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注意缺陷多动障碍儿童唾液与血浆皮质醇水平变化及临床意义

2016-03-02陈金兰王婷婷陈丽婷陈燕惠

福建医科大学学报 2016年6期
关键词:皮质醇唾液血浆

陈金兰, 陈 辉, 王婷婷, 陈丽婷, 陈燕惠

注意缺陷多动障碍儿童唾液与血浆皮质醇水平变化及临床意义

陈金兰1,2, 陈 辉2, 王婷婷2, 陈丽婷2, 陈燕惠1

目的 研究注意缺陷多动障碍(ADHD)儿童的唾液皮质醇及血浆皮质醇的分泌水平,探讨ADHD患儿下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的功能改变及临床意义。 方法 ADHD男性儿童143例,临床诊断和分型均符合DSM-Ⅳ ADHD的临床诊断和分型标准;对照组为年龄匹配的健康男童47名。于7:50空腹状态下收集应激前唾液标本,8:00静脉采血作为应激源,采血后再次收集唾液标本。分别采用全自动微粒子化学发光法检测血浆皮质醇,酶联免疫吸附法检测唾液皮质醇。所有儿童均采集到血液标本;唾液标本采集情况:ADHD组应激前23例,应激后18例;对照组应激前16例,应激后14例。 结果 (1)血浆皮质醇:ADHD组为(236.72±106.76)nmol/L(71.31~707.41 nmol/L),对照组为(351.84±133.26)nmol/L(141.31~530.67 nmol/L),2组比较差别有统计学意义(P<0.01)。(2)唾液皮质醇:应激前ADHD组为(341.43±39.63)ng/mL(270.32~401.72 ng/mL),对照组为(362.24±39.32)ng/mL(284.12~420.42 ng/mL);应激后ADHD组为(364.82±30.10)ng/mL(324.0~415.0 ng/mL),低于对照组(394.99±31.30)ng/mL(347.67~431.35 ng/mL);而对照组应激后较应激前升高。 结论 ADHD儿童存在HPA轴调节功能障碍,表现为应激后皮质醇低反应性;通过检测患儿的血浆基础皮质醇来反映其HPA轴的功能是一种较为便捷、实用的方法。

注意力缺陷障碍伴多动; 氢化可的松; 血浆; 唾液; 儿童

注意缺陷多动障碍(attention deficithyperactivity disorder,ADHD)是一种发生于儿童期的神经精神疾病,主要表现为与年龄不相称的注意力易分散、注意广度缩小、不分场合过多活动、情绪冲动,并伴有认知障碍和学习困难。据报道,8%~12%的儿童患有ADHD,大多数患儿症状可持续至青春期,部分可持续终生,对学业、职业和社会生活等方面产生广泛而消极的影响[1]。近年来,随着神经心理内分泌网络系统的提出,下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴因参与中枢神经递质调节机制而受到广泛关注[2]。越来越多的研究发现,ADHD患儿对应激呈现皮质醇低反应性,且与ADHD的行为表现密切相关[3-4]。研究显示,唾液皮质醇与血浆皮质醇水平有较好的一致性,可用于代表HPA轴的活性[5]。本研究拟通过研究ADHD儿童血浆和唾液中皮质醇的分泌水平,探讨ADHD患儿HPA轴功能的改变及临床意义,现报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象 收集2012年10月-2014年10月首次就诊于儿童神经发育行为专科门诊的ADHD患儿143例,为排除民族、性别因素引起的偏差,患儿均为汉族男性,年龄(9.04±2.16)岁(6~14岁),病程6月~5年,智商(95.21±12.96)分(72~125分)。143例中,注意缺陷为主型(ADHD-predominantly inattention type,ADHD-I)44例,多动-冲动为主型(ADHD-predominantly hyperactive impulsive type,ADHD-HI)35例,混合型(ADHD-combined type,ADHD-C)64例。患儿均符合《美国精神障碍诊断与统计手册》第四版(DSM-Ⅳ)ADHD的临床诊断和分型标准[6],并由2名具有主治医师以上职称的专科医师共同诊断。入选病例均通过血常规、血生化、头颅CT/MRI、脑电图、瑞文测试、学习能力测验、Conners量表等检测,排除儿童精神分裂症、情感障碍、品行障碍、对立违抗障碍、孤独症、精神发育迟滞及其他器质性疾病等共患病。

选择同期行健康体检的汉族男童47例为对照组,年龄(8.94±2.37)岁(6~14岁),智商(100.81±11.25)分(82~135分)。体质量指数(body mass index,BMI)匹配,排除躯体疾病、神经系统疾病、遗传性疾病及精神病史。纳入研究的儿童的父母均知情同意,本研究得到福建医科大学附属协和医院医学伦理委员会的批准。

