维生素K2与维持性血液透析患者血管钙化相关性研究

刘倩，黄向阳，谭鹤长

(柳州市工人医院肾内科，广西 柳州 545005)

维生素K2与维持性血液透析患者血管钙化相关性研究

刘倩，黄向阳，谭鹤长

(柳州市工人医院肾内科，广西 柳州 545005)

目的 探讨维生素K2与维持性血液透析(MHD)患者血管钙化的关系。方法收集2014年1月至2015年10月在广西医科大第四附属医院血透，透析龄≥3年患者资料。根据入选条件筛选出60例患者(研究组)，用X线平片对骨盆、双手进行血管钙化的定量测量，按血管钙化评分情况分为＜4分组和≥4分组。另选取60例年龄及性别与研究组相仿的健康人为对照组。完善血清维生素K2、血清钙(Ca)、血清磷(P)、全段甲状旁腺激素(iPTH)等指标，采用t检验、Spearman相关分析、Logistic回归分析进行统计学分析。结果研究组患者中有34例出现不同程度、不同部位血管钙化，钙化发生率为56.67%；研究组患者的维生素K2水平较对照组明显降低[(2.46±0.93)vs (4.17±1.04)nmol/L，t=5.652，P＜0.01]；血管钙化评分≥4分组患者维生素K2水平明显低于＜4分组患者[(1.99±0.77) vs(2.56±0.93)nmol/L，t=1.837，P＜0.05]；Spearman相关分析显示维生素K2与血管钙化积分呈负相关(γ=-0.276，P＜0.05)；与钙、磷、钙磷乘积、iPTH无相关性(P＞0.05)。多项Logistic回归分析显示维生素K2是血管钙化的独立影响因素。结论MHD患者普遍存在血管钙化和维生素K2缺乏，维生素K2水平是血管钙化的独立影响因素。

维生素K2；持续性血液透析；血管钙化；相关性

心血管疾病是终末期肾病(End-stage renal disease，ESRD)患者的主要致死亡原因，血管钙化则是ERSD患者发生心血管疾病的独立危险因素。维生素K2在血管钙化中的作用在国内外研究中不断得到证实，它的补充可以明显影响钙化程度。双香豆素类药物(如华法林)是维生素K抑制剂，且经常作为抗凝剂在透析患者中使用。最近，McCabe等[1]研究发现，给服用华法令的小鼠膳食中增加维生素K摄入量，可减慢其血管钙化发展的速度。本研究旨在观察MHD患者血维生素K2水平与血管钙化的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年1月至2015年10月在我院血透的60例年龄≥18岁，透析龄≥3年的MHD患者为研究组，该组患者均为碳酸盐透析，每周透析3次，每次4 h，实验前停用影响钙磷代谢药物1个月，无明显感染、肝功能损害、骨折、营养不良、恶性肿瘤。另选取60例年龄及性别与研究组差异无统计学意义的健康人为对照组。

1.2 方法

1.2.1 实验室检查 抽取患者空腹静脉血，用日立HITACHI7060型自动生化分析仪检测血清钙(Ca)、血清磷(P)；用放射免疫法测定全段甲状旁腺激素(iPTH)；用美国伯乐680全自动酶标仪，采用ELISA法测定血清维生素K2浓度，每份标本测定2次后取平均值。

1.2.2 血管钙化检测及评分测定 使用飞利浦双板DR X光机对患者进行骨盆正位片、双手正位片X线检查，评价髂动脉、股动脉、桡动脉、手指动脉钙化情况。X线片血管钙化评分标准[2]。两条线将骨盆X线平片分成4部分，水平线位于股骨头切面，垂直线位于脊柱位置；双手正位片共分为4部分，先以双手各作为一部分，再以掌骨上方做水平线进行分隔。共计8个部位，计数每个部位的钙化，有计为1，无计为0，最终钙化评分为0～8分。

1.3 统计学方法 应用SPSS19.0统计软件进行数据统计分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组比较采用t检验。血清维生素K2与各项指标分析采用Spearman相关分析。采用多项Logistic回归分析建立血管钙化的回归方程。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 一般情况 60例患者中男性31例，女性29例，年龄(55.1±11.5)岁。原发病为慢性肾炎29例、梗阻性肾病10例、糖尿病肾病8例、高血压肾损害6例、多囊肾5例、ANCA相关性肾损害1例、痛风性肾病1例。

