儿童紫癜性肾炎相关因素分析

梁斐 丁健 黎惠章 周慧恩

儿童紫癜性肾炎相关因素分析

梁斐 丁健 黎惠章 周慧恩

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白细胞介素-8(IL-8)在紫癜性肾炎发病中的作用及临床意义。方法57例儿童紫癜性肾炎患儿作为紫癜性肾炎组,40例健康体检儿童作为对照组,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测紫癜性肾炎组和对照组儿童血清中TNF-α、TGF-β1、MCP-1和IL-8表达水平,并进行组间比较。结果紫癜性肾炎组患儿血清中TNF-α(13.35±2.15)ng/ml、TGF-β1(7.24±2.12)ng/ml、MCP-1(16.74±4.32)pg/ml和IL-8(24.64±3.16)μg/L的检测水平均高于对照组(4.34±0.78)ng/ml、(1.14±0.53)ng/ml、(3.68±0.83)pg/ml、(7.12±2.58)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清中TNF-α、TGF-β1、MCP-1和IL-8指标水平同紫癜性肾炎关系密切,因此早期的联合检测对于临床诊断具有重要的意义。

紫癜性肾炎；肿瘤坏死因子-α；转化生长因子-β1；单核细胞趋化蛋白-1；白细胞介素-8

过敏性紫癜(HSP)医学界又称为亨-舒综合征,是临床中较为常见的一种毛细血管变态反应性疾病。该疾病的临床特点主要表现为非血小板减少性紫癜,可累及皮肤、消化道、关节、肾脏、神经系统等。紫癜性肾炎(henoch-schonlein purpura nephritis,HSPN)为其严重并发症,预后较差,严重者会诱发终末期肾脏病(ESRD),是儿童继发性肾小球疾病的重要致病诱因之一［1］。多发生于皮肤紫癜后1个月内,约2%的患儿会发展为终末期肾炎［2］。有文献报道TNF-α、TGF-β1、MCP-1和IL-8等在过敏性紫癜发病中有重要作用［3］。本研究通过对患儿血清中TNF-α、TGF-β1、MCP-1以及IL-8指标水平的检测,探讨其与儿童紫癜性肾炎的相互关系以及对于临床诊断的意义,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选择2013年1月～2014年12月本院收治的57例儿童紫癜性肾炎患儿作为紫癜性肾炎组,其中,男31例,女26例,年龄5～14岁,平均年龄8.3岁,诊断符合中华儿科学会肾脏学组的紫癜性肾炎诊断标准［3］。选择同期40例健康体检儿童作为对照组,其中,男20例,女20例,年龄5～15岁,平均年龄9.1岁,血、尿常规及肾功能无异常。两组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法 采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对受检儿童血清中TNF-α、TGF-β1、MCP-1及IL-8指标水平进行检测。具体步骤如下：①测定血清中抗原浓度以及包被抗原浓度：应用十字交叉稀释分析方式测定患儿血清中的抗原浓度,通常浓度为10 μg/ml,不能超过20 μg/ml。与此同时,需要将碳酸盐包被的缓冲液稀释的抗原50 μl置入酶标板中,覆盖塑料膜板后置于室温中进行储藏。除去包被液后,洗涤3次并甩干。②置入封闭液：在孔隙中加入200 μl封闭液(1%BSA),盖上膜板,放置于室温中封闭储藏2 h,然后应用PBS进行两次洗涤。③血清中抗体的孵育：在每个孔间隙中,置入100 μl抗体,并置于室温环境中孵育2 h。孵育后进行4次洗涤。④检测：在每个孔中加入100 μl底物溶液进行样本检测,等待溶液充分显色后,置入终止液100 μl,最后在酶标仪上测定相应的波长以及吸光度值。

1.3 统计学方法 运用SPSS21.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

紫癜性肾炎组患儿血清中TNF-α、TGF-β1、MCP-1和IL-8的检测水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组TNF-α、TGF-β1、MCP-1和IL-8表达水平比较(±s)

