甘肃省张掖市规模养鸡场减蛋综合征和新城疫免疫抗体水平调查

李旭蓉，张文波，钱振波，李珊，马斌

（1.甘肃省张掖市动物疫病预防控制中心，734000；2.张掖市农畜产品检验检测中心；3.张掖市畜牧管理站）

甘肃省张掖市规模养鸡场减蛋综合征和新城疫免疫抗体水平调查

李旭蓉1，张文波1，钱振波2，李珊1，马斌3

（1.甘肃省张掖市动物疫病预防控制中心，734000；2.张掖市农畜产品检验检测中心；3.张掖市畜牧管理站）

为掌握张掖市规模养鸡场减蛋综合征和新城疫的免疫抗体水平，对张掖市5个县（区）10个规模养鸡场500份血清进行了减蛋综合征、新城疫免疫抗体检测。结果表明减蛋综合征合格409份，合格率为81.8%；新城疫合格411份，合格率为82.2%。减蛋综合征合格率最高为95%，最低为70%；新城疫合格率最高为100%，最低为71%。群体免疫抗体水平均达到农业部规定≥70%的标准。

减蛋综合征；新城疫；抗体水平；调查

鸡减蛋综合征（EDS76），又称鸡产蛋下降综合征，是一种由禽腺病毒引起的病毒性传染病。该病是给养鸡业带来巨大经济损失的四种主要病毒性传染病之一[1]，传染性很高但通常不会引发死亡，其主要特征为突然性群体产蛋率下降20～38%，蛋壳异常、蛋体畸形及蛋质低劣等，软壳蛋占15%以上[2]。本病给我国养禽业带来巨大的经济损失。

新城疫（ND）,也称亚洲鸡瘟，是由新城疫病毒引起的鸡急性、高度接触性传染病，一年四季均可发生，典型临床症状为呼吸困难，头冠紫黑，食欲废绝，下痢，部分鸡出现神经紊乱，共济失调，转圈，前冲，后退，病死率可达100%。该病仍是最主要和最危险的禽病之一。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 被检血清。2015年11月，在甘州、临泽、高台、山丹、民乐5县（区）各随机选择2个规模养鸡场，每个规模养鸡场采用随机抽样的方式，采集已免疫鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征三联灭活疫苗（N79株＋M41株+NE4株）（青岛易邦生物工程有限公司生产）21天后的血样50份，共500份（临泽和山丹2县同时联用了禽流感、新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）），无菌分离血清，编号备检。

1.1.2 检测器材。96孔V型微量反应板，100 μL微量移液器，吸头，离心机，振荡器等。

1.1.3 1%鸡红细胞悬液制备。采集3只以上非免疫健康公鸡提供的红细胞混合在一起，用pH7.2、0.01 mol/L PBS液洗涤3次，每次均以1000 r/min离心10min，洗涤后用PBS配成体积分数为1%红细胞悬液，4℃保存备用。

1.1.4 检测试剂。减蛋综合征血凝（HA）和血凝抑制试验（HI）试剂，由中国兽医药品监察所生产（批号：201508）。新城疫血凝（HA）和血凝抑制试验（HI）试剂，由哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司生产（批号：20150403）。

1.2 检测方法

1.2.1 血凝试验（HA）。（1）在微量反应板的1孔～12孔均加入0.025 ml PBS，换吸头。（2）吸取0.025 ml抗原加入第1孔，混匀后依次倍比稀释至从第11孔吸取0.025 ml弃之，换吸头。（3）每孔再加入0.025 ml PBS。（4）每孔均加入0.025 ml体积分数为1%鸡红细胞悬液，室温(20℃～25℃)下静置40min后，判断结果。（5）结果判定：将板倾斜，观察红细胞有无呈泪滴状流淌。完全血凝（不流淌）的抗原或病毒最高稀释倍数代表一个血凝单位。