2.2 血管钙化特点 60例患者中34例(占56.67%)存在不同程度及不同部位的血管钙化。34例患者中出现髂动脉钙化19例，股动脉钙化20例，桡动脉钙化28例，手动脉钙化7例。

2.3 血维生素K2与血管钙化及各项指标分析 对照组血清维生素K2水平明显高于MHD患者[(4.17±1.04)nmol/L vs(2.46±0.93)nmol/L，P＜0.01，t= 5.652]。血管钙化评分≥4分的患者血清维生素K2水平明显低于评分＜4分患者[(1.99±0.77)nmol/L vs (2.56±0.93)nmol/L，P＜0.05，t=1.837]。采用Spearman相关分析显示，血清维生素K2水平度与血管钙化积分呈负相关(γ=-0.276，P＜0.05)，与钙、磷、钙磷乘积、iPTH无相关性(P＞0.05)。

2.4 血管钙化影响因素的多元Logistic回归分析 以血管钙化积分为因变量，年龄、糖尿病、血钙、血磷、血清维生素K2为自变量，采用多项Logistic回归分析结果显示，除了年龄≥60岁、糖尿病、高血钙、高血磷公认的血管钙化危险因素外，维生素K2水平也是血管钙化的独立影响因素，见表1。

表1 MHD患者血管钙化影响因素的多元Logistic回归分析

3 讨 论

天然维生素K为脂溶性，包括维生素K1和维生素K2。维生素K2又名甲萘醌，由动物肠道细菌合成，肝内含量丰富。维生素K1主要在肝脏凝血因子活化中起重要作用，维生素K2则在血管壁的蛋白合成中起作用，其半衰期比维生素K1长，并且维生素K1可转化为维生素K2。

影响ERSD患者血管钙化的因素错综复杂，病因及发病机制不是很明确。最新观点认为血管钙化的机制是促进钙化因素超过了抑制钙化因素，并由细胞介导的一个主动调节过程。MGP(基质Gla蛋白)和GAS6(生长停滞特异性基因产物)等维生素K依赖蛋白，有抑制血管钙化的作用，其功能发挥有赖于维生素K依赖性羧化酶将其γ-谷氨酸羧化成谷氨酸残基后获得生物活性。

Busch等[3]发现MHD患者体内维生素K普遍不足，本研究结果也发现正常人血维生素K2水平明显高于MHD患者。其可能原因有：(1)维生素K是一些钙化抑制因子(如MGP和GAS6等)的依赖蛋白，在抑制血管钙化过程中导致体内维生素K相对不足。本研究发现MHD患者钙化程度越重，血清维生素K2越低，呈负相关(γ=-0.276，P＜0.05)。(2)MHD患者长期低磷和低钾饮食，这些食物中维生素K含量高，且维生素K易与蛋白结合，很难被血透清除，因此饮食控制导致MHD患者维生素K摄入不足[4]。(3)磷结合剂(如司维拉姆、碳酸镧、醋酸钙)的使用会加速血管钙化的发生[5]，可能原因为结合磷的同时也结合体内脂溶性维生素[6]。

维生素K2在血管钙化方面的作用在国内外研究中不断得到证实。国内陈雪英等[7]的大鼠实验发现，去卵巢+补充维生素K2组大鼠血管总钙含量明显低于去卵巢组，并且其血管组织切片未见明显未羧化MGP表达，结果提示补充维生素K2可能通过调节MGP羧化及基因表达抑制血管钙化。Westenfeld等[8]进行了53例MHD患者补充维生素K2研究。将53例患者随机分为三组，服用维生素K2剂量分别为45 mg/d、135 mg/d、360 mg/d，共6周。并另选取50名年龄差异无统计学意义的健康人为对照组。结果：在基线，实验组与对照组相比有4.5倍未羧化的MGP。补充维生素K2后三个组未羧化MGP水平的降低应答率分别为77%、93%、93%。这个研究证实，大多数MHD患者有功能性维生素K2缺乏，无活性的MGP水平可以通过日常补充维生素K2而降低。目前，国内外有关维生素K2研究的样本量太少，今后还需大量样本研究证实。本研究发现，除了年龄≥60岁、糖尿病、高血磷、高血钙等公认的血管钙化危险因素外，血维生素K2水平也是血管钙化的独立影响因素。

综上所述，维生素K2是近年来被逐渐认知的抑制血管钙化的重要因素。MHD患者普遍存在血管钙化和维生素K2缺乏，血维生素K2水平是血管钙化的独立影响因素。

[1]McCabe KM,Booth SL,Fu X，et al.Dietary vitamin K and therapeutic warfarin alter the susceptibility to vascular calcification in experimental chronic kidney disease[J].Kidney Int,2013,83(5):835-844.

