促肝细胞生长素治疗肝纤维化的临床应用进展

张佩婷，张文洁，左长京，杨丽，王霆,5

(1.广州一品红制药有限公司，广东 广州 510760；2.广东省生化制剂工程中心，广东 广州 510760； 3.广州市番禺中心医院 消化科，广东 广州 511400；4.上海长海医院核医学科，上海 200433； 5.暨南大学 药学院，广东 广州 510632)

促肝细胞生长素治疗肝纤维化的临床应用进展

张佩婷1,2Δ，张文洁3，左长京4，杨丽1,2，王霆1,2,5

(1.广州一品红制药有限公司，广东 广州 510760；2.广东省生化制剂工程中心，广东 广州 510760； 3.广州市番禺中心医院 消化科，广东 广州 511400；4.上海长海医院核医学科，上海 200433； 5.暨南大学 药学院，广东 广州 510632)

促肝细胞生长素主要有效成分为高生物活性的小分子多肽物质，研究表明促肝细胞生长素具有刺激肝细胞DNA合成，促进肝细胞再生，加速肝脏修复，稳定肝脏环境，防止肝细胞损伤乃至坏死的作用，可用于治疗肝纤维化。为了了解近年来国内外促肝细胞生长素用于治疗肝纤维化的临床应用现状，更好的指导肝纤维化用药治疗，文中从简要介绍促肝细胞生长素、肝纤维化的研究进展及促肝细胞生长素在肝纤维化治疗的临床应用等三个方面作一综述。

促肝细胞生长素；肝纤维化；临床应用；中药；联合用药

促肝细胞生长素主要有效成分为能促进肝细胞再生的高生物活性的小分子多肽物质，其具有刺激肝细胞DNA合成，促进肝细胞再生，加速肝脏修复，稳定肝脏环境，防止肝细胞损伤乃至坏死的作用，在肝病治疗药物中具有极其重要的地位。肝纤维化是由多种原因引起的肝内结缔组织异常增生，会导致肝功能衰竭和门静脉高压，是慢性肝病发展到肝硬化的必经之阶段。促肝细胞生长素在体内外实验及大量临床应用中均表现有抗纤维化的作用。为了了解促肝细胞生长素用于治疗肝纤维化的临床应用现状，更好的指导肝纤维化用药治疗，现从简要介绍促肝细胞生长素、肝纤维化的研究进展及促肝细胞生长素在肝纤维化治疗的临床应用等三个方面做一综述。

1 促肝细胞生长素

肝脏是其中少数能够天然更新其失去组织的内部人体器官，当肝细胞受到毒物、病毒、缺血、缺氧等破坏时，其他的肝细胞重新进入细胞周期，进行有丝分裂，表现出很强的再生能力。肝细胞的分裂增殖有严格的调控机制，并受多种细胞因子的作用和影响。这些细胞因子中，一类是非特异性的肝细胞生长刺激因子，例如表皮生长因子、白细胞介素、转化生长因子α、胰岛素、肾上腺素等；另一类是特异性的肝细胞生长刺激因子，主要分为血源性肝细胞生长因子和肝源性肝细胞生长因子2类。血源性促肝细胞生长因子在1982年由日本学者Nakamura等[1]从肝部分切除大鼠血液中发现并分离获得，这类促肝细胞生长因子的来源和作用范围广泛，对热和蛋白酶敏感，具有种族特异性，无器官特异性；肝源性肝细胞生长因子是从初断乳大鼠肝或再生肝中发现和分离的因子，由LaBrecque等[2]从大鼠再生肝悬液中纯化得到，称为肝再生刺激物质(hepatic stimulating substance，HSS)。随后，其他学者相继从大鼠、兔、狗、牛和羊等哺乳动物的胚胎肝、新生肝或再生肝组织中提取到其活性成分[3]，目前已证明其仅来源于的胚胎肝或再生肝，正常成年肝脏和体内其它组织都未检测出HSS活性[4]。与血源性促肝细胞生长因子相比，其热稳定和蛋白稳定性强，只作用于肝脏细胞，具有器官特异性而无种族特异性，这使临床应用动物源性HSS治疗肝病成为可能。国内对促肝细胞生长因子的研究和应用主要集中在肝源性促肝细胞生长因子上，研究者称之为促肝细胞生长素(promoting hepatocyte growth factors，PHGF)[5-6]。

国内最先由孔祥平等[5-6]从新鲜乳猪肝脏中提取纯化制备PHGF，并证明PHGF的主要有效成分为分子量2.1万Da的高生物活性小分子多肽物质[7]。PHGF在1991年获得国家新药证书和生产批文，是我国第1个一类生化新药[8]。

