丹参及复方制剂多指标成分质量控制方法研究

柳　意



丹参及复方制剂多指标成分质量控制方法研究

柳意

（锦州师范高等专科学校，辽宁锦州 121000）

在中药材中丹参属于常用药，水溶性酚酸类成分以及脂溶性二萜醌类成分是丹参的主要化学成分。数据显示，丹参复方制剂在临床应用上已经多达上百个种类。由此可见，控制丹参及其复方制剂的质量十分必要。现有报道过的丹参复方制剂质量控制的方法难以全面评价其内在质量，某些方法还有待改进。本文选择丹参滴注液和丹参饮片这两种丹参复方制剂，以丹参和其它主味药的多指标成分为质量指标，应用反相高效液相二极管阵列检测法，建立了测定丹参滴注液、丹参饮片这两种丹参复方制剂中有效成分的方法，以此来全面评价其质量。

丹参复方制剂；多指标成分；质量控制

中药成分十分复杂，对其作用机理也没有明确的认识，但是其治疗效果比较明显，因此受到国内外医学界的广泛关注，形成了一种研究热潮。

1 丹参滴注液中四种水溶性成分含量测定

丹参滴注液可以治疗心绞痛、冠心病等疾病，达到活血消肿、活血化瘀等效果。其中的有效成分包括迷迭香酸、丹参素、原儿茶醛及丹酚酸A、B、C等水溶性酚酸类成分[1]。下面应用高效液相色谱二极管阵列检测法测定迷迭香酸、丹参素、丹酚酸B及原儿茶醛的含量，从而全面评价丹参滴注液的质量。

1.1 试剂、仪器准备

采购市场上某药业有限公司生产的不同批次的丹参滴注液，分别为06060401、06042201、07030202。购进纯度大于98%的迷迭香酸，丹参素、丹酚酸B以及原儿茶醛则来自中国药品生物制品检定所。检测仪器采用Agilent 1100全自动高效液相色谱仪。

1.2 检验方法、过程

（1）色谱标准。色谱柱应该以 Diamonsil TMC18（250×4.6 mm，5μm）为准，将5%冰乙酸和甲醇作为流动相并进行梯度洗脱，维持1.0 mL/min的流动速度和30 ℃的柱温，检测波长为 286 nm，以20μL的进样量为宜。

（2）溶液准备。供试品溶液的制作，在25mL的容量瓶中量入3mL的丹参滴注液，然后加入20%甲醇将其稀释达到刻度值，摇匀后采用0.45μm的微孔滤膜过滤溶液，滤液就是供试品溶液。

对照品溶液的制作，在25mL的容量瓶中加入适量迷迭香酸、丹参素、丹酚酸B以及原儿茶醛，然后加入20%甲醇将其稀释达到刻度值，摇匀后配置成不同浓度的混合对照品溶液，即3.508、21.92、25.92和38.64μg/mL。

（3）检验指标。检验指标包括系统适用性试验、精密度试验、回收率试验、重现性试验、稳定性试验、检测限、线性关系检测以及样品检测。其中，线性关系检测是指采用0.45μm微孔滤膜过滤混合对照品溶液，根据色谱标准进行不同量的进样，即10μL、20μL、30μL、40μL、50μL、60μL、70μL。记录每个组分的色谱峰面积，将其与进样量应用线性回归加以分析。

1.3 检测结果

按照色谱标准，通过以上试验计算出迷迭香酸的平均回收率是 99.8%，相对标准偏差是0.68%，线性范围在0.2592~1.814 μg（r=1.0000）；丹参素的平均回收率是102.6%，相对标准偏差是0.55%，线性范围在0.2192~1.934 μg（r=0.9999）；丹酚酸 B 的平均回收率是102.8%，相对标准偏差是0.49%，线性范围在0.3864~2.705 μg（r=0.9999）；原儿茶醛的平均回收率是103.5%，相对标准偏差是0.42%，线性范围在0.0351~0.2456 μg（r=1.0000）。试验结果显示，迷迭香酸、丹参素、丹酚酸B以及原儿茶醛这四种水溶性成分完全分离，因此这种方法可以全面分析丹参滴注液的质量控制。

2 丹参饮片中五种水溶性成分含量的测定

2.1 试剂、仪器准备

从市场上采购丹参药材，购进纯度大于98%的迷迭香酸，丹参素、丹酚酸B、原儿茶酸以及原儿茶醛来自中国药品生物制品检定所。检测仪器采用Agilent 1200全自动高效液相色谱仪。

