪舍气溶胶中猪肺炎支原体检测结果均为阳性，检出率100%。肖国生等(2008)在猪肺炎支原体的16SrRNA、P36和P463个基因内设计3个靶基因片段，用PCR标记Cy3探针，建立了用于检测和鉴定猪肺炎支原体的检测芯片。试验结果显示，猪肺炎支原体与检测芯片的3个靶基因(Mhp-16S、Mhp-P46和Mhp-P36)杂交呈阳性，猪鼻支原体只与Mhp-16S靶基因杂交呈阳性，其它所测细菌和病毒不与检测芯片的靶基因杂交。检测芯片的检测灵敏度和PCR相同，能达到10pg基因组DNA/50μL标记体系或反应体系。

5 防治措施

5.1 建立健全的生物安全体系 （1）推行自繁自养及全进全出管理模式。规模化猪场尽量坚持自繁自养，是长效防控本病的基本策略。一般坚持饲养外种杂交品种、外种与本地杂交品种(二元、三元杂交)猪较少发病，本地品种猪发病率相对较高。自繁自养本地品种，建议良繁提纯过程中要加强检疫检验，严格淘汰本病隐性个体，消除源头疫病隐患。在养殖期末，规模场务必执行严格的“全进全出”制度，因为在猪群育肥过程中有极大的隐性感染风险，其产生的排泄物、分泌物等也可能对环境构成污染，必须在全出后实施到位的粪污、垫料无害化处置，并坚持足够休养期，才能有效控制环境中病原微生物数量，从而降低今后饲养猪群的发病风险。（2）做好舍内环境卫生和消毒工作：每天早晚清扫舍内粪便及舍区周围的污染物，规模猪场3d消毒1次。只有这样才能最大限度地降低场内的病原微生物数量，从而减少猪肺炎支原体的感染率。（3）加强猪场的日常管理工作：怀孕母猪实行单圈饲养，断奶仔猪按窝集中育肥，做到“母猪不见面，仔猪不窜圈”。让仔猪感染本病只能来自本窝母猪，检查母猪是否为带菌母猪或发病母猪．逐步确定无本病的健康母猪群，使之扩大为无本病的健康猪场。兽医和饲养员平时加强对猪群的观察，从猪群中检出早期病猪，一要听咳嗽，特别注意在夜间、清晨、喂食和运动时，猪只有无咳嗽、喷嚏现象，二要查呼吸，猪群休息时注意呼吸次数和呼吸深度。确定病猪及早挑出并集中隔离饲养，进行有效的治疗和消毒处理，这是防止扩散、迅速控制本病发展的重要环节。

5.2 做到科学的饲养管理 （1）构建适宜养殖环境条件：一是防止强冷风、粉尘、有害气体、刺激性消毒剂等刺激、损伤猪群呼吸道黏膜。二是猪舍内构建良性环境，尤其是仔猪舍，要长期保持“干燥、清洁、无菌”的良性环境，并在大幅降温时节采取保温措施，主动将仔猪舍内温度控制于25~28℃、相对湿度70%~75%左右；育成猪舍温度18~22℃、相对湿度65%~70%，如此可以大大降低本病发病。三是猪舍内禁止任何可能携带病原的人、其他动物、用具等进入，长期坚持制度化卫生治理、防疫消毒。四是猪群定期驱除体内外寄生虫，包括蚊蝇、鼠害等均要严格防范，以掐断中间传播媒介，降低本病发病。（2）加强检疫检验及源头净化：现代规模化猪场引进良种种猪(种公猪、种母猪)在所难免，加强引种检疫检验及隔离饲养、观察制度管理，提高本病的检出率，从源头上控制本病进入本场。养殖场猪群要合理分群、限密饲养，母猪实行专舍(单圈)饲养，断奶仔猪、育成猪群、育肥猪群要按照“同窝、同舍、体况基本一致”的原则组群饲养，禁止随意转舍(栏)、并群，并要加强日常监测，定期检疫检验，及时隔离、清除可疑患猪另舍饲养，以此净化猪群、优化整群，从而防止本病发病及蔓延。

5.3 预防与治疗措施 选择敏感的抗菌药物脉冲式给药可减缓疾病的临床症状并避免继发感染，尤其是在易感阶段用药，可以收到较好的效果，但是容易导致病原体产生耐药性。药物治疗的关键是早起用药。常用的药物有喹诺酮类、大环内酯类、四环素类、林可胺类、以卡那霉素类。对病猪实行注射给药，尤其是胸腔内或肺内注射给药效果比较理想。

[1] 华利忠, 武昱孜, 白方方等. 猪肺炎支原体气溶胶富集检测技术的初步研究[J]. 中国农学通报, 2013, 5: 42-47.

[2] 刘茂军, 靳岷, 杜改梅等. 检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立[J]. 江苏农业学报, 2007, 5: 437-441.

[3] 逯晓敏, 冯志新, 刘茂军等. 猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立及应用[J]. 江苏农业学报, 2010, 1: 91-95.

[4] 肖国生, 曹三杰, 黄小波等. 猪肺炎支原体检测芯片的研制及初步应用[J]. 中国预防兽医学报, 2008, 1: 57-63.

[5] 武昱孜, 靳蒙蒙, 白方方等. 猪肺炎支原体P97 TaqMan-BHQ荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J]. 中国兽医科学, 2012, 12: 1268-1272.

[6] 朱凤琼, 陈达燕, 杨林富等. 猪肺炎支原体PCR检测方法的建立研究[J]. 现代农业科技, 2012, 3: 319-321.

[7] 祝永琴, 冯志新, 刘茂军等. 猪肺炎支原体P36蛋白间接ELISA检测方法的建立[J]. 江苏农业学报, 2010, 5: 987-992.

（2016–06–21）

S858.28

A

1007-1733(2016)09-0085-03