外周血中性粒细胞CD64在细菌感染性疾病中的临床研究新进展

2016-04-04王丽娟托娅

实用检验医师杂志 2016年1期

王丽娟　托娅

王丽娟托娅

【摘要】外周血中性粒细胞CD64用于鉴别诊断细菌感染性疾病越来越受到临床的广泛关注。研究表明，中性粒细胞CD64检测不仅有助于细菌感染的早期诊断，对感染严重程度的评估及预后判断也有重要意义。随着中性粒细胞CD64检测在临床应用中的不断拓展，中性粒细胞CD64逐渐成为临床抗生素治疗效果的评估手段。本文就近年来其在细菌感染性疾病中的临床应用研究做一综述。

【关键词】生物标志物；中性粒细胞CD64；流式细胞术；感染；脓毒症

人体的免疫反应在促炎－抗炎反应机制之间具有高度复杂的动态平衡关系，且涉及细胞和细胞因子。当免疫系统被激活，例如细菌感染时，免疫反应与促炎－抗炎反应处于平衡且同步发生的状态。在全身性炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS），即脓毒症时，免疫系统受到过度刺激导致机体内促炎－抗炎自稳失衡，大量分泌的促炎性细胞因子会导致白细胞过度活化，释放裂解酶和毒性自由基，造成内皮细胞损伤，血管通透性增加，发生循环障碍，最终引起多器官功能衰竭。过度抗炎反应会引起免疫抑制，这使得患者更容易出现继发感染［1］。

SIRS不仅由感染引起，严重创伤或烧伤、手术、胰腺炎以及缺血－再灌注等多种因素也可以诱发SIRS。由细菌感染引发的SIRS患者，可能会进一步发展为严重SIRS、感染性休克，最终导致死亡［2］。尽管抗生素的应用已较为普遍，但SIRS患者的病死率仍然很高，有研究［3］显示SIRS患者病死率高达50%。造成高病死率的一个主要原因是错过最佳的治疗时机，造成了不可逆损伤。因此，对于SIRS患者，抗生素的早期治疗可以增加生存机率。

目前，诊断SIRS的金标准仍然是血培养［4］。然而血培养耗时较长、阳性率较低，无法及时提供早期的诊断依据。在此期间，感染患者的病情可能迅速恶化。因此，在血培养结果报告之前，临床医生往往选择广谱抗生素用于治疗。然而，非细菌感染的患者使用抗生素不仅会增加细菌耐药性的出现，而且会产生昂贵的医疗费用，增加患者的负担。因此，临床医生需要一种能够快速可靠地检测SIRS及其相关感染的生物标志物，用于及早判断是否应用抗生素治疗。

1　中性粒细胞CD64的生物学特性

中性粒细胞CD64是近年来新发现的一项针对细菌感染的特异性指标。CD64是免疫球蛋白超家族成员IgG Fc受体之一，又称FcγRⅠ，是唯一的高亲和力受体，可以结合单体的IgG1和IgG3。主要表达于单核细胞、巨噬细胞及树突状细胞表面，其表达受细胞因子的调控，对体液免疫和细胞免疫有重要的调节作用。正常情况下，外周血中性粒细胞表面CD64呈低水平表达，当受到细菌细胞壁成分脂多糖的刺激后（即发生感染时），4－6 h之内外周血中性粒细胞CD64在促炎细胞因子的作用下会明显升高，可高达10倍以上，因此可作为细菌感染的早期检测指标［5－8］。

2　中性粒细胞CD64的检测方法

流式细胞仪是目前检测中性粒细胞CD64的首选方法。早期的研究者采用密度梯度离心法分离细胞后通过间接免疫荧光法检测CD64的表达。如今，几乎所有的研究者均采用直接免疫荧光法检测全血中性粒细胞CD64的荧光强度，少数研究者直接用荧光强度的百分比进行比较，或根据其淋巴细胞CD64的荧光强度进行计算，从而得出中性粒细胞CD64指数的大小。

3　中性粒细胞CD64的临床诊断效能

3.1中性粒细胞CD64对于成人SIRS的诊断效能Wang等［9］进行了一项荟萃分析，通过检索PubMed、EMBASE、ISI、Web of Knowledge等数据库，选取了符合纳入标准的8项研究共1986例患者，最后进行分析归纳、总结得出中性粒细胞CD64的表达对于细菌感染的早期诊断是很有价值的生物标志物。在成年SIRS患者的诊断中，其敏感性和特异性分别为76%和85%。阳性似然比、阴性似然比和诊断比值比分别为8.15、0.16和60.41，受试者工作特征曲线下面积为0.95。由此得出CD64表达可作为SIRS早期诊断有效的生物标志物，但检测结果不能单独作为诊断指标，而应结合病史、体格检查及其他检查结果综合判断。

Livaditi等［10］选取47例成人重症SIRS患者进行前瞻性研究，测定其中性粒细胞CD64（同时还测定了其他临床常用的生物标志物）在SIRS发病24 h内的表达水平。结果显示，与健康对照组比较，CD64表达水平明显升高，且随着其严重程度的增加而不断上升。受试者工作特征曲线分析显示其具有较高的灵敏度和特异性。此外，CD64表达增加与28 d病死率显著相关，说明中性粒细胞CD64指数能够可靠地评估病程阶段，以及疾病严重程度，预测SIRS的28 d病死率。