1.2 方法

1.2.1 标本收集 患儿空腹,于7:50在安静诊室收集唾液[7]。将清洁棉球含于舌下约2 min,待唾液将棉球完全浸润后把棉球放入带盖的离心管,注意避免棉球污染。于8:00抽取空腹静脉血5 mL置于EDTA管中,采血后再次收集唾液标本。分别将收集的唾液、血液标本于3 000 r/min离心10 min,取上清液或血浆于-80 ℃存放,待行皮质醇测定。共采集到ADHD组血液及应激前后唾液皮质醇标本分别为143,23,18例;对照组血液及应激前后唾液皮质醇标本分别为47,16,14例。

1.2.2 血浆皮质醇检测 采用美国贝克曼全自动微粒子化学发光免疫分析法,试剂盒系贝克曼公司原装进口配套产品,均按说明书进行操作。

1.2.3 唾液皮质醇检测 采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(美国Rapidbio公司),酶标仪(352型,芬兰Labsystems Multiskan MS公司),洗板机(AC8,芬兰Thermo Labsystems公司)。标本处理和检测严格按照说明书进行。检测步骤:准备试剂、样品和标准品→加入准备好的样品和标准品,37 ℃反应30 min→洗板4次,加入酶标试剂,37 ℃反应30 min→洗板4次,加入显色液A、B,37 ℃显色15 min→加入终止液→15 min内读OD值→计算。

2 结 果

2.1 基础血浆皮质醇水平比较 ADHD组儿童血浆基础皮质醇水平为(236.72±106.76)nmol/L(71.31~707.41 nmol/L),明显低于对照组(351.84±133.26)nmol/L(141.31~530.67 nmol/L)(t=5.01,P<0.01)。

2.2 唾液皮质醇水平比较 应激前唾液皮质醇水平,ADHD组与对照组比较差别无统计学意义(P>0.05);应激后唾液皮质醇水平,ADHD组较对照组低,2组差别有统计学意义(P<0.05)。对照组应激后唾液皮质醇水平较应激前明显升高(P<0.05),具体见表1。

表1 应激前后对照组与ADHD组儿童唾液皮质醇水平比较

ADHD:注意缺陷多动障碍. 与对照组比较,☆:P<0.05;与应激前比较,△:P<0.05.

3 讨 论

糖皮质激素是由肾上腺皮质束状带细胞分泌的重要类固醇激素,主要表现为皮质醇在血中循环,并通过唾液和尿液排泄。正常机体血浆皮质醇分泌具有昼夜节律性,呈“V”字分泌,在生理条件下,早晨醒来后,约在6:00~8:00迅速达到峰值,8:00~12:00呈下降趋势,下午则转变为一个缓慢的下降过程,午夜达到最低谷[8-9]。近年来,皮质醇被认为是认知状态下一个客观的变化指标,引起人们的广泛关注[10-11]。

HPA轴作为最重要的内分泌轴,参与应激、适应、学习记忆、注意、精神情绪等行为活动。皮质醇的合成与分泌受HPA轴负反馈机制及盐皮质激素受体及糖皮质激素受体双重调节,其他激素如促肾上腺皮质激素释放激素和促肾上腺皮质激素同样调节皮质醇水平。在应激状态下,HPA轴和激素反应交互作用[2,12]。本课题组前期研究显示,ADHD组血浆促肾上腺皮质激素水平与对照组比较差别无统计学意义,而血浆皮质醇水平较对照组明显低下,提示ADHD儿童存在HPA轴调节紊乱[13]。Hong等以认知测试为应激、基础皮质醇分泌水平为衡量标准进行研究,结果显示,在随后的注意力测试中,应激后唾液皮质醇显著降低组比显著升高组表现出更多的错误,提示低皮质醇反应与ADHD儿童的冲动行为存在关联[4]。Pesonen等的研究显示,男女两性ADHD-I型儿童在应激状态下都显示出HPA轴的低反应性,存在同质性差异[14]。

在生理情况下,应激后HPA轴反应表现为血循环中的皮质醇浓度开始升高[15]。Marin等研究提示,针刺采血作为侵入性检测手段,是一种强烈的心理应激[16]。本研究以静脉采血为应激源,采用酶联免疫吸附法分别检测应激前与应激后ADHD组及对照组的唾液皮质醇水平,结果显示,应激前2组儿童唾液皮质醇水平差别无统计学意义(P>0.05),应激后对照组唾液皮质醇水平较应激前显著升高(P<0.05),而ADHD组儿童唾液皮质醇水平无明显变化,2组间比较,差别具有统计学意义(P<0.05)。同时,ADHD组儿童血浆基础皮质醇水平亦较对照组显著降低,提示ADHD儿童存在HPA轴功能失调,主要表现为应激状态下皮质醇反应低下。

