色谱技术在药物分析中的应用

于　雪　辛莹娟　蒋　绪

（咸阳职业技术学院，陕西　咸阳　712000）

色谱技术在药物分析中的应用

于雪辛莹娟蒋绪

（咸阳职业技术学院，陕西咸阳712000）

药物的质量直接关系着药品的有效性和安全性，手性药物的质量检测成了药物质量控制的最有效的方法。其中，色谱技术是药品分离、分析检测的有效手段，比较常用的是高效液相色谱技术和毛细管电泳技术。基于此，介绍两种色谱技术的应用，在一维液相色谱技术的基础上阐述二维液相色谱技术及其两种模式。

药物分析；高效液相色谱；毛细管电泳；二维液相色谱

药物从根本上来说是一种商品，但其是一种特殊的商品。药品质量的好坏直接关系到人的生命安全及药物的有效性，所以对药品质量的控制有比其他商品更严格的标准。因此，要利用各种手段和方法对其质量进行分析检测，以控制和提高药物的质量。药物分析在药品生产和制造中起着决定性的作用，这也使得药物分析成了一种专门的学科。

研究表明，在目前存在的所有药物中，至少有50%的药物含有一个不对称中心，有的含有多个。在这些药物中，非天然性的药物，经过人工合成的手性药，如阻断剂、局部麻醉药物及部分抗癫痛药等都以其外消旋体供药用。在人工合成的药物经消化系统进入人体的循环后，由于酶、受体、蛋白质将手性药物分解成2种不同的化合物来进行处理，因而同一种手性药物对映体会产生不同的药理作用，同时也有不同的代谢途径，也有一些手性药物会在映体内发生转化，这也就是为什么药物能治疗顽疾也能产生副作用的主要原因［1］。

1　常用的色谱技术

目前，世界上大多数国家的药品管理部门在审批新的手性药物时，会要求提供对手性药物的每一种成分对映体的各种研究资料，包括药理学、药动学、毒理学等多个方面。传统的分离方法灵敏度和重现性欠佳，随着色谱学的发展，再加上分析仪器技术的不断进步，人们发现用色谱是较为有效的分离分析方法。目前用在药物分析检测上的主要有2种常见的色谱技术，一种是高效液相色谱技术，一种是毛细管色谱技术。

1.1高效液相色谱技术

色谱是现代化学常用的分析、分离技术。最早发展起来的是气相色谱技术，气相色谱技术主要利用物质的挥发性进行检测。但是，已知的化合物中有70%是非挥发性物质，因此气相色谱技术的应用具有一定的局限性。高效液相色谱相对于气相色谱来说，具有分离分析速度快、适用性更广泛等特点，对大多数的沸点高、分子较大、热稳定性能较差的化合物来说，高效液相色谱分析比较实用且分析效果好，目前已成为药品分析检测非常重要的方法。

普通高效液相色谱分析技术虽然适用性强、效率高，但是也存在着缺陷，由于液相色谱的填料相对单一，分离只能针对某种物质来进行，很难通过简单的一次实验将所有待检测物质全部进行分离分析检测，这也是今后如何对普通的高效液相色谱分析进行改进的地方。

1.2毛细管色谱技术

毛细管色谱技术是20世纪80年代初期，将传统的电泳技术和色谱技术结合起来发展而成的一种新的分离技术，其操作方便，分离模式多样化，效率和效果都较好，分离速度也较为迅速，最突出的优点是其试剂和样品用量较少。其基本原理为将要分离的物质分解成离子或带电粒子，在电场的作用下这些离子或带电粒子在毛细管中按淌度或分配系数的不同进行分离，其有多种分离模式。

近年来，毛细管电泳技术在医学方面得到了广泛的应用，发展速度极快，很多国家将毛细管电泳技术用于分离测定药品中杂质和异构体，成为了不少国家法定的药品检测方法。其在一定程度上比高效液相色谱分析法更有优势，主要用于原料药品中活性成分的检定、离子测定、手性分离，还有对药物成品性质的鉴定，如pKa值、溶解度值的测定等。

