CK、Tubulin-β及PCNA与鼻咽癌放疗后复发与转移的相关性研究

刘　洋　刘　硕　孙建军

作者单位:100048 中国人民解放军海军总医院

CK、Tubulin-β及PCNA与鼻咽癌放疗后复发与转移的相关性研究

刘洋刘硕孙建军

作者单位:100048 中国人民解放军海军总医院

【摘要】目的探析CK、Tubulin-β及PCNA与鼻咽癌放疗后复发与转移的相关性。方法采用裸鼠体内移植瘤法。根据治疗方式的不同将裸鼠分成放射组与未放射组两组，分别用10只裸鼠接种每组S1、F1细胞。分析鼻咽癌细胞F1、S1放疗前、后的细胞形态、体内增殖及转移能力。结果鼻咽癌及放疗后复发组织中CK、Tubulin-β及PCNA水平与临床分期、颈部淋巴结转移、年龄及性别无关。放疗后复发组织中CK与Tubulin-β及PCNA表达则表现为正相关性(P<0.05)。两组均未发生肺转移，比较放疗后两组F1、S1裸鼠移植瘤瘤体质量，放射组均较未放射组低，且有统计学差异(P<0.05)。放疗后PCNA、CK的表达水平，S1裸鼠移植瘤明显比F1高(P<0.05)。结论鼻咽癌放疗后的复发过程中CK、Tubulin-β的水平与细胞增殖密切相关，但不是鼻咽癌放疗后复发的独立预测指标。

【关键词】鼻咽癌；细胞角蛋白；微管蛋白；增殖细胞核抗原

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:056～058)

鼻咽癌起源于人体鼻咽部的鳞状上皮，鼻咽癌多发于我国南方，病发后临床主要选择放射治疗，但是放疗后生存率亦低，多数患者死于远处转移或局部复发[1-2]。因其早期症状较轻，且部位隐匿，漏诊误诊率高。近几年来，其发病率不断呈上升趋势，严重威胁人类生命安全。细胞骨架是肿瘤细胞参与多种细胞反应最初的靶结构，鼻咽癌放射敏感异质性机制除可能与不同亚克隆细胞结构有关[3-4]。本组研究通过实验检测鼻咽癌及放射治疗后复发癌组织中细胞角蛋白(简称CK)、微管蛋白(简称Tubulin-β)及增殖细胞核抗原(简称PCNA)关系，旨在探析鼻咽癌放疗后转移和复发的可能机制。

1材料与方法

1.1　临床资料

选取2010年6月至2013年2月在中国人民解放军海军总医院接受治疗的54例鼻咽癌住院患者。其中男性34例，女性20例，年龄29～79岁，平均年龄46岁。全部病例均为首次诊断，相关病例资料都较为完整，且就诊前均无抗癌治疗史，其中50例在放疗后复发的鼻咽癌患者仅有过放射治疗史。

1.2　方法

裸鼠体内移植瘤法。根据治疗方式的不同分成放射组与未放射组两组，分别用10只裸鼠接种每组S1、F1细胞。分析鼻咽癌细胞F1、S1放疗前、后的细胞形态、体内增殖及转移能力。分别测量两组瘤体体积变化，接种后25 d后将未放射组裸鼠处死，放射组则先给予单次照射、回笼饲养，再于接种后46 d处死裸鼠。对处死后的裸鼠进行全面解剖，然后按照顺序分别将淋巴结(肉眼可见)、肺脏以及皮下移植瘤取出，将瘤体剥离，记录瘤体重量，对肿瘤转移及生长情况进行详细观察。

1.3　统计学方法

2结果

54例鼻咽癌组织中细胞角蛋白(CK)、微管蛋白(Tubulin-β)及增殖细胞核抗原(PCNA)阳性表达率分别为63.0%、74.1%、79.6%。放疗后复发的鼻咽癌组织中CK、Tubulin-β及PCNA的阳性表达率分别是72.0%，82.0%、98.0%。放疗后复发的鼻咽癌组织中PCNA阳性表达率明显比鼻咽癌组高(P<0.05)，CK、Tubulin-β则无显著差异(P>0.05)，见表1。