1.2.2 血凝抑制试验（HI）。（1）根据HA试验结果配制四个血凝单位的的抗原。（2）在微量反应板的1孔～11孔加入0.025 ml PBS，第12孔加入0.05 ml PBS。（3）吸取0.025 mL血清加入第1孔内，充分混匀后吸0.025 ml于第2孔，依次对倍稀释至第10孔，从第10孔吸取0.025 ml弃去。（4）1孔～11孔均加入含4个血凝单位的抗原0.025 ml，室温(20℃～25℃)静置30 min。（5）每孔加入0.025 ml体积分数为1%的鸡红细胞悬液混匀，室温（20℃～25℃）静置20～40 min，对照孔红细胞呈显钮扣状沉于孔底时判断结果。（6）结果判定：减蛋综合征以完全抑制4个血凝单位抗原的血清最高稀释倍数判为该血清的HI抗体效价。如果效价在1:16以上，判定为合格，新城疫以完全抑制4个血凝单位抗原的血清最高稀释倍数判为该血清的HI抗体效价。如果效价在1: 16以上，保护率为90%～100%。

2 结果与分析

共对5县（区）10个规模蛋鸡场采送的500份血清进行了减蛋综合征和新城疫免疫抗体检测，减蛋综合征合格409份，合格率81.8%；新城疫合格数411份，合格率82.2%。山丹县、临泽县减蛋综合征和新城疫的免疫抗体合格率均较高。检测结果见表。

表 张掖市规模养鸡场EDS76和ND免疫抗体检测结果统计

3 小结与讨论

3.1 李晓东等[3]2008-2011年，每年选取100个养殖场，每个养鸡场采20份血清，共2000份，用血凝与血凝抑制试验监测减蛋综合征抗体效价，合格率分别为83.9%、83.6%、86%、90.3%、86%。说明接种三联苗能达到较好的免疫效果。黃文生等[4]用酶联免疫吸附试验，对使用鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗二倍量饮水免疫及注射新城疫灭活疫苗的5个养鸡场采集血清，进行了新城疫血清抗体检测。共检测180份，平均合格率为96.67%，最高达100%，最低达93.33%。从此次检测结果来看，因临泽县、山丹县同时联用了禽流感、新城疫重组二联活疫苗，新城疫免疫抗体水平明显较高，分别达到95%、100%。与以上两次报道的检测结果一致，说明多次接种的免疫方法可以获得较高水平的免疫抗体。

3.2 免疫接种是防止减蛋综合征和新城疫发生的一种即经济又简便的有效手段，是预防和控制该类病的根本措施。此外，还应加强科学管理措施，提高饲养水平，改善饲养环境，做好卫生消毒，尽量减少和防止此类病的传播。

3.3 从本次血清学调查结果表明，张掖市5个县（区）随机抽查的10个蛋鸡场进行了减蛋综合征、新城疫免疫抗体的检测，共检测500份鸡血清,减蛋综合征合格409份，合格率81.8%。新城疫合格411份，合格率82.2%。从整体免疫合格率上来讲，减蛋综合征和新城疫虽然达到了农业部和省兽医局关于动物群体免疫合格率≥70%的要求，但还有个别县的养殖场还存在群体免疫不合格的风险，说明有些养殖场对免疫工作的重视程度还不够。

[1]许春荣,王猛,曹亚丹.鸡产蛋下降综合症的病因及防治措施[J].现代农业科技,2006,10:147.

[2]郑明球,蔡宝祥.动物传染病诊治彩色图谱[M].北京:中国农业出版社,2002.

[3]李晓东,李建民,高洁,等.廊坊地区鸡减蛋综合征血清学调查与免疫技术研究[A].“创新驱动、生态养殖、转型发展”论文集[C].,2014:3.

[4]黄文生,洪小珠,陈泽金,等.南安市部分规模化养鸡场鸡新城疫血清学调查与分析[J].福建畜牧兽医, 2013,05:19-21.

S851.31 3

B

1003-8655（2016）06-0091-02

执笔作者：马斌（1981），男，张掖民乐县人，助理畜牧师，主要从事畜牧兽医技术研究推广工作。