结肠癌中HCCR和Survivin的表达及临床意义

荣光宏，马颖才

(青海省人民医院消化内科，青海 西宁 810007)



结肠癌中HCCR和Survivin的表达及临床意义

荣光宏，马颖才※

(青海省人民医院消化内科，青海 西宁 810007)

摘要目的探讨HCCR与Survivin在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法选取30例正常结肠组织和75例结肠癌组织，利用免疫组化法检测HCCR和Survivin蛋白的表达，通过分析二者在正常结肠组织和结肠癌组织中的表达水平及其与临床表现的关系，了解其表达及临床意义。结果HCCR在正常组织阳性表达率为3.3%，结肠癌组织中阳性表达率为70.7%，两者比较差异有显著意义(χ2=38.893，P<0.05)，其阳性表达与分化程度、淋巴结转移情况、Dukes分期有关(P<0.05)。Survivin在30例正常组织均呈阴性表达，在结肠癌组织中的阳性表达率为78.7%，两者比较差异有显著意义(χ2=53.870，P=0.000)，其阳性表达与分化程度、淋巴结转移情况、Dukes分期有关(P<0.05)。HCCR在癌组织中与Survivin的表达呈显著正相关(γs=0.308，P=0.007)。结论HCCR和Survivin在结肠癌组织中表达异常，其与癌组织的发生、发展密切相关。

关键词结肠肿瘤HCCRSurvivin免疫组化

EXPRESSION AND PROGNOSTIC SIGNIFICANCE OF

HCCR AND SURVIVIN IN COLORECTAL CANCER

Rong Guanghong，Ma Yingcai※

(Digestive Department of Qinghai Provincial People's Hospital，Xining，810007)

Abstract ObjectiveTo explore the expression of HCCR and Survivin in colorectal carcinoma tissues as well as their clinical prognostic significance.Methods The expression of HCCR and Survivin in 75 cases of colorectal carcinoma tissue and 30 cases of normal colorectal tissue were detected by SP immunohistochemistry method further investigate the relationship between the HCCR and Survivin expression level with colorectal carcinoma.Results There were 1 cases of HCCR positive express in 30 cases of normal colonial tissues，the positive rate of expression was 3.3%，there were 53 cases of HCCR positive express in 75 cases of colorectal carcinoma tissues，the positive rate of expression was70.7%，the difference was obvious(χ2=38.893，P<0.05).The positive expression of HCCR was correlated with differentiation grade，lymph node metastases and Dukes′stage(P<0.05).Survivin was expressed negatively in all of the normal colorectal tissue，the positive rate of which in colorectal carcinoma was 78.7%，the difference was obvious(χ2=53.870，P=0.000).The positive expression of Survivin was related to differentiation grade，lymph node metastases and Dukes′stage(P<0.05).The expression of HCCR was significant and positively correlated with that of Survivin in colorectal cancer(γs=0.308，P=0.007).Conclusion The deregulation of HCCR and Survivin expressions may correlate to the occurrence，development of colorectal carcinoma.The combined detection of HCCR and Survivin may have important significance for the determination of the biological behavior of colon cancer.

KeywordsColorectalHCCRSurvivinImmunohistochemistry

癌基因的激活是结肠癌发病的主要因素，通过对癌基因及其蛋白分子作用的研究，有助于我们了解结、直肠癌的发病机制[1-2]。人宫颈癌基因(HCCR)是参与人多种肿瘤发生、发展的基因[3-4]，是研究基因治疗恶性肿瘤的新靶点。Survivin(生存素)是抑制凋亡基因家族的成员，在多种人类肿瘤组织中表达，在肿瘤发生、发展中有重要的作用[5]。二者在结、直肠癌中表达及相互关系的报道结果不一。我们应用免疫组化技术检测HCCR和Survivin蛋白在正常结肠组织和结肠癌中的表达，进一步明确HCCR与Survivin在结肠癌组织中的表达及临床意义。

1资料与方法

1.1临床资料

收集青海省人民医院外科自2011年6月至2012年12月经病理学证实且接受手术治疗的结肠癌患者75例，所有病例术前均未行放疗、化疗及免疫治疗。其中男40例、女35例，年龄29～80岁；组织分化程度中高中分化腺癌27例、低分化腺癌48例；其中无淋巴结转移者49例，有淋巴结转移者26例；Dukes分期中，DukesA+B期27例、DukesC+D期48例。取同时期正常结肠组织30例作对照。

1.2检测方法

鼠抗人HCCR多克隆抗体和鼠抗人Survivin单克隆抗体购自Santa Cruz公司。HCCR结果判断依据半定量积分法，其具体方法参考我们先前的研究方法[6-8]。Survivin根据染色程度和染色细胞百分比进行评分。染色程度：基本不着色为0级、着色呈淡黄色为1级、着色呈黄色为2级，着色呈棕褐色为3级。染色阳性细胞百分比：着色阳性细胞占计数细胞百分比≤5%为0级，6%～25%为1级，26%～50%为2级，≥51%为3级。将胞质染色程度分级与染色细胞百分比分级相乘，乘积≥4者为表达阳性，0～3为表达阴性。

1.3统计学方法

采用SPSS16.0统计软件，结果分析采用χ2检验和Spearman相关，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1HCCR蛋白在正常结肠及结肠癌组织中的表达

在30例正常结肠组织中，HCCR阳性表达率为3.3%(1/30)，结肠癌组织中阳性表达率为70.7%(53/75)，其蛋白表达主要位于细胞质(图1)，经χ2检验分析，两者表达差异有显著性意义(χ2=38.893，P<0.05)。

A：正常结直肠组织(SP×200)B：结肠癌组织(SP×400)