2　二维液相色谱技术及其两种模式

2.1二维液相色谱技术概述

现代医学的不断发展，也促使了越来越多的手性药物的产生。这些手性药物相对以往，从种类和成分上都更为复杂。特别是随着生物科技、蛋白组学、中西药现代化研究的深入，普通的一维液相色谱技术已不能够满足要求，二维液相色谱技术的出现有力地推进了现代医学中复杂体系成分分离的进一步发展［2］。Gidding指出二维液相色谱相对一维液相色谱具有更高的执行效率、更好的分离效果和更高的峰容量，对复杂分离体系的适用性更强［3］。二维液相色谱正逐渐取代一维液相色谱成为医学分离技术色谱发展新的方向。

二维液相色谱采用多次分离的技术进行分析检测，将不同的色谱连接起来，使得在一次色谱未分离的组分在接下来的第二维色谱中继续进行分离，并不断重复这个过程，直至所有的组分均分离。二维液相色谱是两种分离模式的结合，是多种一维液相色谱的组合。二维液相色谱根据一维分离组分是否完全转到二维中，分为中心切割模式和全二维液相色谱两种模式。

2.2二维液相色谱技术的两种模式

中心切割模式将一维中的组分有选择的分到第二维进行分离检测，这种做法可以有效减少外界的干扰，提高分离的纯度。全二维液相色谱模式是将一维色谱柱操作后的全部组分完全转入第二维进行分离，这样虽有干扰，但可以获得所有的组分信息，比较适合于复杂样品的分离检测工作。相对于一维分离检测法来说，二维分离检测可以大大提高样品分离的纯度，减少外界干扰，将样品分离测定、浓缩净化一次性处理，简化了程序，同时减小了在分离检测过程中样品的损失和受污染的风险，在实际的分离过程中要针对样品和分离纯度的要求来选择分离检测方法。

二维液相色谱的中心切割模式和全二维分离模式，在实际分离过程中主要考虑以下几个重要因素。一是流动相的兼容性。由于在做样品分离检测时，两种模式的分离原理不同，这样可以提供多种分离的选择。但是，这两种模式同时会造成溶剂系统的互斥，甚至有可能造成色谱柱损坏。所以，采取兼容的流动相是二维液相色谱模式选择首要考虑的问题。二是分离速度的兼容性。二维分离是在第一维分离的基础上进行的，如果第二维的分离速度慢，则第一维分离后的组分会在第二维分离的过程中重新混合，造成第一维分离工作的浪费。所以，要第一维和第二维的分离速度兼容，第二维的分离速度要高于第一维的分离速度才行。三是第一维和二维色谱洗脱强度的兼容性。当样品经过第一维分离后进入第二维的分离流程，这个过程中组分在经过两色谱柱之间的环线、检测器的流程中很容易造成峰展宽，因此必须使第二维色谱的洗脱能力强于第一维。

3　结语

色谱技术在药物检测分离中起到非常大的作用，在实际的药品检测时要根据样品性质、纯度需求、分离需要来选择相应的分离技术和模式。

［1］Ling Y S，Liang H J，Lin M H，et al.Two-dimensional LC-MS/MS to enhance cerarnide and phosphatidylcholine species profiling in mouse liver［J］.Biomed Chromatogr，2014 （9）：1284-1293.

［2］高辉，温学森，马小军，等.二维液相色谱技术在药物分析中的应用［J］.药物分析杂志，2007（4）：616-620.

［3］陈静，刘召金，戴振宇，等.适用于质谱分析的在线固相萃取除盐方法［J］.色谱，2013（9）：894-897.

Application of Chromatography in Pharmaceutical Analysis

Yu XueXin YingjuanJiang Xu
（Xianyang Vocational and Technical College，Xianyang Shaanxi 712000）

The quality of the drug directly related to the effectiveness and safety of drugs，the quality of chiral drug testing has become the most effective method of drug quality control.Chromatography is an effective method for the separation and analysis of drugs.It is commonly used in high performance liquid chromatography and capillary electrophoresis.Based on this，this paper introduced the application of two kinds of chromatographic techniques，and described the technology of two-dimensional liquid chromatography based on one dimensional liquid chromatography.

pharmaceutical analysis；high performance liquid chromatography；capillary electrophoresis；two-dimensional liquid chromatography

TQ460.7

A

1003-5168（2016）05-0132-02

2016-04-23

于雪（1984-），女，硕士，助教，研究方向：液相色谱、药物蛋白相互作用。