[2]Adragao T,Pires A,Lucas C,et al.A simple vascular calcification score predicts cardiovascular risk in haemodialysis patients[J]. Nephrol Dial Transplant,2004,19(6):1480-1488.

[3]Busch M,Stein A,Stein G,et al.How to manage functional vitamin K deficiency in CKD[J].Am J Kidney Dis,2012,60(1):168.

[4]Cranenburg EC,Schurgers LJ,Uiterwijk HH,et al.Vitamin K intake and status are low in hemodialysis patients[J].Kidney Int,2012,82 (5):605-610.

[5]Block GA,Wheeler DC,Persky MS,et al.Effects of phosphate binders in moderate CKD[J].J Am Soc Nephrol,2012,23(8): 1407-1415.

[6]王泰娜.维生素K与慢性肾脏病患者的血管钙化[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2013,22(6):571-575.

[7]陈雪英,杨雅,游志刚,等.维生素K2对老年去卵巢大鼠血管钙化的影响[J].中国动脉硬化杂志,2012,20(3):197-202.

[8]Westenfeld R,Krueger T,Schlieper G,et al.Effect of vitamin K2supplementation on functional vitamin K deficiency in hemodialysis patients:a randomized trial[J].Am J Kidney Dis,2012.59(2):186-195.

Correlation study of Vitamin K2and vascular calcification in patients on maintenance hemodialysis.

LIU Qian, HUANG Xiang-yang,TAN He-chang.Department of Nephrology,Liuzhou Worker's Hospital,Liuzhou 545005,Guangxi, CHINA

ObjectiveTo study the relationship between vitamin K2and vascular calcification in patients on maintenance hemodialysis.MethodsThe clinical data of patients who received maintenance hemodialysis in the Fourth Affiliated Hospital of Guangxi Medical University from January 2014 to October 2015 and whose dialysis ages were longer than 3 years were collected.Sixty patients were screened according to the conditions above(the study group).They accepted quantitative measurement of vascular calcification on pelvis and both hands by X-ray and were divided into＜4 points group and≥4 points group based on the measurement.Sixty healthy subjects at similar age and with the same gender were selected as control group.Serum Vitamin K2,serum calcium(Ca),serum phosphorus(P)and intact parathyroid hormone(iPTH)were determined and analyzed by using t test,Spearman correlation analysis and lo-gistic regression analysis.ResultsThere were 34 cases of vascular calcification of different degree and different parts in study group,and the occurrence rate of calcification was 56.67%.Vitamin K2level of the study group was significantly lower than that of the control group[(2.46±0.93)nmol/L vs(4.17±1.04)nmol/L,t=5.652,P＜0.01].Vitamin K2level of≥4 points group was significantly lower than that of＜4 points group[(1.99±0.77)nmol/L vs(2.56±0.93)nmol/L,t= 1.837,P＜0.05].Spearman correlation showed that vitamin K2had a negative correlation with vascular calcification score and had no correlation with calcium,phosphorus,calcium-phosphorus product,ipTH(P＞0.05).Many items of logistic regression showed that vitamin K2was the independent factor affecting vascular calcification.ConclusionVascular calcification and the lack of vitamin K2are ubiquitous in MHD patients.Vitamin K2level is the independent factor affecting vascular calcification.

Vitamin K2;Maintemance hemodialysis;Vascular calcification;Correlation

R459.5

A

1003—6350（2016）10—1572—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.10.008

2015-11-11)

广西壮族自治区卫生厅自筹经费科研课题 (编号：Z2014673)；广西壮族自治区柳州市科学研究与技术开发计划课题 (编号：2014J030411)

黄向阳。E-mail：12750089@qq.com