红景天苷对梗阻性黄疸大鼠的肝保护作用及机制探讨

张立超，王晨宇，曹慧芳，李涛，马利锋，侯森林，康建省，刘怀军( 河北医科大学第二医院，石家庄050000;河北北方学院附属第一医院)

红景天苷对梗阻性黄疸大鼠的肝保护作用及机制探讨

张立超1，王晨宇2，曹慧芳1，李涛1，马利锋1，侯森林1，康建省1，刘怀军1
( 1河北医科大学第二医院，石家庄050000;2河北北方学院附属第一医院)

摘要:目的观察红景天苷对梗阻性黄疸大鼠的肝保护作用，并探讨其机制。方法40只雌性SD大鼠随机分为阴性对照组(阴性组)、阳性对照组(阳性组)、低浓度组和高浓度组，每组10只。阴性组行梗阻性黄疸假手术，其余三组均制备梗阻性黄疸模型;造模24 h后，阴性组和阳性组均经腹腔注射0.5 mL/100 g生理盐水，低浓度组和高浓度组分别经腹腔注射红景天苷15、30 mg/100 g，1次/d，均干预14 d。分别于干预7、14 d时，采集腹主动脉血检测血清谷草转氨酶( AST)、谷丙转氨酶( ALT)、直接胆红素( DBIL)、总胆红素( TBIL)、丙二醛( MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)活性。结果干预7、14 d时各组AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA水平均为阳性组＞低浓度组＞高浓度组＞阴性组，P均＜0.05;干预7、14 d时各组SOD水平均为阳性组＜低浓度组＜高浓度组＜阴性组，P均＜0.05。结论红景天苷可通过降低氧化应激反应保护梗阻性黄疸大鼠的肝功能，且浓度越高作用越强。

关键词:红景天苷;梗阻性黄疸;肝功能;氧化应激;超氧化物歧化酶;丙二醛

梗阻性黄疸常表现为高胆红素，高胆红素的细胞毒性较强，常导致神经细胞的氧化应激损伤。丙二醛( MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)是反应氧化应激的重要指标。红景天苷是红景天经现代化学分离提取后的主要成分。研究发现，其在抗肿瘤、增强免疫功能及保护心血管系统、中枢神经系统、肝肾功能等方面均发挥重要作用［1］。2012年10月～2014年10月，我们观察了红景天苷对梗阻性黄疸大鼠的肝保护作用，并探讨其机制。

1　材料与方法

1.1材料8～9周雌性SD大鼠40只(购自河北医科大学第二医院实验动物中心)，体质量250～300 g，均予标准饲料、饮水饲喂，维持正常昼夜节律，适应性饲养5 d。AU-2700全自动生化分析仪购自日本奥林巴斯光学株式会社，红景天苷购自上海源叶生物。

1.2分组造模与干预处理40只大鼠禁食12 h、禁水4 h后随机分为阴性对照组(阴性组)、阳性对照组(阳性组)、低浓度组和高浓度组，每组10只。阴性组行假手术: 2%的苯巴比妥100 mg/kg腹腔麻醉大鼠，游离胆总管但不做结扎。其余三组均制备梗阻性黄疸模型［2］: 2%苯巴比妥100 mg/kg腹腔麻醉大鼠，游离并双重结扎胆总管。大鼠清醒后予正常饮水和喂食。阴性组和阳性组均经腹腔注射生理盐水0.5 mL/100 g，1次/d。低浓度组和高浓度组分别经腹腔注射红景天苷15、30 mg/100 g，1次/d。各组均干预14 d。

1.3肝功能与氧化应激指标观察分别于干预7、14 d时采集各组大鼠腹主动脉血1 mL，2 000 r/min离心15 min，取上清，保存备用。采用全自动生化分析仪检测血清谷草转氨酶( AST)、谷丙转氨酶( ALT)、直接胆红素( DBIL)、总胆红素( TBIL)水平，采用酶标仪检测过氧化脂质降解产物丙二醛( MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)活性。

1.4统计学方法采用SPSS19.0统计软件。计量资料以珋x±s表示，差异显著性检验采用one-way ANOVA，并采用LSD、SNK、Duncan法处理组间均数多重比较;计数资料组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

干预7、14 d时各组AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA水平均为阳性组＞低浓度组＞高浓度组＞阴性组，P均＜0.05;干预7、14 d时各组SOD水平均为阳性组＜低浓度组＜高浓度组＜阴性组，P均＜0.05。见表1。

