一例高致病性蓝耳病的诊断及其综合防控建议

张凤华，仲伟平，阮武营，李国枝，刁睿鑫

（开封市动物疫病预防控制中心，河南 开封　475000）

临床病例

一例高致病性蓝耳病的诊断及其综合防控建议

张凤华，仲伟平，阮武营，李国枝，刁睿鑫

（开封市动物疫病预防控制中心，河南 开封475000）

2016年4月，开封市北郊一猪场于半月前从外省购入380多头土猪，购入半月以来陆续有230多头猪发病，其中113头死亡，通过临床症状、病理变化和实验室诊断，最终确诊为高致病性蓝耳病。

1　流行病学调查

该养殖场半月前从外省猪贩手中购入380头土猪，1～2月龄，体质量10～20 kg不等，免疫情况和原场既往病史均不详细。购入4 d内陆续发现19头猪发病，其临床症状为食欲减退，扎堆明显，测量体温升高到40℃。于是将猪群转移至另一场点，可能由于路途运输应激，发病猪明显增多，在购入后的16 d内共有230头猪发病，其中113头死亡。

2　临床症状

大多发病猪临床症状为体温升高，不食，呼吸困难，耳和腹部发紫，拉黑绿色水样粪便，个别猪关节肿大，有神经症状。

3　病理变化

对3头濒临死亡猪进行解剖，病理变化主要为肺脏肿大、出血、有淀粉样病变和坏死点、肾脏肿大、肠系膜淋巴结肿大、出血。

4　诊疗情况

对发烧猪用青霉素、链霉素、氨基比林、地塞米松肌肉注射、连用3 d后治疗效果明显，但几天后又反复发作。

对拉稀猪用庆大霉素和氯霉素治疗，效果明显。

5　实验室诊断

5.1免疫学检测

根据临床症状，对15头病猪进行采血，分别对其进行猪瘟抗体、蓝耳病抗体和伪狂犬抗体检测，以对其抗体水平进行了解。

5.1.1猪瘟抗体检测

取所需用量酶标板条，设阴性/阳性对照各2孔，分别加入阴、阳性对照100 μl，样品孔每孔加入稀释后的样品100 μl，混匀，置37℃反应15分钟；扣去孔内液体，每孔加250 μl洗涤液，重复洗涤5次，拍干；每孔加酶标记物100 μl，置37℃反应15 min；扣去孔内液体，每孔加250 μl洗涤液，重复洗涤5次，拍干；每孔依次加显色液100 μl，混匀，37℃避光反应15 min；每孔加终止液50 μl，混匀，于450 nm测定各孔吸光值（OD值）。判定标准：样品OD值≥0.8为阳性；样品OD值＜0.6为阴性，0.6≤样品OD值＜0.8为可疑。

5.1.2蓝耳抗体检测

将血清样品200倍稀释，取阳性和阴性对照、稀释好的待检血清50 μl加入到反应板中，37℃反应60 min，取出，用洗涤液洗涤3遍，每孔加入50 μl酶标抗体，37℃反应60 min，洗涤3遍，每孔加入50 μl底物，20～25℃作用10 min，每孔加入50 μl终止液。在450 nm下读数并记录结果，结果用IRPC表示，用公式IRPC=（OD450样品-OD450阴性对照平均值）/（OD450阳性对照平均值-OD450阴性对照平均值）×100计算。判断标准：IRPC值＞20表示蓝耳抗体阳性，IRPC值≤20表示蓝耳抗体阴性。

5.1.3伪狂犬抗体检测

取出PRV，抗原包被板，分别加100 μl 2倍稀释的阴性对照血清和阳性对照血清各2孔，将100 μl稀释好的样品加至相应的孔；室温（18～26℃）孵育1 h；每孔用大约300 μl洗液洗涤微孔3～5次；每孔加入100μl酶标抗体；室温（18～26℃）孵育20 min；重复洗涤3～5次；每孔加100 μl TMB底物溶液，室温（18～26℃）孵育15 min；每孔加入50 μl终止液终止反应，在650 nm下测量和记录样品和所有对照的吸光值。计算结果：阴性对照平均值NC=（NC1 A（650）+ NC2 A（650））/2；阳性对照平均值PC=（PC1 A（650）+ PC2A（650））/2；样品/阴性对照比率S/N=样本A（650）/ NC。结果判定：若S/N值≤0.60，样品为PRV抗体阳性；若0.6＜S/N值≤0.70，该样品必须重测；若S/N值＞0.70，则为PRV抗体阴性。

通过对15头病猪进行猪瘟、蓝耳和伪狂犬抗体检测，结果发现部分病猪的蓝耳病抗体存在异常情况（根据以往检测经验，蓝耳病正常免疫抗体IRPC值一般不会超过150）。

5.2病原学检测

将3头病猪进行解剖后分别采样，通过荧光RT-PCR方法分别对猪瘟病毒和高致病性蓝耳病病毒进行检测，检测结果为：3份样品猪瘟病毒检测结果全部为阴性，高致病性蓝耳病病毒检测结果全部为阳性。

根据流行病学调查、病理变化及实验室诊断，最终确诊为高致病性蓝耳病。

6　综合防控建议

预防高致病性猪蓝耳病必须从科学养殖入手，采用合理的免疫程序，改善饲养环境，加强综合管理，主要应做好如下工作：

科学免疫。免疫是预防各种疫病的有效手段，特别是目前需要免疫的疫苗种类很多，一定要按照当地兽医部门的建议或者本场情况，制定合理的免疫程序，适时做好高致病性猪蓝耳病的免疫。一般情况下，商品猪在23～25日龄时，免疫1次高致病性蓝耳病疫苗。种母猪除在23～25日龄免疫外，配种前应加强免疫1次。种公猪除在23～25日龄免疫外，每隔6个月还应免疫1次。发病地区，建议在首次免疫后或紧急免疫后21～28 d进行1次加强免疫。在免疫过程中，要使用农业部批准生产或使用的疫苗，还要注意规范免疫操作。

加强饲养管理。在高热季节，做好猪舍的通风和防暑降温，提供充足的清洁饮水。保持猪舍干燥，保持合理的饲养密度，降低应激因素。冬天既要注意猪舍的保暖，又要注意通风。保证充足的营养，增强猪群抗病能力，采用“全进全出”的养殖模式，杜绝混养，散养的猪要实行圈养。

严格消毒。搞好环境卫生，及时清除猪舍粪便及排泄物，对各种污染物品进行无害化处理。定期对饲养场、猪舍内及周边环境进行消毒。

药物预防继发感染。在兽医技术人员的指导下，选择合适的抗菌类药物、制定合理的用药方案，预防猪群的细菌性继发感染。

严格检疫。要从没有疫情的地方购进仔猪，同时，购买前要查看检疫证明，购进后一定要隔离饲养14 d以上，无异常情况再混群饲养。

发现病猪要报告。发现病猪后，要立即对病猪进行隔离，并立即报告当地畜牧兽医部门，在当地兽医人员的指导下按有关规定处理。

严格处置病死猪。按照《动物防疫法》和国家有关规定，严格对病死猪采取“四不一处理”处置措施，即不准宰杀、不准食用、不准出售、不准转运，对病死猪必须进行无害化处理。

做好其他疫病的预防工作。在认真做好高致病性猪蓝耳病预防的同时，还必须做好其他猪病的预防工作，如猪瘟、伪狂犬、口蹄疫、猪链球菌病等。

S851文献标识码：B

1004-5090（2016）08-0031-02

2016-05-18）