PTEN在大肠癌中的表达及临床病理学研究

罗贤勇　庞国莲　尚孔顺　钱玉莲

（云南省曲靖市第一人民医院，云南 曲靖 6555000 ）

PTEN在大肠癌中的表达及临床病理学研究

罗贤勇庞国莲尚孔顺钱玉莲

（云南省曲靖市第一人民医院，云南 曲靖 6555000 ）

目的 探讨PTEN蛋白在大肠癌组织中的表达缺失及与其发生发展的关系。方法 采用免疫组织化学S-P法评价PTEN蛋白在大肠癌组织与正常大肠组织中的表达情况。结果 PTEN蛋白在大肠癌组织中表达率明显降低，表达率为38.09%（16/42），在正常大肠组织中高表达，表达率为100%（42/42），具有显著性差异（P＜0.05）；PTEN蛋白的失表达与大肠癌的分化程度、临床分期及有无淋巴结转移具有相关性（P＜0.05），而与患者的年龄、性别无相关性，统计学无显著性差异（P＞0.05）。结论 PTEN蛋白可能与大肠癌的发生、发展具有一定的相关性。

PTEN蛋白；大肠癌；免疫组化

大肠癌是西北欧、北美、澳大利亚最常见的恶性肿瘤之一，然而我国随着生活方式、生活环境等因素的改变，大肠癌的发病率在逐年增加。大肠癌的发生、发展与遗传因素、癌基因的过表达及抑癌基因的失表达有密切关系。PTEN蛋白即第10染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酶基因是一个具有磷酸酶活性的抑癌基因，可抑制肿瘤的发生［1］。本文采用免疫组织化学方法研究大肠癌组织中PTEN蛋白的表达情况，旨在探讨PTEN蛋白的失表达与大肠癌的发生发展是否具有一定的相关性。

1　资料与方法

1.1研究对象：收集2014年1月至2015年6月时间段内送检云南省曲靖市第一人民医院病理科且经病理诊断证实为大肠癌的术后手术标本42例，年龄在30～60岁（中位年龄为45岁），男性23例，女性19例。并取此42例标本的正常大肠组织做为对照组。

1.2方法：采用链菌素亲生物素-过氧化酶法即S-P法：石蜡切片经二甲苯脱蜡、高浓度到低浓度梯度乙醇水化后将其置于10 mmol/L柠檬酸钠缓冲液内，高温高压抗原修复2 min，内源性过氧化物酶阻断。一抗采用鼠抗人PTEN单克隆抗体，DAB显色，苏木素复染。低浓度到高浓度乙醇梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。阴性对照采用PBS液代替一抗，用阳性组织切片作阳性对照。在同等条件下对对照组与实验组标本进行免疫组化染色。

1.3结果判定：PTEN蛋白阳性部位位于细胞核，阳性细胞呈棕黄色颗粒状，根据阳性细胞所占的百分比（＜25%为1分；25%～50%为2分；＞50%为3分）及染色强度（无色为0分；浅黄色为1分；黄色为2分；棕黄色为3分）进行评分。二者相乘，乘积≤3为PTEN蛋白阴性表达；＞3为PTEN蛋白阳性表达［2］。

1.4统计学处理：应用SPSS17.0 for windows 对所得数据进行统计分析，χ2检验做相关分析，P＜0.05具有统计学意义。

2　结　果

2.1PTEN蛋白的表达情况：PTEN蛋白表达定位于细胞核，呈黄或棕黄色颗粒状，42例大肠癌组织中有16例阳性表达，阳性率为38.09%（16/42），42例正常肠组织中PTEN均表达为阳性，阳性率为100%（42/42），PTEN蛋白在大肠癌中的阳性表达率明显低于正常的大肠组织，差异具有显著性（P=0.00）。

2.2PTEN蛋白在大肠癌组织中的失表达与临床病理学的关系：本研究显示，在15例高分化大肠癌病例中有13例PTEN蛋白表达，表达率为86.67%（13/15），在27例中低分化大肠癌中有9例PTEN蛋白表达，表达率为33.33%（9/27）。二者相比，差异具有显著性（χ2=12.13，P=0.00）； 在临床分期中，判定为Ⅰ+Ⅱ期的18例大肠癌中有10例PTEN蛋白表达，阳性率为55.56%（10/18），判定为Ⅲ期的24例大肠癌组织中有7例PTEN蛋白表达，阳性率为29.17%（7/24），差异具有显著性（χ2=13.58，P=0.00）；在19例无淋巴结转移的大肠癌中，有11例PTEN蛋白表达，阳性率为57.89%（11/19），在23例有淋巴结转移的大肠癌中，有9例PTEN蛋白表达，其阳性率为39.13%（9/23），差异具有统计学意义（χ2=8.87，P=0.00）；在23例男性病例与19例女性病例中，差异无统计学意义（χ2=0.18，P=0.75）；大肠癌患者年龄＜45岁的26例与年龄≥45岁的16例相比较，差异亦无统计学意义（χ2=0.12，P=0.83）。

