雪豹大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的分离及鉴定

何顺福

（西宁野生动物园，青海西宁 810000）



雪豹大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的分离及鉴定

何顺福

（西宁野生动物园，青海西宁 810000）

2014年8月，西宁野生动物园繁育的2只3月龄雪豹出现腹泻，经过抗生素药物对症治疗数天后效果不佳，随后青海大学农牧学院动物医学系传染病实验室对患病雪豹的腹泻粪便进行了采集，采取常规的病原分离及药敏试验技术进行微生物学诊断，最后，确诊为大肠杆菌与沙门氏菌混合感染，药敏试验结果显示此次分离的病菌对左氧氟沙星、头孢曲松、依诺沙星敏感。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料 采集发病雪豹的粪便，待检。

1.1.2 培养基 伊红亚甲蓝平板、SS平板、TSA平板和TSB肉汤培养基。

1.1.3 试验动物 健康小白鼠10只。

1.1.4 药敏纸片 14种药敏纸片。

1.2 方法

1.2.1 病料的采集 采集西宁野生动物园发病雪豹粪便无菌种到TSB肉汤中37℃培养18～24h。

1.2.5 药敏试验 分别用灭菌棉拭子蘸取动物致病性试验中选取的浓度为3.0×109个/ml的菌悬液均匀涂布于MH平板培养基上（培养基厚度为4mm）进行药敏试验。判定标准参照美国临床实验室标准委员会（NCCLS）药敏试验纸片扩散法法规[2]。

2 结果

2.1 涂片、染色及镜检

观察到大量革兰氏阴性的小杆菌。

2.2 病料分离、纯化、生化试验结果

2.3 致病性试验结果

试验组小白鼠于18h全部死亡。剖检可见大量心包积液和腹腔积液，肾脏肿大，肝脏出血，十二指肠出血明显。采集实质脏器，分别分离到了与上述一致的革兰氏阴性小杆菌，对照组小白鼠饲喂一周后仍健活。

2.4 药敏试验结果

应用14种药敏纸片对禽霍乱病原菌进行药物筛选后，发现3种药物左氧氟沙星、头孢曲松、依诺沙星敏感，对阿奇霉素、红霉素、环丙沙星、妥布霉素4种药物中介，对诺佛沙星、氨苄西林、庆大霉素、青霉素、磺胺、四环素、氟罗沙星7种药物耐药。

3 讨论

（1）严格科学的日常饲养管理是预防本病的主要途径，我园在2012年成功繁殖雪豹2只，但是在饲养7个月后因腹泻治疗无效相继死亡，2014年8月份时隔一年后又成功繁殖雪豹2只，即发病的两只幼年雪豹，在对症治疗一周后也相继死亡，两只健康的雪豹突然开始腹泻，究其原因在于饲养三个月的关键时期，雪豹3个月时跟随成年母雪豹开始进食羊肉等饲料，直将羊肉投喂与未经消毒冲洗的地面上，饲喂精瘦肉过多，幼年雪豹无法自行控制食量采食过多导致消化不良或者进食污染的肉类是诱发本病的主要原因。因此在繁殖育幼过程中，要密切观察幼年雪豹的采食情况，在幼年雪豹开始自主进食时，应将成年雪豹和幼年雪豹的食物分开饲喂，尤其幼年雪豹不应过多饲喂精瘦肉，带骨肉少的新鲜脊梁骨是最好的选择，同时，饲喂场地要干净清洁，避免食物被污染。

（2）目前，动物园任何疾病首先使用大量抗生素导致的耐药性是疾病成功治愈的一大障碍，同类抗生素的长期使用产生的耐药性，往往会耽误疾病的最佳治疗时间，因此，珍稀动物尤其是面对濒危动物发生疾病后，要第一时间进行实验室诊断，进行药敏试验，筛选出最佳治疗药物进行治疗，虽然本次实验完成前发病2只雪豹未经敏感药物治疗死亡，但是在2015年度西宁野生动物园成功繁殖的雪豹在4月龄出现腹泻症状后，第一时间用左氧氟沙星进行了肌注治疗，在用药第2天有效地控制住了病情，截至发稿，未再出现任何疾病，这次治疗的成功为今后雪豹繁殖育幼的成功提供了宝贵的经验。

（3）从药敏试验结果来看菌株对14种常用药物中的7种药物有耐药性，占14种药敏试验的50%，4种药物中介，仅有3种药物敏感，西宁野生动物园在治疗腹泻类疾病治疗过程中长期使用的常用药物庆大霉素、氨苄西林、诺否沙星、青霉素、磺胺均已产生耐药性，因此，通过本次对禽霍乱病原的分离及药敏试验分析，最终筛选出左氧氟沙星、头孢曲松、依诺沙星作为本疾病的治疗药物。在发生类似混合感染疾病的治疗过程中，同一种药物用药2天症状未见好转，筛选出的敏感药物应轮换使用，以收到良好的治疗效果。

参考文献

[1] 赵艳红.猫科动物的感染性腹泻及治疗[J].中国畜禽种业，2014，（3）：119.

[2] 胡继红，高振翔，尹铭芳，等.美国NCCLS2002年版抗生素药敏试验操作标准更新内容[J].中华医学检验杂志，2002，（6）：13-14.

作者简介：何顺福（1981-），男，农学学士学位，助理兽医师。