表1　鼻咽癌组与放疗后复发的鼻咽癌组织中CK、Tubulin-β

S1、F1裸鼠移植瘤中细胞角蛋白(CK)、微管蛋白(Tubulin-β)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达，细胞角蛋白、微管蛋白表达于细胞膜或细胞质，增殖细胞核抗原则表达于细胞核。CK、Tubulin-β表达水平放疗后S1与F1裸鼠淋巴结转移瘤比较，S1均明显高于F1，且差异具有统计学意义(P<0.05)。比较放射治疗后裸鼠移植瘤S1与F1中CK、PCNA的表达情况，S1均显著高于F1，且差异具有统计学意义(P<0.05)。未放射组S1与F1中CK、Tubulin-β及PCNA表达水平比较无显著差异(P>0.05)(表2)。

表2　放射前后S1、F1中CK、Tubulin-β及PCNA的

注：FIN表示未放射组F1裸鼠淋巴结转移瘤；SLN表示未放射组S1裸鼠淋巴结转移瘤。

3　讨论

鼻咽癌是1种头颈部恶性肿瘤，我国华南地区较为多见。鼻咽癌患者放疗后出现远处转移或复发的几率较高，主要是鼻咽癌具有放射敏感性[5]。S1细胞在显微镜透视下有大量微管和微丝、少量而嵴小的线粒体呈现，考虑S1细胞的低放射敏感度以及慢增殖可能是由上述原因所致。本研究通过对S1、F1细胞中细胞角蛋白(简称CK)、微管蛋白(简称Tubulin-β)及增殖细胞核抗原(简称PCNA)水平的检测，研究放射放疗后鼻咽癌患者复发的影响因素，给提高治疗鼻咽癌患者的疗效提供一定的理论依据。

郭立兵等[6]杨芝萍等[7]文献报道，CK、Tubulin-β的表达水平与鼻咽癌患者颈部的淋巴结转移、临床分期、年龄及性别等因素的关系不明显。本研究结果提示CK、Tubulin-β作为细胞反应的靶结构，参与了辐射致使的细胞变化的活动，但是还无法作为鼻咽癌患者放射敏感度以及转移的一项独立判断指标。

熊晖等[8]彭涛等[9]文献报道，细胞一旦接触射线，CK与Tubulin-β表达会异常，同时细胞表型也会因此而发生变化，其如转移这样的恶性特征会增强，并会改变细胞表型使其恶性特征如转移增强，放射治疗后S1较高的转移率与CK与Tubulin-β的高表达可能存在一定的联系。宦佳乐等[10]文献报道中则指出，放射治疗后转移率较高可能与细胞角蛋白和微管蛋白高表达有着一定关系。本组研究结果，比较CK、Tubulin-β在放射治疗后S1与F1裸鼠淋巴结转移瘤，S1均明显高于F1(P<0.05)。对裸鼠移植瘤放射治疗后S1与F1中CK、PCNA表达的比较发现，S1均显著高于F1，且差异性明显，因而具有统计学意义标准(P<0.05)。与上述文献报道一致。此外，本研究还发现鼻咽癌组放疗后，其癌细胞核异型性没有复发组明显，说明鼻咽癌存在放射抗性的患者经放疗后增殖能力依然良好，鼻咽癌患者放疗后转移及复发可能基于放疗后活跃的细胞增殖活动。

综上所述，鼻咽癌放疗后的复发过程中CK、Tubulin-β与细胞增殖密切相关，但不是鼻咽癌放疗后复发的独立预测指标。

参考文献

[1]Ma Liqin hole Xiangquan.Jin Sheng Hong,et al.Effect of different age groups and long-term effect of radiotherapy for nasopharyngeal carcinoma factors 〔J〕.Journal of Clinical Oncology,2007,18 (8):595-597.

[2]袁健,孙宁,王丽京,等.鼻咽癌放射敏感性异质性的形态学差异观察〔J〕.实用肿瘤杂志,2007,22(4):304-307.