由上所述，PTEN蛋白的表达失活与大肠癌的分化程度、临床分期及有无淋巴结转移具有相关性（P＜0.05），而与患者的年龄、性别无相关性（P＞0.05）。

3　讨　论

大肠癌是我国消化系统常见的恶性肿瘤，近年来，随着社会坏境的改变、生活方式及饮食结构的变化等因素，其发病率、病死率都有所上升。大肠癌的发生发展与癌基因的激活、抑癌基因的失活具有一定的相关性。PTEN蛋白是近年来发现的一个抑癌基因，其位点位于人染色体10q23.3，包含9个外显子和8个内含子，大小约为218 kb，组成，其编码由403个氨基酸残基组成的蛋白质［2］，PTEN蛋白表达失活后丧失其抑癌功能，使肿瘤细胞大量增值，PTEN蛋白失活主要表现为突变、丢失及表达降低或不表达［3］。

本研究对42例大肠癌组织标本及正常的大肠组织中PTEN蛋白检测结果表明，PTEN蛋白在高分化大肠癌组织中阳性表达率为86.67%（13/15），中～低分化癌中阳性率为阳性率为33.33%（9/27），二者相比差异具有统计学意义（χ2=12.13，P=0.00）；在临床分期中，判定为Ⅰ+Ⅱ期的18例大肠癌中有10例PTEN蛋白表达，阳性率为55.56%（10/18），判定为Ⅲ期的24例大肠癌组织中有7例PTEN蛋白表达，阳性率为29.17%（7/24），差异具有统计学意义（χ2=13.58，P＜0.05）；在未发生淋巴结转移的病例中，PTEN蛋白表达率为57.89%（11/19），在发生淋巴结转移的病例中表达率为39.13%（9/23），二者相比差异具有显著性（χ2=8.87，P=0.00）；PTEN蛋白的表达与患者的性别及年龄无明显相关性。

本研究结果表明，PTEN蛋白在大肠癌组织中的表达率明显低于正常的大肠组织，随着大肠癌分化程度的降低PTEN蛋白的表达亦降低，在淋巴结有转移的病例中低于在无淋巴结转移的病例，在临床分期判定为Ⅲ期的大肠癌中低于判定为Ⅰ+Ⅱ期的大肠癌病例，而与患者的年龄、性别无相关性，由此提示PTEN蛋白的表达与大肠癌的发生发展具有一定的相关性，且参与大肠癌的发生、浸润及转移。 总之，大肠癌的发生、浸润及淋巴结转移与PTEN蛋白的表达失活关系较为密切，本研究对临床大肠癌的治疗及预后判断能提供一定的帮助。

［1］ 董华承，范丽昕，朴正爱，等.PTEN、nm23-H1和Syk在大肠癌中的表达及意义［J］.临床肿瘤学杂志，2013，18（5）:403-407.

［2］ 蓝显明，曾彬，唐淑妮.大肠癌淋巴结转移与PTEN、COX-2表达的相关性［J］.实用癌症杂志，2015，30（9）:1296-1298.

［3］ Sun Y，Tian H，Wang L.Effects of PTEN on the proliferation and apoptosis of colorectalcancer cell via the phosphoinositol-3-kinase/ kt pathway［J］.Oncol Rep，2015，33（4）:1828-1836.

Expression of PTEN and Clinial Pathology Research in Colorectal Cancer

LUO Xian-yong， PANG Guo-lian， SHANG Kong-shun， QIAN Yu-lian
（The First People’s Hospital of Qujing， Qujing 655000， China）

Objective To investigate the non-expression of PTEN in colorectal and the relationship between the non-expression of PTEN and clinincal and pathologic parameters. Methods we evaluated expression of PTEN protein in normal colon tissue by immunohitochemical S-P method. Results Expression of PTEN protein is significantly decreased in colorectal cancer tissues， The expression rate was 38.09% （16/42）， Expression of PTEN protein is increased In normal colon tissue， The expression rate was 100% （42/42）， that has a significant difference （P＜0.05）； PTEN protein expression has correlation with differentiation of colorectal cancer， stage of clinical and lymph node metastasis in colorectal cancer（P＜0.05）. The expression of PTEN protein has not correlation and the patient's age， gender（P＞0.05）. Conclusion PTEN protein may be related to the incidence and the development of colorectal cancer.

PTEN protein； Colorectal cancer； Immunohistochemistry

R735.3+4

B

1671-8194（2016）29-0001-02