2.2 检验方法、过程

（1）色谱标准。丹参饮片成分测定的色谱标准与丹参滴注液的标准相同，详情参照上述内容，不再赘述。（2）溶液准备。供试品溶液的制作，在索氏提取器中加入适量的丹参药材粉末和100mL的重蒸水,提取14个小时，采用0.45μm微孔滤膜过滤提取液，滤液就是供试品溶液。

对照品溶液的制作，在25mL的容量瓶中加入适量的迷迭香酸、丹参素、丹酚酸B、原儿茶酸以及原儿茶醛，加入20%甲醇稀释到刻度，将其分为浓度分别在35.08、109.6、129.6、148.4、193.2mg/L的溶液作为储备。在10mL的容量瓶中分别吸取0.30、5.0、0.35、0.10、0.80mL的储备液，加入20%的甲醇稀释到刻度，把这个溶液分成浓度在1.052、54.8、4.536、1.484、15.46mg/L的混合对照品溶液。

（3）检验指标。检验指标与丹参滴注液成分的检验指标相同。根据色谱标准，准确吸取丹参饮片的供试品溶液和混合对照品溶液，检验6组分的理论塔板数和分离度，进行系统适用性试验。线性关系检测和精密度试验等指标都与丹参滴注液的内容相同，通过这些试验计算五种水溶性成分的相关数据。

2.3 检验结果

按照色谱标准，通过以上试验计算出迷迭香酸的平均回收率是100.7 %，相对标准偏差是1.0%，线性范围在0.0454~0.3175 μg（r=0.9999）；丹参素的平均回收率是100.7%，相对标准偏差是0.96%，线性范围在0.5480~3.836μg（r=0.9992）；丹酚酸 B 的平均回收率是101.3%，相对标准偏差是0.88%，线性范围在0.1546~1.082 μg（r=0.9999）；原儿茶酸的平均回收率是100.8%，相对标准偏差是1.0%，线性范围在0.0148~0.1039 μg（r=0.9999）；原儿茶醛的平均回收率是100.6%，相对标准偏差是0.60%，线性范围在0.0105~0.07367 μg（r=0.9999）。试验结果显示，迷迭香酸、丹参素、丹酚酸B、原儿茶酸以及原儿茶醛这五种水溶性成分完全分离，因此这种方法可以全面分析丹参饮片的质量控制。

3 结束语

目前对于丹参及其复方制剂的研究程度不断加深，加之色谱法的广泛应用，因此可以同时测定更多的有效成分含量，以此来分析其质量控制。丹参复方制剂新品不断进入市场，但是缺乏应有的质量标准，因此需要加强研究，做好新药的质量控制。

[1] 王欢.丹酚酸B的含量测定方法研究进展[J].江西中医药,2010,41(6):79-80.

[2]马志刚,曹秋娥,丁中涛等.高效液相色谱法测定丹参及其复方制剂中的3个丹参酮[J].云南民族大学学报（自然科学版）,2013,22(6):391-393.

Study on quality control method of multi index components of Salvia miltiorrhiza and compound preparation

(Jinzhou Teacher's Training College, Jinzhou Liaoning 121000)

Salvia Chinese herbal medicines commonly used drugs belonging to the water-soluble phenolic acids and fat-soluble diterpene quinone component is the main chemical ingredient of Salvia. Data show that Salvia compound preparation in clinical applications have been up to hundreds of species. Thus, the control and quality of Salvia compound preparation is necessary. The method of preparation of compound Salvia quality control of existing reports over the difficult overall evaluation of its intrinsic quality, some of the methods could be improved. Salvia infusion fluid and paper chooses two Salvia Salvia Pieces compound, multi-index and other main ingredient of Salvia herb is quality indicators, reversed phase HPLC with diode array detection method for the determination of Salvia infusion fluid, Pieces Salvia Salvia both the active ingredient compound preparation methods, in order to fully evaluate its quality.

Salvia compound preparation; Multi-index component; Quality control

（责任编辑：吴 芳）

TG580.23+5

A

10.3969/j.issn.1672-7304.2016.06.042

1672–7304(2016)06–0095–02

柳意（1975-），女，吉林通化人，副教授，研究方向：中药成分。