[3]潘建基,张瑜,林少俊,等.1706例鼻咽癌放疗远期疗效分析〔J〕.中华放射肿瘤学杂志,2008,17(4):247-251.

[4]龙镇,谢民强,张涛,等.改性载顺铂磁性纳米药物联合放疗靶向治疗鼻咽癌裸鼠移植瘤的研究〔J〕.南方医科大学学报,2009,9(4):445-447.

[5]Mo Yuzhen.Zhu Xiaodong.60Co segmentation irradiation were observed on growth of human nasopharyngeal carcinoma cell 〔J〕.Chinese Journal of oncology,2009,16 (24):90-92.

[6]郭立兵,石卫民,宋维舒,等.老年鼻咽癌组织增殖细胞核抗原、血管内皮细胞表达与PET/CT显像FDG摄取的相关性〔J〕.中国老年学杂志,2012,18(7):32-34.

[7]杨芝萍,杜月光,谢永红,等.人重组血管内皮抑素联合放疗对鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤抑制及其机制的探讨〔J〕.中华肿瘤防治杂志,2012,19(4):662-665.

[8]熊晖,孙宁,姚运红,等.CK、Tubulin-β和PCNA在鼻咽癌放疗后复发组织中的表达及意义〔J〕.肿瘤防治研究,2012,39(2):125-126.

[9]彭涛,袁玉林,张岑,等.辐射致鼻咽癌细胞株cdk1和survivin表达与细胞增殖时相转换的关系〔J〕.解剖学杂志,2014,37(1):95-97.

[10]宦佳乐,邢鹏飞,徐莹莹,等.颈淋巴结阴性鼻咽癌放疗范围的选择:一个基于荟萃分析的结果〔J〕.中华放射医学与防护杂志,2014,34(4):778-781.

(编辑：吴小红)

(编辑：吴小红)

Correlation of CK,Tubulin-beta,PCNA and Recurrence and Transfer of Nasopharyngeal Carcinoma Patients after Radiotherapy

LIUYang,LIUShuo,SUNJianjun.NavyGeneralHospitalofPLA,Beijing,100048

【Abstract】ObjectiveTo study the correlation of CK,Tubulin-beta,proliferating cell nuclear antigen(PCNA) and recurrence and transfer of nasopharyngeal carcinoma patients after radiotherapy.MethodsThe method of implanted tumor in nude mice was adopted in this experiment,and were divided into radiation group and non-radiation group.10 mice were vaccinate against F1,S1 cells of each group.The cellular morphology,proliferation in vivo and transfer ability of nasopharyngeal carcinoma cells F1,S1 before and after radiotherapy were analyzed.ResultsThe levels of CK,Tubulin-beta and PCNA in nasopharyngeal carcinoma and the recurrence tissue after radiotherapy had no correlation with clinical stage,age and sex,cervical lymph node metastasis.The CK had positive correlation with the expressions of Tubulin-beta and PCNA in the recurrence tissue (P<0.05).The 2 groups had no lung metastasis after radiotherapy,the transplanted tumor of body mass of F1,S1 in nude mice were compared,the mass in the radiation group were all lighter than those of non-irradiated group,and the differences had statistical significance (P<0.05 standard).The levels of PCNA,CK in S1 xenografts in nude mice were higher than those in F1 transplantation tumor in nude mice after radiotherapy (P<0.05).ConclusionThe levels of CK,Tubulin-beta during the recurrence of nasopharyngeal carcinoma after radiotherapy has close correlation with cell proliferation,but they are not the independent predictor of recurrence after radiotherapy of nasopharyngeal carcinoma.

【Key words】Nasopharyngeal carcinoma;Cytokeratin;Tubulin;Proliferating cell nuclear antigen(PCNA)

中图分类号：R739.63

文献标识码：A

文章编号：1001-5930(2016)01-0056-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.01.017

通讯作者：孙建军

收稿日期(2015-04-15修回日期 2015-05-04) (2015-01-09修回日期 2015-04-29)