不同亚型的ADHD儿童HPA轴的反应性也不一样。Maldonado等以Trier社会压力测试为应激源,以33例ADHD、33例对照组为研究对象,其中ADHD-I亚组10例,ADHD-HI亚组9例,ADHD-C亚组14例,发现应激30 min后,ADHD-HI亚组儿童的唾液皮质醇水平降低最为显著[17]。Kaneko等的研究显示,高达56.7%的ADHD患者皮质醇昼夜分泌节律异常,表现为凌晨时皮质醇水平较高,早晨8:00反而更低,以ADHD-HI亚型更为明显[18]。本课题组前期研究也显示,ADHD组血浆皮质醇水平较对照组明显降低,ADHD-HI组下降程度较ADHD-I组及ADHD-C组更为显著[13]。

目前检测皮质醇水平的方法有多种,包括血清游离皮质醇、血清总皮质醇、尿游离皮质醇、唾液皮质醇等。不少研究显示,唾液皮质醇和血液中游离皮质醇浓度具有良好相关性,能很好反映血中具有生物活性游离的皮质醇水平,可以用于代表HPA轴的活性[5, 19]。检查唾液皮质醇作为非侵入性、无痛苦的方法,避免了采血时可能产生的应激状态,倍受青睐,特别对儿童来说似乎尤为适合。但在实际操作中,儿童唾液皮质醇标本采集困难,尤其是年龄较小的儿童,不能配合标本的采集或唾液分泌过少,同时难以配合行为学的应激方式;另一方面,为采集到应激后唾液标本,常常需要花费更多的时间,致使许多儿童缺乏耐心,尤其是ADHD儿童更缺乏耐心、易冲动、急躁、违拗、依从性差,不能配合唾液的收集。在本研究中,对照组47例中仅有16例成功采集应激前唾液皮质醇标本、14例成功采集应激后唾液标本,而143例ADHD儿童中,仅23例成功采集应激前唾液皮质醇标本、18例成功采集应激后唾液标本。提示相对于对照组,ADHD组采集唾液标本更为困难。虽然本研究显示,与血浆基础皮质醇水平检测结果类似,应激后ADHD组儿童唾液皮质醇水平较对照组儿童明显低下,但由于此次研究样本量较小,将来可扩大样本量,并分取男女两性儿童数量,以进一步研究验证结果。鉴于留取唾液标本较难,静脉采血检测血浆基础皮质醇不失为反映应激状态下儿童HPA轴功能反应性较便捷、客观的方法。血浆基础皮质醇检测或可作为伴有皮质醇低反应性的ADHD患者生物学标志之一。

[1] Faraone S V, Perlis R H, Doyle A E,etal. Molecular genetics of attention-deficit/hyperactivity disorder[J].BiolPsychiatry, 2005,57(11):1313-1323.

[2] Fortier Mè, Sengupta S M, Grizenko N,etal. Genetic evidence for the association of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis with ADHD and methylphenidate treatment response [J].NeuromolecularMed,2013,15(1):122-132.

[3] Pinto R, Rijsdijk F, Ouellet-Morin I,etal.The aetiological association between the dynamics of cortisol productivity and ADHD[J].JNeuralTransm(Vienna),2016-04-22.[Epub ahead of print].

[4] Hong H J,Shin D W,Lee E H,etal.Hypothalamic-pituitary-adrenal reactivity in boys with attention deficit hyperactivity disorder[J].YonseiMedJ, 2003,44(4):608-614.

[5] Wong V,Yan T,Donald A,etal.Saliva and bloodspot cortisol novel sampling methods to assess hydrocortisone replacement therapy in hypoadrenal patients[J].ClinEndocrinol(Oxf),2004,61(1):131-137.

[6] American Psychiatric Association.DiagnosticandStatisticalManualofMentalDisorders(DSM-5)[M].5th ed.Washington DC: American Psychiatric Association,2013:78-85.

[7] Li R Q,Lin S,Zhao S F,etal.Exam stress and salivary immunological function[J].ChinJClinRehabil,2005,9(28):251-253.

[8] 干 伟,张 林,安振梅.唾液皮质醇的研究进展[J].中国实验诊断学,2009,13(9):1304-1306.

[9] Weitzman E D,Fukushima D,Noqeire C,etal.Twenty-four hour pattern of the episodic secretion of cortisol in normal subjects[J].JClinEndocrinolMetab,1991,33(1):14-22.

[10] Shields G S, Bonner J C, Moons W G.Does cortisol influence core executive functions? A meta-analysis of acute cortisol administration effects on working memory, inhibition, and set-shifting [J].Psychoneuroendocrinology,2015,58(8):91-103.

