精子DNA碎片检测与男性少弱精子症不育患者的相关性分析

刘凯峰

江苏省苏北人民医院男科 江苏省扬州市 225001

精子DNA碎片检测与男性少弱精子症不育患者的相关性分析

刘凯峰

江苏省苏北人民医院男科 江苏省扬州市 225001

随着社会的不断发展，不孕的夫妇逐年增多，约有15%的夫妻在结婚后一年内未能受孕而接受治疗，而又约5%的夫妻治疗后仍不能受孕。而其中由男性引起的不育症比例达到20%，并且这一比例有逐年上升的趋势。临床上对于男性的孕前检查主要局限于精液常规。精液常规的局限性在于只能反映精子的活力和质量，但是由于精液本身容易受到外界及时间的影响，以及不同操作人员操作中的差异，很难完整的评估男性的生殖能力。因此寻求新的评估方式成为现在急需解决的问题，近些年来精子DNA碎片检测成为一项评估男性精子功能的指标，成为研究男性少弱精子症不育患者的热点。因此本研究就精子DNA碎片检测与男性少弱精子症的不育患者的精液常规、精子形态学分析的相关性进行研究。

精子DNA；碎片检测；男性少弱精子症；不育

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集2015年6月～2016年8月前于我院就诊的少弱精子症男性不育患者20例，年龄在25～40岁，平均年龄在33.2±3.71岁，平均不孕年限7.11±6.21年。20例对照组选取近两年有正常健康生育史的男性，年龄在22～41岁，平均年龄在31.1±5.61岁，两组间年龄无统计学差异。体格检查包括男性第二性征、睾丸、附睾、输精管、性激素及外周血染色体核型无异常的男性，并且均已排出女方因素引起的不育症。

1.2 方法

1.2.1 精液常规检查及精子形态学分析

要求受检者禁欲3～7天手淫取精，精液液化后，根据WHO[1]标准，通过计算机辅助动态分析，测定精子的密度，向前活动的精子数，精子活动率及正常形态率、畸形率等。随机统计220只精子的，求出每份精液样本的正常精子形态百分率

1.2.2 精子染色体扩散实验（ sperm chromatin dispersion, SCD）

SCD检测DNA碎片的原理：没有DNA碎片的精子在酸变性和去掉核蛋白DNA扩散形成特征性的光晕，而带有DNA碎片的没有这种光晕，因此通过光学显微镜观察光晕判定是否有DNA碎片。采用Halosperm 试剂盒,可以保持精子尾部的完整，区分精子和非精子，从而减少差异性。随机统计500个精子，观察精子的光晕与精子头部横径的比较，分为五光晕、小光晕、中光晕和大光晕四个等级。大光晕和中光晕表示DNA完整无碎片；无光晕及小光晕判定为DNA断裂为碎片。

1.3 统计学分析

采用spss21.0软件进行统计学分析，采用均数±标注差，计量资料采用t检验，相关性分析采用Pearsan相关性分析，p<0.05为有统计学差异。

2 结果

2.1 男性少弱精症不育组与正常精液比较

如表1，通过男性少弱精症不育组与正常精液组比较可以发现，不育组的正常形体率明显低于对照组，并且精子的活动率、精子密度及向前运动的精子数均低于对照组，且有统计学意义。而比较具有大光晕及中光晕的DNA完整无碎片的精子数明显低于对照组；小光晕及无光晕的DNA碎片的精子数明显高于对照组，并且DFI指数明显高于对照组，且有统计学意义。

表1

2.2 精子DNA碎片指数与精液常规及精子形态学分析指标的关系

如表2，通过结果可以发现，DFI指数与精子密度、向前活动精子、活动率及正常形态率呈负相关。其中DFI与精子密度呈弱相关，与向前活动精子及正常形态率呈中毒相关，与活动率呈高相关性。说明DNA碎片越多，精子的活动率越差，并且精子的密度，向前活动精子及正常形态率越低，不育患者越多。

表2

3 讨论

随着，不孕不育患者的增多，及不孕患者的低龄化的增加，越来越多的国家重视起不孕不育患者的检测与治疗。而男性的少弱精子症是引起男性的不育的主要原因[2]。主要表现在精子的密度低，前向活动精子少，精子的活动率差，已经正常形态率的精子低。这与本研究中不育组患者于正常组精液常规及形态分析的结果相一致。

DNA碎片检测作为近些年新进的精子的检测方法，越来越得到了广大医患人员的认同[3]。随着单纯的精液常规及形态学分析不能充分的评估男性的生殖能力，DNA碎片检测作为一个新的研究热点，被广泛的推广。在我们的实验结果中我们可以发现，不育患者的DNA碎片率明显高于对照组正常的精液，并且DFI指数也较正常组明显升高，说明DNA碎片与不育的患者存在着密不可分的关系。同时通过对DNA碎片检测的结果与精液常规及精子形态学结果的相关性分析，我们发现，精子DNA检测与精液常规及形态学分析的结果基本一致。当DFI指数增高时，与精子的活率、精子的密度，向前活动精子及正常形态率呈负相关性，即DFI指数越高，精子的密度越低，向前活动及正常形态率越低。

从实验中，我们得到以下结论，通过检测男性少弱精子不孕患者的精液常规及形态结构以及DNA碎片分析，DNA碎片检测可以作为评估男性精子质量及生殖能力的重要指标，为不育患者的提供治疗的新思路。

[1]陈振文,谷龙杰.精液分析标准化和精液质量评估——WHO《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)出版[J]. 中国计划生育学杂志,2012, 20(01):58-62.

[2]李维娜,朱文兵,唐章明,等.16835例中国不育男性的精液质量分析[J].中南大学学报(医学版),2014, 39(02):157-160.

[3]许金榜,黄海龙,康跃凡,等.男性少弱精子症不育患者精子DNA碎片检测情况分析[J].中国现代医学杂志,2013,23(23):75-78.