湘乡市规模猪场人工授精关键技术

易检祥

湘乡市的生猪人工授精工作始于20世纪80年代中期，经过三十多年的发展，特别是近几年，由于设备的更新、养猪优惠政策的加大和人们观念的改变等因素，该项技术迅速得到普及推广。猪人工授精技术是养猪生产规模化、现代化的重要手段，不仅可以减少公猪的饲养头数，有利于优良种公猪跨年度、跨地域使用，获得大量优良后代，还能减少疾病传播。为此，笔者通过总结湘江市猪人工授精的一些关键技术，旨在为贯彻执行好国家农业部、财政部（农办财2014年60号）和湖南省湘牧渔发（2014年71号文件）关于“菜篮子”工程项目服务，更想为广大养猪场（户）提供参考。

一、猪人工授精必备设施

1. 实验室

面积15～20米2，通电、通水，有工作台等。

2. 假猪台

要求公猪爬跨舒服，易于清洗消毒，高低、宽窄能自由调节。

3. 显微镜

用于评定精子活率、密度、畸形率等。

4. 精子密度测定仪

要求1～2分钟可出检测结果，以减少对原精的影响。

5. 电子台称

用于称量精液质量（1克相当于1毫升），以测量精液体积。

6. 数显恒温水浴锅

用于加热精液稀释液、控制精液稀释液的温度和解冻冷冻精液。

7. 数显恒温精液保存箱

用于精液的保存，要求温度波动范围在±1℃。

8. 量筒或烧杯

容积1升、2升的各2个，用于准备稀释液、稀释精液以及将精液分装到输精瓶。

9. 保温瓶

用于采精，能保温隔热。

10. pH计或pH试纸

用于测量精液的pH值。

11. 温度计

需要2支校正好的温度计，分别用于测量精液和稀释液的温度。

12. 其他

采精杯、消毒外科用纱布、输精瓶（100毫升）、微量可调移液器及吸头、精子计数器、玻璃棒、一次性乳胶手套、一次性采精袋、蒸馏水、纸巾、浴巾（保温用）、市售成品稀释粉或一些配制精液稀释液所用的药品等。

二、精液采集前的准备工作

1. 实验室和采精人员准备

实验室墙面、地面和室内空气保持无灰尘，室温控制在22～25℃。采精人员要穿工作服，用70%酒精擦净工作台。

2. 精液稀释液准备

在采精前1小时将精液稀释粉放入定量的双蒸水（两次蒸馏得到的水）中混匀，充分溶解，置于37℃恒温水浴锅中预热备用。

3. 精液处理设备准备

用于精液处理的所有设备都应清洁、灭菌、干燥和保温。采精前保温瓶、采精杯等要放入37℃恒温箱中预热，还要准备好精液分装器、精液瓶、纱布等。

4. 仪器准备

包括电子天平、恒温载物台、显微镜、精子计数器、100～500微升移液器及其配套吸头、签字笔、记录本、载玻片和盖玻片等。

5. 种公猪的准备

剪去公猪包皮部的长毛，冲洗干净猪体后擦干。

三、猪的人工采精方法

生产中常采用手握采精法，具体操作方法是：采精人员一手带双层手套，用温热的生理盐水清洗种公猪腹部和包皮，待其爬跨假猪台并伸出阴茎时，脱去外层手套，用手紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头，顺其向前冲力将阴茎的“S”状弯曲拉直，握紧阴茎龟头防止其旋转。待公猪射精时，用集精杯收集精液于保温杯内的一次性采精袋中，最初射出的少量精清（5毫升左右）不接取。由于公猪的射精反应对压力比对温度更为敏感，只要采精人员掌握适当的压力，经过训练的公猪都可以采到精液。

四、精液的品质检查

1. 精液的外观检查

①颜色。正常的精液为乳白色或浅灰色，呈云雾状，精子密度越高，色泽越浓，其透明度越低。绿色或黄色的精液常混有脓液或尿液，浅红色或红褐色的精液常带有血液，这样的精液都应舍弃不用，并会同兽医寻找原因、及时治疗。

②气味。正常的精液略带腥味，如有异常气味，应废弃不用。

③pH值。正常的精液pH值为7.0～7.8，呈中性或弱碱性。

④采精量的测定。猪的射精量因品种、年龄、使用频率不同有较大的差异，一般一次射精量为200～500毫升。

2. 精液的显微检查

①精子活率检查。精子活率是指精液在37℃条件下呈直线运动的精子占全部精子数的百分率，一般要求在每次采精后、精液稀释后和输精前均应进行活率检查。精子活率一般采用0.1～1.0十级评分法进行评估，在37℃条件下检测，要求载玻片和盖玻片都要预热。鲜精活率在0.7以上才可进行稀释，保存24小时以上的精子活率达到0.6以上才可使用。

②精子密度检查。正常公猪的精子密度为2亿～3亿/毫升，有的可高达5亿/毫升。检测精子密度的方法主要有估测法、精子密度仪法和血细胞计数法等，目前生产上常用的是精子密度仪法。

③精子畸形率检查。取1滴原精液做抹片（也可用稀释后精液），自然干燥；用福尔马林磷酸盐固定液固定15～20分钟，再用Giemsa染液染色90分钟，水洗后自然风干。在显微镜下放大400～1000倍检查，要求镜检计数300个以上精子，记录观察到的畸形精子数和精子总数之比，即可得出畸形精子百分率。在检查精液时如发现精子畸形率超过15%且某一种畸形精子占优势，就需及时查找原因；如果没有任何一种畸形精子占优势，即使总畸形率达20%，也不会影响受胎率，但一般要求精子畸形率以不超过18%为宜。