PHGF一方面具有刺激肝细胞DNA合成，促进肝细胞再生，加速肝脏修复，保护肝细胞，增强枯否氏细胞的功能，提高清除内源性及外源性内毒素的效率，抑制血清中肿瘤坏死因子的活性，稳定肝脏环境，防止肝细胞损伤乃至坏死的作用[9]。另一方面，PHGF不仅能治疗肝脏疾病，还能用于治疗肺炎[10]、胃癌[11]、胰腺癌[12]等疾病。在治疗肝纤维化疾病方面，PHGF含有氨基酸和多种微量元素，具有营养肝细胞、促进相关多肽氧化磷酸化、活跃肝细胞生物氧化功能和蛋白质合成的作用，通过抑制成纤维细胞增殖和分化而减少胶原纤维形成和纤维组织增生从而发挥抗纤维化作用[13-14]。

2 肝纤维化

肝纤维化(hepatic fibrosis)是由多种原因引起的肝内结缔组织异常增生，是肝脏对炎症坏死等组织损伤的修复反应，表现为肝内细胞外间质成分过度异常地沉积，并影响肝脏的功能，是慢性肝病发展到肝硬化必经之阶段[15-16]。持续的肝纤维化会导致肝小叶结构的破坏和假小叶的形成，继而发展为肝硬化，最终引发多种晚期并发症，如门静脉高压、脑病、合成机能障碍和代谢功能受损等，甚至肝癌[17]。现普遍认为肝纤维化尚有逆转至正常的可能，而肝硬化则不可逆转[18]。

肝纤维化的病因复杂多样，如肝炎病毒、血吸虫病、酒精、药物、毒物及自身免疫性疾病等因素长期持续损害肝脏，都可能导致肝纤维化形成[19]。肝纤维化形成过程与血清生化活动有关，大致可分为慢性肝损害、细胞因子网络失调和细胞外间质代谢异常等3个环节，其中前者主要是外界异物导致的肝损害，后2者是机体自身的代谢失调导致的[20]。

美国肝病研究学会(American Association for the Study of Liver Diseases， AASLD)1989年召开了第1次肝纤维化专题讨论会，主题是细胞外基质的生物化学特性及其对肝脏关键细胞的作用，称之为基质生物学时代[21]。2000年AASLD召开的第2次以研究肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)为主的肝纤维化专题会，研究内容涉及肝纤维化的发生发展机制与治疗，被称之为HSC生物学时代[22]。2006年第3次会议回顾了近年来迅猛出现的各项新进展，研究者认为肝纤维化研究进入了整体创伤愈合反应时代，这意味着人体各部位只要发生创伤就有可能发生纤维化，另外会议还提出11项重点研究内容，包括应进一步探讨更多的疾病特异性病理机制，如血吸虫病的发生是否与肝实质细胞损害有关等[23]。2009年11月AASLD召开的抗肝纤维化专题讨论会，重点突出了抗肝纤维化治疗的重要性，很大程度上意味着抗肝纤维化治疗将是未来肝纤维化研究的重点[24]。2013年第64届AASLD年会上表示丙型肝炎新的抗病毒药物已经取得了巨大的成功和进步，而与会研究者认为肝纤维化是下一个肝病领域的巨大挑战，也是肝病治疗研究的焦点[25]。