Icardi等［11］曾对109例患者进行了为期2个多月的监测，同时检测外周血中性粒细胞CD64指数并进行细菌培养。研究发现，CD64指数的预测值≤1.19时血培养结果阴性；CD64指数的预测值＞1.19时血培养和／或其最终的临床诊断结果阳性。CD64诊断的敏感性和特异性分别为94.6%和88.7%，阳性预测值和阴性预测值分别为89.8%和94%。这进一步证明了CD64对于细菌感染的早期诊断价值。Cid等［6］在最近的一项荟萃分析中指出，CD64作为SIRS的诊断标志物其敏感性为79%，特异性达91%。

虽然大多数研究都是在较小的患者群体中进行，且研究方法尚需进一步完善，但研究结果还是比较一致的。几乎所有相关研究均得出如下结论，CD64的表达对于细菌感染具有相对特异性，可将其应用于SIRS的诊断中。

3.2中性粒细胞CD64对于新生儿及儿童SIRS的诊断效能新生儿SIRS在某些方面不同于成人SIRS，临床症状通常比成人更轻，特异性不明显，临床评分系统无明显的优势，传统的实验室检测诊断性能差［12，13］。因此，将中性粒细胞CD64作为新生儿及儿童SIRS诊断的生物标志物单独讨论是必要的。据报道［14，15］，健康新生儿中性粒细胞CD64较成年人有较高的表达水平，这可能会影响检测的诊断效能。

邵洁等［16］对89例疑似SIRS患儿进行研究，根据其临床表现、血培养及5项非特异性指标［白细胞（white blood cell，WBC）、血小板、血浆C反应蛋白（C reactive protein，CRP）、微量血沉、未成熟中性粒细胞与中性粒细胞总数比值］，分为SIRS组和非SIRS感染组，同时设对照组，采用流式细胞仪对所有患儿的外周血中性粒细胞CD64的表达进行检测，结果显示，中性粒细胞CD64对儿童SIRS诊断的敏感性为97.4%，特异性为84.0%，阳性预测值为82.6%，阴性预测值为97.6%。CD64检测的阳性率为62.9%，高于血培养和5项非特异性指标的阳性率。由此可见，外周血中性粒细胞CD64测定可作为新生儿SIRS早期诊断的指标，并可以判断疗效。

Streimish等［17］对中性粒细胞CD64指数在新生儿SIRS诊断价值的研究显示，对于早发性SIRS，当CD64指数的cutoff值为2.38时，其敏感性、特异性和阴性预测值分别为100%，68%和100%；对于迟发性SIRS，当CD64指数的cutoff值为3.62时，其敏感性、特异性和阴性预测值分别为75%，77%和96%。说明中性粒细胞CD64指数可作为诊断新生儿SIRS的一项有价值的生物标志物。

Gámez－Díaz等［18］进行的一项大样本的研究显示，成人、新生儿及儿童的CD64指数的敏感性与特异性差异无统计学意义，说明中性粒细胞CD64作为一项诊断SIRS的生物标志物，在成人、新生儿及儿童中均适用。

4　中性粒细胞CD64在鉴别诊断中的价值

多项研究［5，8，19，20］均证明中性粒细胞CD64对于鉴别诊断细菌感染与病毒、真菌及支原体等非细菌感染性疾病具有较高的敏感性和特异性。章洪院等［21］回顾性分析了64例能找到病原学依据的社区获得性肺炎患者，其中细菌性肺炎患者30例，肺炎支原体肺炎患者34例，同时选择30例健康者为对照组，测定CD64、降钙素原、超敏CRP及WBC。得出细菌性肺炎组CD64、降钙素原、超敏CRP及WBC的检测结果均高于肺炎支原体肺炎组及对照组，差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。孙丽等［22］进行了相同的研究，得出CD64诊断细菌性肺炎的敏感性为84%，特异性为91%，CRP诊断细菌性肺炎的敏感性为89%，特异性为78%，说明CD64可作为细菌性感染和非细菌性感染鉴别诊断的指标。

卢小岚等［23］将61例感染发热患者以白细胞分类和病原体分离培养结果为依据分为细菌感染组32例和病毒感染组29例，随机选择同期的健康体检者29例作为正常对照组；采用流式细胞术检测外周血中性粒细胞CD64的荧光强度并计算CD64指数，细菌感染组CD64指数为（4.33±2.24），明显高于病毒感染组（2.83±1.36）和正常对照组（1.96±0.24）。

5　中性粒细胞CD64对病情严重程度及预后判断的价值

所起凤等［24］对103例重症感染患者的研究显示，SIRS患者的CD64指数最高，且明显高于局部细菌感染患者，对细菌感染患者行抗生素治疗后，CD64指数明显低于治疗前，且差异有统计学意义。冯萍、蔡鹏威等［8，25］多位研究者也做过类似的研究，证明CD64不仅可作为细菌感染患者的早期诊断指标，对于其病情严重程度及预后判断也是可靠的指标。

6　展望

在目前发现的诊断细菌性感染的众多生物标志物中，中性粒细胞CD64是一个比较新颖且可靠的生物标志物。中性粒细胞CD64的检测有助于细菌感染的早期诊断、鉴别诊断、疾病严重程度的评估以及预后判断。中性粒细胞CD64指数水平可帮助临床排除及初步判断不明原因发热患者感染的病原体种类，且较细菌感染检测的金标准—细菌培养可有效缩短检测时间，并指导临床合理使用抗生素，降低因抗生素的不合理使用而导致的细菌耐药性及多重耐药菌株的出现。加之采用先进的流式细胞术检测技术，可保证检测结果的准确性，相信随着对中性粒细胞CD64研究的不断完善，其终将成为临床上更加方便而准确的诊断细菌感染性疾病的生物标志物。

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（本文编辑：李霦）

综述

收稿日期：（2015－12－29）

doi：10.3969／j.issn.1674－7151.2016.01.013

通讯作者：托娅，E－mail：antuoya＠163.com