大鼠高脂模型的建立

文│黄德强（重庆市铜梁区平滩畜牧兽医站）

大鼠高脂模型的建立

文│黄德强（重庆市铜梁区平滩畜牧兽医站）

血脂是血液中脂质的总称，包括甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、磷脂、胆固醇酯等。高脂血症是指血液中胆固醇、甘油三酯、低密脂蛋白（LDL）过高和血清高密脂蛋白（HDL）过低的一种全身脂代谢异常，它是危害人类健康的常见疾病。近年来，随着人们生活水平的不断提高，高血脂已成为危害人类身体的一大隐形杀手，因此研究高脂血症的发病原因，探讨高脂血症的预防和治疗，寻找高效低毒的降血脂新药，已成为目前国内外学者研究的热点。

应用于降血脂和抗动脉粥样硬化研究的动物模型主要有鼠类、鸟类、兔、猪以及非人灵长类动物，其中在降血脂方面尤其以鼠类模型最为常见。SD大鼠具有对疾病的抵抗力强，尤其对呼吸道疾病的抵抗力很强，产仔多，生产发育较快等优点。因此，本文选用雄性SD大鼠，通过饲喂一定时间的高脂饲料以建立高血脂的动物模型，通过测定体重、相关血液生化指标和体脂量及肝脏系数等判定高脂模型是否成功建立，为下一步降血脂药物的研究提供高血脂模型及科学的数据指导。

一、材料与方法

1.材料。

（1）实验动物。20只雄性健康的SD大鼠，体重200～220克，购于上海斯莱克实验动物有限公司长沙分公司。常规饲养，自由采食。观察一周，临床表现健康。

（2）试剂。总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）检测试剂盒，肝酯酶（HL）及脂蛋白脂肪酶（LPL）测定试剂盒，购于沈阳伟嘉牧业技术有限公司。其他试剂均为分析纯。

（3）饲料配方。基础日粮：14%蛋白质，10%脂肪，碳水化合物76%；高脂饲料：从上海斯莱克公司购买的高脂饲料，其中各组分含量为普通繁殖鼠料70%、猪油14.5%、胆固醇1%、胆盐0.3%、酪蛋白7.2%、预混料1.4%、麦芽糊精5.6%。

（4）仪器与设备。超净工作台（SW-CJ2FD型，苏州净化设备公司），恒温恒湿培养箱（LRH-250-S，广东省医疗器械厂），全自动立式电热压力蒸汽灭菌器（YXQ-LS-50S Ⅱ，上海博迅公司医疗设备厂），Ⅱ型台式高速离心机，全自动生化分析仪，移液器，电子天平，培养皿。

2.方法。

（1）分组。20只雄性SD大鼠经过适应性喂养1周以后，随机平均分为2组。

（2）处理。正常对照组（Basal dietary，BD组）：投喂普通颗粒饲料，自由采食、自由饮水，连续4周；高脂组（High cholesterol dietary，HCD组）：饲喂高脂饲料，自由采食、自由饮水，连续4周。

（3）测定指标。实验前及实验期间每天称重，并测定每日摄食量。称重在每天上午喂料前进行；采食量根据每天的喂料量与剩余料量相减而得。

饲喂高脂饲料前一天，SD大鼠尾静脉采血，经3000转/分钟离心5分钟，分离血清，血样存于-80℃备用。而后每隔7天进行一次采血。血样经过处理后，各项指标均严格按照试剂盒说明书进行操作，并在全自动生化分析仪上测定TG、TC、HDL、LDL浓度。

实验结束前禁食一晚，称大鼠体重，采血后，以水合氯醛麻醉宰杀，迅速分离肝组织，称重，计算肝重系数，肝重系数=肝重（g）/体重（g）×100%。剥离附睾、腹膜后和肠系膜沉积脂肪，称重，测定内脏脂肪量，计算各部位体脂率，体脂率=肝重（g）/体重（g）×100%。增重率（%）=（终试平均体重-始试平均体重）÷始试平均体重×100%。

二、结果

1.两小组体重统计结果。从每周统计的数据上分析，第一周开始高脂组体重增长速度明显快于普通组，在实验结束时，高脂组大鼠体重比正常对照组重约60克，增重率比正常对照组约高25%。经方差分析，高脂组体重增长值与正常组相比，有显著性差异（P＜0.05）。实验结果见表1。

表1 大白鼠的体重称定结果表

2.采食量统计结果。高脂组大鼠采食量逐渐高于正常对照组，在实验结束前，高脂组采食量比正常对照组约高18%，统计分析结果表明，高脂组大鼠采食量显著高于正常组（P＜0.05）。实验结果见表2。

表2 大白鼠的采食量

3.肝系数及各部位脂肪系数结果。高脂组大鼠附睾、肠系膜和腹膜后脂肪系数分别为正常对照组5.7倍、2.8倍、2.7倍，肝系数为正常对照组的1.4倍，差异极显著（P＜0.01）。眼观肝脏，可见高脂组肝脏肿大、黄土色，呈明显的脂肪肝病变。实验结果见表3。

表3 各部位脂肪系数和肝系数结果

4.血清生化学检测。高脂组血清TC、TG分别是正常组的1.7倍、1.7倍，差异显著（P＜0.01）。高脂组血清LDL-C是对照组的1.2倍，但高脂组和正常对照组HDL-C浓度差异不显著（P＞0.05）。实验结果见表4。

表4 大白鼠的血清生化指标

三、结论

本实验将20只SD雄性大鼠随机分为两组，正常组采用基础饲料饲喂，高脂组饲喂高脂饲料，自由采食自由饮水，连续饲喂4周；每天称体重，测定每日采食量，实验结束时及实验进行期间每周一次尾静脉采血，分离血清，采用试剂盒检测血清TC、TG、HDL-C、LDL-C浓度；实验结束时剖杀动物，测肠系膜、附睾、腹膜后脂肪含量，称肝重，计算脂肪系数及肝重系数。

结果表明，在实验过程中高脂组大鼠明显要比饲喂普通饲料的大鼠增重快，高脂组大鼠血清TG、TC显著高于正常组（P＜0.01）；高脂组大鼠体重、肠系膜、附睾、腹膜后脂肪系数及肝重系数均显著高于对照组（P＜0.05），眼观肝脏呈明显的脂肪肝病变。综上所述表明，通过给SD雄性大鼠饲喂4周高脂饲料，已成功建立大鼠饮食性高脂模型，该模型与人类肥胖症合并高脂血症脂肪肝极为相似，适用于高脂血症脂肪肝的临床药理研究。