理想的抗肝纤维化治疗应具有以下特点：对肝星状细胞，具有高度的特异性；对肝实质细胞及其他非实质细胞的毒性小；能有效逆转进展性肝纤维化，而不是仅仅阻止新的胶原的沉积。根据以上特点，抗肝纤维化治疗策略主要有6个方面：①治疗原发病、去除病因：致病因素的持续刺激是造成肝纤维化不断发展的关键因素，因此病因治疗是抗肝纤维化的最根本和最有效的途径。众多文献报道去除病因后，各种原因所致的肝纤维化得以逆转。例如酒精性肝病患者戒酒、血吸虫病患者进行驱虫治疗和继发性胆汁性肝硬化患者解除胆道梗阻后，其肝纤维化程度均得到明显的改善[26]。②减弱炎症与免疫反应：肝脏的慢性炎症刺激可持续活化HSC，在这个过程中促炎性细胞因子与抗炎性细胞因子发挥了重要作用。以细胞因子为靶向，通过拮抗促炎性细胞因子或增强抗炎性细胞因子的作用可显著减轻肝组织的炎症反应。大量具有抗炎活性的药物在体内或体外的实验中均证实可以下调HSC的活化。类固醇激素用于治疗某些类型的肝病患者具有良好的疗效，尤其在自身免疫性肝病的治疗中已成为不可缺少的药物之一[27]。③抑制HSC的活化：激活的HSC通过细胞增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成和肝内结构的重建。由于HSC在肝纤维化发生发展中的重要作用，抑制HSC的活化是抗肝纤维化治疗的一个关键靶点。减少静止HSC向活化HSC的转变已成为抗肝纤维化的中心策略，尤其是在酒精性肝病、丙肝病毒感染等疾病的治疗上。④中和细胞反应：活化的HSC转变为肌纤维样母细胞，其生理特征包括细胞质中脂滴消失、收缩性增强、细胞增生频率增加、细胞因子、趋化因子及受体分泌增加及表达α-平滑肌肌动蛋白等。这些特征主要是由细胞因子引起的，如血小板衍生生长因子和内皮素。这些因子的拮抗剂、受体或细胞内信号分子都是药物作用的靶点[19]。⑤诱导HSC凋亡：激活的HSC有2个去向：转变为静止态和发生细胞凋亡。目前研究认为白细胞介素-10(IL-10)是一种能够调控激活的HSC向静止态转变的刺激因子，可以下调炎症反应并增加组织间隙胶原酶的活性，其次通过诱导HSC凋亡来促进肝纤维化的逆转是治疗的另一个重要策略[28]。HSC的凋亡可使肝纤维化程度得到改善；相反，对凋亡的抵抗可以延长活化的HSC的生存，对肝纤维化的进展起重要作用[29]。⑥增加细胞外基质的降解：在肝脏处于正常状态下，纤维的生成同时伴以纤维的降解。肝纤维化时胶原酶在早期生成总量虽然也略增，但不及纤维生成明显，而后期胶原酶日趋减少，以至降解活性不足，此为肝纤维化形成的机制之一。治疗肝纤维化不仅要减少细胞外基质的沉积，还要使已沉积的基质降解，这有助于肝功能的恢复。增加基质胶原酶的活性，可以促进基质胶原纤维的降解。

PHGF可以促进肝细胞有丝分裂，调节HSC的增殖、胶原合成及转化生长因子表达，重建肝脏的正常框架结构进而恢复肝功能；另一方面，PHGF能够明显地增强胶原酶的活性，而对成纤维细胞的增殖则无刺激活性，因而能够有效降解胶原纤维，具有防治肝纤维化的作用。

3 促肝细胞生长素在治疗肝纤维化上的临床应用

PHGF可用于多种急、慢性肝炎、肝纤维化以及肝硬化等疾病的治疗。有文献报道[30-31]PHGF可用于治疗四氯化碳诱导的肝纤维化和肝损伤小鼠，实验结果显示PHGF能够减轻四氯化碳造成的肝损伤，延缓肝纤维化的过程。

已有的文献显示，在抗肝纤维化的临床治疗上多采用含PHGF的联合用药方式，例如与还原型谷胱甘肽、白蛋白等常规用药以及益气养阴、活血化瘀的中药联合治疗。

文献报道谷胱甘肽、中药三七、川芎嗪、丹参等治疗肝纤维化均有不错的疗效，在联合PHGF后显示出药物协同效果发挥了更好的改善肝功能的作用。姜慧敏等[32]采用PHGF和丹参联合穴位注射治疗肝纤维化40例，治疗2个疗程后，其肝功能、肝纤维化指标、影像学指标有明显改善，与治疗前比较，有显著性统计学意义(P<0.01)，与单种药物组治疗后比较，差异有统计学意义(P<0.01)。胡孝彬等[33]也报道PHGF联合复方丹参注射液治疗肝41例纤维化患者，结果显示治疗后各组症状、体征、肝功能均有不同程度好转，以联合用药组最为显著，单独PHGF组次之，复方丹参组再次之。

张哲梅等[34]把73例慢性乙肝纤维化患者随机分为促肝细胞生长素加丹参组，促肝细胞生长素组、丹参组及对照组共4组，分别予药物30 d后，治疗前后检测肝纤维化的血清学指标，发现治疗后各治疗组与对照组之间的差异显著，肝纤维的指标有不同程度好转，联合用药的作用优于单用PHGF或丹参。说明2药合用可明显减轻和抑制肝纤维化形成，能增强各自的抗肝纤维化效应。因此作者认为，对慢性肝炎，联合应用PHGF和丹参，可明显减轻肝细胞损伤，减轻肝纤维化，促进肝功能恢复，减缓慢性肝炎向肝硬化进展。