注：与对照组比较,aP<0.05

组别 例数 TNF-α(ng/ml) TGF-β1(ng/ml) MCP-1(pg/ml) IL-8(μg/L)紫癜性肾炎组 57 13.35±2.15a 7.24±2.12a 16.74±4.32a 24.64±3.16a对照组 40 4.34±0.78 1.14±0.53 3.68±0.83 7.12±2.58

3 讨论

过敏性紫癜是临床较为常见的一种免疫性疾病,其致病机制主要由于患儿全身的小血管出现变态反应性炎症,最终导致紫癜性肾炎的发病［4］。紫癜性肾炎是过敏性紫癜最严重的并发症,也是影响疾病预后的重要危险因素。

TNF-α是人体内部一种多生物活性细胞因子,主要是由人体活化单核/巨噬细胞生成,能够有效杀伤、抑制肿瘤细胞,从而促进人体内部中性粒细胞的吞噬,具有消炎、抗感染等功效。人体一旦出现发热等炎性症状,体内诱导肝细胞大量合成急性期蛋白,促使髓样白血病细胞分化成巨噬细胞,造成细胞的增殖与分化,是人体组织内部重要的炎性因子。儿童过敏性紫癜患儿患病后,会出现Ⅰ、Ⅲ型血管变态反应,导致毛细血管的内皮细胞受损,导致人体炎性细胞因子TNF-α的大量分泌［5］。TGF-β是属于一组新近发现的调节细胞生长和分化的超家族,TGF-β1是其中一个亚型。MCP-1是CC型趋化因子的代表成员。趋化因子主要指的是人体白细胞的活化及趋化作用,能够通过介导白细胞的游走、活化以及浸润等方式,参与细胞的生长、发育、分化、凋亡和分布等多种生理功能,不仅能够参与人体炎症反应的调节,还能有效调节生成新血管以及细胞组织分化。研究数据显示,趋化因子的主要来源是人体肾脏组织中浸润炎症细胞因子,对肾脏疾病的治疗关系密切［6-8］。因此,可以通过对儿童紫癜性肾炎患儿血清中TNF-α、TGF-β1、MCP-1和IL-8水平的检测,为临床治疗方案的制定提供科学的依据,具有良好的诊断参考价值。

本实验中紫癜性肾炎组患儿血清中TNF-α(13.35± 2.15)ng/ml、TGF-β1(7.24±2.12)ng/ml、MCP-1(16.74±4.32)pg/ml

和IL-8(24.64±3.16)μg/L的检测水平均高于对照组(4.34± 0.78)ng/ml、(1.14±0.53)ng/ml、(3.68±0.83)pg/ml、(7.12± 2.58)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。提示它们在紫癜性肾炎发生发展中具有重要作用。由于约2%的患儿会发展为终末期肾炎,因此,血清中TNF-α、TGF-β1、MCP-1和IL-8指标水平同紫癜性肾炎关系密切,早发现、早明确、早干预对于儿童紫癜性肾炎的治疗至关重要,能够有效缓解肾脏损伤,改善患儿预后质量。

［1］杨霁云.小儿过敏性紫癜性肾炎诊治中的几个问题.肾脏病与透析肾移植杂志,2004,13(2):147.

［2］王荫范,王绣锦,李祝慈,等.过敏性紫癜71例临床分析.河北医药,2006,28(10):970.

［3］中华医学会儿科学分会肾脏病学组.小儿肾小球疾病的临床分类、诊断及治疗.中华儿科杂志,2001,39(12):746-749.

［4］陈海燕.甲基强的松龙治疗小儿重症紫癜性肾炎.医药论坛杂志,2006,27(17):85-86.

［5］郭桂梅,何威逊,刘冰 ,等.紫癜性肾炎患儿单核细胞趋化蛋白-1表达的研究.临床儿科杂志,2008,26(8):686-689.

［6］古娜娜·托列提别克,罗琼,郭艳芳.儿童紫癜性肾炎危险因素分析.新疆医科大学学报,2012,35(10):1400-1403.

［7］方琼,陈琅.儿童紫癜性肾炎相关临床因素分析.海峡预防医学杂志,2011,17(4):78-80.

［8］赵云.儿童紫癜性肾炎影响因素回顾性分析.中国医药指南,2011,9(36):14-15.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.23.040

2016-03-25］

523000 东莞市人民医院儿科