3. 填写精液品质检查登记表

精液品质检查后应做好详细记录，包括公猪品种、耳号、采精时间、采精量、精子活率、精子密度和畸形率等。endprint

五、精液的稀释

1. 精液稀释液的配制

精液稀释液要求在使用前配制，这样才会有较稳定的酸碱度，并贴好标签和注明品名、配制时间、配制人等，然后放入4℃冰箱保存备用。稀释液根据保存时间的长短可分为短效、中效和长效稀释液。多数精液稀释液含有缓冲物质（柠檬酸钠等）和营养物质（糖类等），缓冲物质用于避免pH值的改变，营养物质可被精子吸收。

2. 精液稀释

稀释精液时，要求使用容器都必须经过严格消毒处理，并用少量同温稀释液冲洗1遍。具体要求如下：一是未经品质检查或检查不合格（活率<0.7）的精液不能稀释。二是精液采集后应尽快稀释，原精储存时间不宜超过30分钟。三是稀释时应于较暗处操作，严禁太阳光直射精液。四是精液与稀释液的温差不能超过1℃，以精液温度为标准来调节精液稀释液的温度。五是将稀释液沿杯（瓶）壁缓慢加入到精液中，然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌，使其混合均匀。高倍稀释前，应先进行低倍稀释（1∶1～2），稍待片刻后再将余下的稀释液沿容器壁缓慢加入，以防造成“稀释打击”。六是精液稀释的比例应根据原精液的品质、输精量、配种母猪的头数以及是否需要运输和储存而定。一般以每次输精量80～100毫升、含有效精子40亿个以上来确定稀释倍数。例如：某头公猪一次采精量是200毫升，活率为0.8，密度为2亿/毫升，含40亿个有效精子，则总精子数为200毫升×2亿/毫升=400亿，稀释倍数为400亿×0.8÷40亿=8倍，加入稀释液的量则为8×100毫升-200毫升=600毫升。七是稀释后要求静置片刻再进行精子活率检查。如果稀释前后精子活率无太大变化，即可进行分装与保存，如果活率下降过快，说明稀释液的配制或稀释操作有问题，不宜使用且应查明原因加以改进。

六、精液的分装

精液分装可采用对精子无毒害作用的塑料瓶（管或袋），以采用塑料瓶较为常用。塑料瓶上一般有刻度，容量为80～100毫升，瓶上要标明公猪品种、耳号、生产日期和稀释液名称等。

七、精液的保存

精液保存分为常温（17℃）、低温（4℃）和冷冻（-196℃）保存，目前国内常采用的是常温保存。

精液常温保存的要求如下：一是将分装完的精液置于22～25℃的室温中1～2小时后，放入17℃恒温箱储存，也可将精液瓶用几层纱布或干毛巾包好后直接放置于17℃冰箱中，让其温度缓慢下降，避免因温度下降过快造成死精数增多。二是在保存过程中要求每12小时将精液摇匀1次，防止精子沉淀引起死亡，每次摇动时动作要轻缓均匀，同时观察精液的色泽并做好记录，发现异常及时处理。三是尽量减少精液保存箱开关次数，以降低对精子的影响。四是切实注意恒温箱内温度的变化（通过温度计显示的数据判断），避免出现温度升高或降低的现象。五是用短效稀释液稀释的精液可保存3天，用中效稀释液稀释的精液可保存4～6天，用长效稀释液稀释的精液可保存7天以上。但无论用何种稀释液保存精液都应尽快用完，否则会影响使用效果。使用前要对保存的精液要进行活率检查，活率低于0.6的应弃用。

八、精液的运输

精液运输成败的关键在于保温和防震是否做得充分。在运输过程中，精液应置于保温较好的装置内，温度保持在16～18℃，并避免强烈震动。

精液运输的注意事项如下：一是运输前必须严格检查精液，活率低于0.7的严禁调出；二是尽量排出包装瓶或包装袋中的空气，以减少运输过程中的震荡；三是在运输过程中应严格避光；四是精液运达目的地后，再次检查精子活率，合格后方可接收。

九、输精

1. 输精时间

发情母猪阴部红肿，用手按压背部出现静立反射后8～12小时为最佳输精时间。此时发情母猪有爬跨其他母猪或允许其他母猪爬跨的表现，也可利用公猪进行试情，母猪接受公猪爬跨则表明发情。发情母猪第一次输精后8～12小时进行第二次输精。

2. 输精方法

输精方法有子宫颈输精法、子宫内输精法和子宫角输精法，其中子宫内输精法、子宫角输精法精液使用量小，适用于冷冻精液、性控精液等，但操作相对复杂，需特殊的输精管。目前生产上子宫颈输精法较常用，其操作简单、易掌握，具体操作方法如下：操作人员清洁消毒双手后戴上消毒手套，清洁母猪外阴、尾根和臀部周围，再用温水浸湿毛巾，擦净外阴部；从密封袋中取出灭菌后的输精管，手不应接触输精管前 2/3 部分，在其前端涂上润滑液；将输精管以45°角向上插入母猪生殖道内，当感觉有阻力时缓慢逆时针方向旋转同时前后移动，使输精管进入子宫深部10～15厘米，直到感觉输精管前端被子宫颈锁定（轻轻回拉不动）后从精液保存箱取出品质合格的精液，核对公猪品种、耳号；缓慢颠倒输精瓶（管、袋）摇匀精液后连接输精管，并轻轻按压确保精液能够顺利流出；当输精瓶（管、袋）内精液排空后放低输精管约15秒，观察精液是否回流到输精瓶，若回流要将其再次输入。

3. 填写输精记录

输精后应做好详细记录，包括公、母猪品种，耳号，输精时间，输精量，精子活率，输精次数和输精操作者等。

（作者联系地址：湖南省湘乡市畜牧水产局 邮编：411400）endprint