3　讨论

梗阻性黄疸是指因胆总管结石胆管狭窄或者胆管癌等良、恶性疾病导致的胆管系统阻塞［1～3］，胆汁排泄受阻而导致胆红素反流入血，最终引起黄疸［4］。由梗阻性黄疸随之引起的DBIL升高［5］，

表1　干预7、14 d各组AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA、SOD水平比较(±s)

表1　干预7、14 d各组AST、ALT、DBIL、TBIL、MDA、SOD水平比较(±s)

注:与阴性组比较，*P＜0.05;与阳性组比较，#P＜0.05;与低浓度组比较，ΔP＜0.05。

组别　n　ALT( U/L)　AST( U/L)　 DBIL(μmol/L)　 TBIL(μmol/L)　 MDA( nmol/mg)　 SOD( U/mg)阴性组10干预7 d　47.10±6.02　 107.03±12.02　 5.22±0.92　 7.08±0.75　1.30±0.02　 200.03±21.92干预14 d　38.35±8.13　 115.46±13.31　 6.91±1.04　 8.21±1.15　1.91±0.13　 199.03±22.01阳性组　10干预7 d　141.23±17.90*　341.78±23.05*　200.13±15.03*　243.89±22.63*　6.41±1.02*　135.33±9.38*干预14 d　234.12±21.83*　553.18±43.47*　271.89±22.78*　350.18±39.29*　17.72±1.58*　103.30±9.23*低浓度组　10干预7 d　139.21±13.04* #　270.89±22.87* #172.39±19.93* #　202.51±19.61* #　5.44±0.33* #　140.18±13.54* #干预14 d　210.43±12.53* #　468.98±32.51* #230.76±21.34* #　310.56±29.21* #　12.21±0.92* #　118.98±11.27* #高浓度组　10干预7 d　110.89±9.86* #Δ　201.65±21.34* #Δ130.78±28.10* #Δ177.16±13.55* #Δ　4.15±0.32* #Δ　169.98±13.62* #Δ干预14 d　132.65±8.26* #Δ　358.43±23.01* #Δ189.88±18.54* #Δ252.15±41.23* #Δ　7.50±0.57* #Δ　139.14±18.65* #Δ

可导致肝功能障碍、胃肠黏膜屏障功能障碍［6］、解毒功能障碍和组织愈合能力减弱等［7］。

研究发现，DBIL可抑制细胞膜生物功能，导致细胞内核酸、核蛋白的合成下降，降低线粒体活化活力，使其能量代谢下降，最后对细胞产生毒性作用［8，9］。脂质和蛋白质氧化损伤，是高胆红素血症特别是DBIL介导机体损伤的重要机制之一［10］。

红景天属于景天科多年生草木或灌木植物，中医认为其可祛邪恶气、补气养心、活血清肺、收敛止血。红景天苷为红景天属植物中广泛存在的酚苷类化合物，有抗疲劳、抗衰老、抗炎镇痛、免疫调节、清除自由基等多种药理作用，已用于心血管病、全脑缺血再灌注损伤的治疗中［11，12］。研究发现，红景天苷可抑制H2O2对细胞的氧化损害，恢复线粒体的膜电位和膜通透性［13］。MDA是体内氧化应激反应时脂质过氧化的终末产物之一，常用于反映体内脂质过氧化的程度，测定MDA含量可间接反映氧自由基对细胞的损伤程度［14］。而SOD是机体的抗氧化物质，其活力的高低可间接反映机体清除氧自由基的能力［15］。MDA和SOD在本研究中共同作为氧化应激指标。而ALT和AST作为急性肝功能损伤的指标，TBIL和DBIL作为梗阻性黄疸模型成功建立的指标和肝功能损伤指标。本研究发现，将大鼠胆总管结扎后出现了肝功能的损伤，并且出现了氧化应激损伤，而给予红景天苷后肝功能及氧化应激损伤均明显好转，说明红景天苷可通过抵抗氧化应激损伤保护肝功能，其具体机制可能与其清除自由基、降低脂质过氧化作用、降低酸性磷酸酶活性，促进DNA合成，提高巨噬细胞吞噬功能等作用相关，但具体分子机制需进一步研究。

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·临床研究·

收稿日期:( 2015-01-27)

文章编号:1002-266X( 2015) 30-0032-02

文献标志码:A

中图分类号:R735.8

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.30.012