图1HCCR蛋白表达图

Figure 1Expressions of HCCR protein

2.2HCCR蛋白表达与结肠癌临床病理特征的关系

结肠癌组织中，患者性别、肿瘤部位、肿瘤大小及组织类型与HCCR表达无关 ，经χ2检验分析差异无统计学意义(P>0.05)，与肿瘤分化程度、淋巴结转移及Dukes分期的相关性有关(P<0.05)，与我们先前研究结果一致[6-8](表1)。

表1HCCR在结肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

Table 1 HCCR expressions in colon cancer tissue and the relationship with the Clinicopathologic features

2.3Survivin蛋白在正常结肠及结肠癌组织中的表达

30例正常结肠组织中无Survivin蛋白阳性表达(0/30)，结肠癌组织中蛋白阳性表达率为78.7%(59/75)，Survivin蛋白阳性表达位于细胞质(图2)，经χ2检验分析，两者组织中Survivin蛋白阳性表达差异有极显著意义(χ2=53.870，P=0.000)。

A：正常结肠组织(SP×200)B：结肠癌组织(SP×200)

图2Survivin蛋白表达图

Figure 2Expressions of Survivin protein

2.4Survivin蛋白表达与结肠癌临床病理特征的关系

结肠癌组织中，患者性别、肿瘤部位、肿瘤大小及组织类型与Survivin蛋白阳性表达无关，经χ2检验分析差异无统计学意义(P>0.05)，与淋巴结转移、组织分化程度及Dukes分期有关(P<0.05)(表2)。

表2Survivin在结肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

2.5HCCR和Survivin在结肠癌组织中的表达相关性

在46例结肠癌组织中有HCCR和Survivin共同阳性表达，有9例共同阴性表达，经Spearman分析两者表达呈正相关(γs=0.308，n=75，P=0.007)(表3)。

表3HCCR和Survivin在结直肠癌组织中的表达相关性

3讨论

结肠癌是一种常见的恶性肿瘤，近20年来发病率呈上升趋势，由于其起病较隐匿，出现明显症状时多已进入中晚期，治疗效果欠佳，临床主要以手术治疗为主，5年生存率低，因此提高其早期诊断率尤为重要。近年来关于结肠癌发生发展的分子机制研究取得了较大进展，通过分子水平检测提高结肠癌的早期诊断率及改善预后[6]。已知机体正常细胞与癌细胞之间具有完全不同的属性。正常细胞发生、发展为癌细胞的过程与其携带的癌基因突变有关，癌基因突变在肿瘤的发生发展、治疗及预后中发挥着重要作用，癌基因的研究对阐明肿瘤的形成机制以及为肿瘤治疗提供理论依据，同时通过检测可疑病灶组织的癌基因表达水平有望提高肿瘤的早期诊断率。

HCCR是新近发现的在人体多种肿瘤组织中过度表达的一种癌基因，其不仅在宫颈癌组织中表达，而且在乳腺、肾脏、胃、结肠等肿瘤组织中也呈高表达[7]。国外研究显示[8-9]肿瘤发病早期就可检测出 HCCR 过量表达，其可作为诊断早期肝癌和乳腺癌的肿瘤标志物，提示肿瘤的发生发展可能与HCCR的异常表达有关。其可能的机制为HCCR通过负调控抑癌基因p53，下调p21、WAFl基因启动子活性，从而导致肿瘤发生，在肿瘤发生早期起主要作用[10-11]。本研究结果显示，HCCR在结肠癌组织中高度表达，且其表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移情况及Dukes分期密切相关，与我们先前的研究结果基本一致[12-14]，说明HCCR的表达与结肠癌的发生发展和转移密切相关。

Survivin是凋亡抑制蛋白家族的成员，是1997年发现的一种新型的较强的细胞凋亡抑制因子，也是唯一能通过内源性抑制caspase活性而抑制细胞凋亡的因子，具有抑制凋亡和调节细胞分裂的双重功能，与细胞的增殖、分化及组织的生长密切相关。Survivin可通过特征性的结构直接或间接抑制蛋白效应酶(caspase)依赖或不依赖的凋亡途径，通过抑制caspase蛋白酶阻断细胞的凋亡过程，有效对抗细胞凋亡，促进细胞增殖[15]，且该基因的表达具有高度的特异性，在正常组织中不表达而在肿瘤组织中高度表达，从而抑制肿瘤细胞凋亡，促进肿瘤细胞分化增殖，在肿瘤的发生、发展中起重要作用[16]。同时，survivin的表达与肿瘤的恶性程度及预后呈明显正相关[17-18]。本研究中，Survivin在正常结肠组织无表达，而在结肠癌组织中高度表达，其表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移情况、Dukes分期密切相关，与国外的研究结果基本一致[19]。本研究还显示，Survivin与HCCR在结肠癌组织中存在共同表达，二者表达呈正相关，提示二者在肿瘤的发生、发展过程中有相互促进作用，其具体作用机制有待进一步研究。

综上所述，检测HCCR和Survivin在结肠癌组织中的表达，即有助于临床医生了解肿瘤的生物侵袭性，亦对我们研究结肠癌发生、发展提供新的理论依据。同时联合检测HCCR和Survivin对提高结肠癌的早期诊断率、早期发现远处转移以及提高结肠癌的防治具有重要意义。

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收稿日期2015-03-06第36卷第4期

DOI：10.13452/j.cnki.jqmc.2015.04.008

中图分类号R735.3

文献标识码A

荣光宏(1981～)男，汉族，青海籍，博士在读，主治医师.※：通讯作者，主任医师，Email：mayingcai0271@sina.com