[11] Wingenfeld K,Wolf O T.HPA axis alterations in mental disorders: impact on memory and its relevance for therapeutic interventions[J].CNSNeurosciTher,2011,17(6):714-722.

[12] Herman J P, Mc Klveen J M, Ghosal S,etal.Regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenocortical stress response[J].ComprPhysiol,2016,6(2):603-621.

[13] 陈燕惠,陈 辉,刘艳艳, 等.注意力缺陷多动障碍儿童下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能研究[J].中国当代儿科杂志,2009,11(12):992-995.

[14] Pesonen A K, Kajantie E, Jones A,etal.Symptoms of attention deficit hyperactivity disorder in children are associated with cortisol responses to psychosocial stress but not with daily cortisol levels[J].JPsychiatrRes, 2011,45(11):1471-1476.

[15] Qi M,Gao H,Guan L,etal.Subjective stress, salivary cortisol,andelectrophysiological responses to psychological stress[J].FrontPsychol,2016,7:229.

[16] Marin J,Martin T M,Blackwell E,etal.Differentiating the impact of episodic and chronic stressors on hypothalamic-pituitary-adrenocortical axis regulation in young women[J].HealthPsychol,2007,26(4):447-455.

[17] Maldonado E F,Trianes M V,Cortes A,etal.Salivary cortisol response to a psychosocial stressor on children diagnosed with attention-deficit/ hyperactivity disorder: Differences between diagnostic subtypes[J].SpanJP,2009,2(2):707-714.

[18] Kaneko M,Hoshino Y,Hashimoto S,etal.Hypothalamic-pituitary-adrenal axis function in chidren with attention-deficit hyperactivity disorder[J].JAutismDevDisord,1993,23(1):59-65.

[19] Roland R,Bjorntorp P.Alterations in the hypothalamic pituitary adrenal lax is in metabolic syndrome[J].Endorinologist,2001,11(6):491-497.

(编辑:何佳凤)

The Clinical Significance of Cortisol Levels in Children with Attention Deficit Hyperactivity Disorder

CHEN Jinlan1,2, CHEN Hui2, WANG Tingting2, CHEN Liting2, CHEN Yanhui1

1.Department of Pediatrics, Fujian Medical University Union Hospital, Fuzhou 350001, China 2.Department of Pediatrics, The Affiliated Fuzhou First Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou 350001, China;

Objective To explore the function of hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis and its clinical significance in children with attention hyperactivity disorder (ADHD) by evaluating the level of salivary cortisol and plasma cortisol. Methods 143 male children with ADHD, 6 to 14 years old, were included in this study. The diagnosis of ADHD and its three subtypes were made based on the criteria cited by the handbook for the diagnosis and treatment of ADHD by American Psychiatry Association (DSM-Ⅳ). Meanwhile, 47 healthy male children, 6 to 14 years old, were in the control group. We collected the fasting saliva at 7:50 am. Then the venipuncture was adopted as a stressor. Venous blood 5 mL were collected at 8:00 am and the fasting saliva were collected again after venipuncture. The levels of plasma cortisol were evaluated by automatic particle enzyme immunoassay, and the levels of salivary cortisol were evaluated by enzyme-linked immunosorbent assay. From all children in the two groups the blood samples were collected. There were 23 cases with saliva samples before stress, 18 cases after stress in ADHD group. There were 16 cases with saliva samples before stress, 14 cases after stress in control group. Rusults The level of basic plasma cortisol in ADHD group [(236.72±106.76) nmol/L] was significantly lower than that in the control group [(351.84±133.26) nmol/L](P<0.01). The level of salivary cortisol in ADHD group before stress [(341.43±39.63)ng/mL] compared to the control group [(362.24±39.32)ng/mL] showed no significant difference(P>0.05). The level of salivary cortisol in control group after stress was significantly higher than it was before stress(P<0.05). But the level of salivary cortisol in ADHD group after stress [(364.82±30.10)ng/mL] was significantly lower than that in the control group after stress [(394.99±31.30)ng/mL](P<0.05). Conclusions Children with ADHD exhibits dysfunction in HPA, which may showhyporesponsivenessin cortisol level after stress. It is often difficult to collect saliva sample than to collect blood sample in children. The plasma basal cortisol detection is recommended as aconvenient and practical method to reflect HPA axis function.

attention deficit disorder with hyperactivity; hydrocortisone; plasma; saliva; child

2016-03-06

国家自然科学基金面上项目(81371262)

福建医科大学1. 附属协和医院 儿科,福州 350001; 2. 附属福州市第一医院 儿科,福州 350001

陈金兰(1984-),女,住院医师,医学硕士

陈燕惠. Email:yanhui_0655@126.com

R742.89; R749.94

A

1672-4194(2016)06-0403-04

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