郭力红等[35]观察PHGF治疗慢性肝病肝纤维化疗效，2组均采用甘草酸二胺、还原型谷胱甘肽、复方丹参、白蛋白等综合治疗，PHGF治疗组加用PHGF 120 mg(1次/天，静滴，治疗时间为6 w)。结果发现PHGF治疗组在改善肝纤4项指标，减少胶原纤维形成和纤维组织增生，缩小门静脉等方面明显优于对照组，从临床角度证实了PHGF通过减少肝脏炎症反应及细胞坏死，抑制成纤维细胞、贮脂细胞增殖，达到抗纤维化的作用。另外也有文献报道PHGF与甘草酸二胺联合使用也能得到更好的效果，巨煜华[36]治疗慢性乙型肝炎30例，结果显示促肝细胞生长素与甘草酸二胺联合应用治疗慢性乙肝能明显降低谷丙转氨酶、总胆红素，提高血清白蛋白含量，说明2药联合应用有抗炎、保肝作用，有明显的抑制纤维组织增生和胶原纤维形成的作用；康洪华等[37]观察促肝细胞生长素联合甘草酸二胺治疗40例慢性重型肝炎，发现治疗后2组相应的生化指标均有改善，且联合用药组优于传统用药组(P<0.05)。文献报道在治疗肝纤维化方面复方甘草甜素和PHGF联合用药也优于单味用药[38]，各治疗组治疗前后肝功能指标比较均有显著性差异(P<0.05)，联合治疗组明显优于复方甘草甜素组和PHGF组，显示复方甘草甜素和PHGF合用可增强各自的抗纤维化的效应，使患者临床症状的改善、肝功的恢复优于单治疗组和对照组，且缩短肝功复常时间。

谢爽等[39]联合PHGF和苦参素联用治疗慢性乙型肝炎肝纤维化106例，结果显示治疗后，血清肝纤维化指标与对照组比较差异具有显著性意义(P<0.01)，说明苦参素与PHGF联合应用能够发挥协同作用，抗肝纤维化效果更佳。这些结果说明PHGF与传统抗肝纤维药物联合使用效果更好，与中药治疗起到相辅相成的作用。

4 结论

综上所述，应用PHGF是近年来临床治疗肝纤维化的一种新疗法，临床实践证明这种疗法有明显成效。在治疗时机方面，PHGF必须早期应用，在患者大量肝细胞坏死时能及时促进其肝细胞再生，恢复肝细胞功能以提高治疗成功率。目前大多数临床报道的是以其他化学药物综合疗法或者中药传统治疗作为基础的联合用药方案，从疗效上看确实体现了联合用药后的PHGF作用优势和协同效果，结合前期有关PHGF的保护作用基础研究信息，从基础研究角度开展PHGF肝纤维化治疗的作用机制研究和采用严谨RCT临床试验方式验证其临床疗效的工作显然是一件有意义的事情。

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(编校：苗加会)

Progress in clinical application of promoting hepatocyte growth factors in the treatment of hepatic fibrosis

ZHANG Pei-ting1，2Δ, ZHANG Wen-jie3, ZUO Chang-jing4, YANG Li1，2, WANG Ting1,2，5

(1.Guangzhou Yipinhong Pharmaceutical Co., Ltd., Guangzhou 510760, China;2.Biochemical preparation engineering center of Guangdong province, Guangzhou 510760,China;3.Department of Gastroenterology, Guangzhou Panyu Central Hospital, Guangzhou 511400, China;4.Department of Nuclear Medicine, Changhai Hospital, Shanghai 200433, China; 5.College of Pharmacy, Jinan University, Guangzhou 510632, China)

Promoting hepatocyte growth factors are small molecular peptides with high biological activity, which has various types pharmacological actions on stimulating the DNA synthesis of liver cell, promoting cell regeneration, accelerating liver repair, stable liver environment, and protect liver from damage and necrosis, so that it can be used in treating hepatic fibrosis.To analyze the progress in the research of promoting hepatocyte growth factors and its clinical application on hepatic fibrosis and provide references for hepatic fibrosis drug treatment, based on searching domestic and foreign documents, this paper systematically summarized in three aspects.

promoting hepatocyte growth factors; hepatic fibrosis; clinical application; traditional chinese medicine; concomitant drugs

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.07.62

张佩婷，通信作者，女，硕士，研究方向：新药研发，E-mail：alice81189@hotmail.com。

R975.5

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