清火栀麦片的稳定性研究

清火栀麦片的稳定性研究

黄竹英，李淑如，覃仁安

(广州白云山和记黄埔中药有限公司，广东 广州 510515)

摘要：目的探讨清火栀麦片的稳定性。方法采用高效液相色谱法测定清火栀麦片在一定的温度和湿度下放置不同时间后，其主要有效成分栀子苷、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。结果经加速稳定性试验，放置6个月之后，栀子苷含量无显著差异，穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量则均下降。结论该方法测定结果准确，精密度和重现性较好，清火栀麦片质量较为稳定。

关键词：清火栀麦片；栀子苷；穿心莲内酯；脱水穿心莲内酯

作者简介：黄竹英，女，主管中药师，研究方向：工艺制剂研究，E-mail：842277341@qq.com。

中图分类号：R927.11文献标识码：A

Study on stability of Qinghuozhimai Tablets

HUANGZhu-ying,LIShu-ru,QINRen-an

(HutchisonWhampoaGuangzhouBaiyunshanChineseMedicineLimitedCompany，Guangzhou510515，China)

Abstract：ObjectiveTo investigate the stability of Qinghuozhimai Tablets.MethodsUsing high performance liquid chromatography determination of Qinghuozhimai Tablets placed at different times in a certain temperature and humidity,the content of its main effective component geniposide,andrographolide and dehydroandrographolide.ResultsThrough accelerated stability test,after storing for 6 months,the content of geniposide had no significant difference and the contents of andrographolide and dehydroandrographolide were descended.ConclusionThe method was accurate,precise and reproducible.The quality of Qinghuozhimai Tablets was stable.

Key words:Qinghuozhimai Tablets；Geniposide;Andrographolide；Dehydroandrographolide

清火栀麦片收载于《中国药典》2010年版(一部)，由穿心莲、栀子、麦冬3味药组成，具有清热解毒，凉血消肿功效。用于肺胃热盛所致的咽喉肿痛、发热、牙痛、目赤。穿心莲、栀子是清火栀麦片的主要药味，其主要成分在制剂中的稳定性对该药品的质量稳定性及药效起着极其重要的作用。本文通过HPLC测定法和《中国药典》2010年版附录二的加速稳定性试验考察法，考察清火栀麦片中栀子苷、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量变化，以了解该制剂的稳定性及对储存条件的要求，为以后的生产、销售储存提供参考数据。

1仪器与试药

1.1仪器Dionex Summit P680高效液相色谱仪(ASI-100TM自动进样器，PDA-100二极管阵列检测器，变色龙色谱工作站)。

1.2试药清火栀麦片(广州白云山和记黄埔中药有限公司)；栀子苷(批号：110749-200309)、穿心莲内酯 (批号：110797-200307)、脱水穿心莲内酯(批号：0854-200204)对照品均购自中国药品生物制品检定所；乙腈(色谱纯，Fisher)；甲醇(色谱纯，Fisher)；二次重蒸水；其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1色谱条件栀子苷：伊利特Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈-水(15∶85)；流速：1 mL·min-1；检测波长：栀子苷为238 nm；进样量：10 μL；柱温：25 ℃。穿心莲：伊利特Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇-水(55∶45)；流速：1 mL·min-1；检测波长：穿心莲内酯为230 nm；脱水穿心莲内酯为250 nm；进样量：10 μL；柱温：25 ℃。

2.2测定方法

2.2.1穿心莲以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；以甲醇-水(55∶45)为流动相；穿心莲内酯检测波长为230 nm，脱水穿心莲内酯检测波长为250 nm。理论板数按穿心莲内酯峰和脱水穿心莲内酯峰计算均应不低于2 000。

对照品溶液的制备[1]：取穿心莲内酯对照品、脱水穿心莲内酯对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯各20 μg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备[1]：取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取0.3 g，精密称定，置50 mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理(功率250 W，频率33 kHz)30 min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。图谱见图1～4。

图1　穿心莲内酯对照品图谱 a.穿心莲内酯；b.脱水穿心莲内酯

图2　清火栀麦片样品中穿心莲内酯图谱 a.穿心莲内脂；b.脱水穿心莲内酯

图3　脱水穿心莲内酯对照品图谱 a.穿心莲内酯；b.脱水穿心莲内酯

图4　清火栀麦片样品中脱水穿心莲内酯图谱 a.穿心莲内酯；b.脱水穿心莲内酯

2.2.2栀子苷以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；以乙腈-水(15∶85)为流动相；检测波长为238 nm[2]。理论板数按栀子苷峰计算应不低于2 000。

对照品溶液的制备：取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含30 μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：同“2.2.1”项下。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。图谱见图5、6。

图5　栀子苷对照品图谱

图6　清火栀麦片样品中栀子苷图谱

2.3方法学验证[3～5]

2.3.1线性栀子苷：以栀子苷对照液(浓度为0.031 9 mg·mL-1)分别进样1、2、4、6、8、10、12、15、20 μL，按栀子苷试验方法测定，结果见表1。

表1　栀子苷线性考察

以进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，结果表明，栀子苷在0.031 9～0.382 8 μg的范围内，其进样量与峰面积呈良好的线性关系，Y=1.246 4X-0.137 2，r=0.999 9。如果进样量超出0.382 8 μg则进样量与峰面积线性关系很差。

穿心莲：以穿心莲内酯(浓度为0.021 4mg·mL-1)和脱水穿心莲内酯对照液(浓度为0.019 9 mg·mL-1)分别进样2、4、6、8、10、12、15、20 μL，按穿心莲试验方法测定，结果见表2。

表2　穿心莲内酯线性考察

以进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，结果表明，穿心莲内酯在0.042 8～0.428 μg的范围内，其进样量与峰面积呈良好的线性关系，Y=0.876 7X-0.072 9，r=0.999 9。脱水穿心莲内酯在0.039 8～0.398 μg的范围内，其进样量与峰面积呈良好的线性关系，Y=1.529 1X-0.213 8，r=1。

2.3.2精密度试验取穿心莲内酯对照液(浓度为0.0220 mg·mL-1)、脱水穿心莲内酯对照液(浓度为0.020 7 mg·mL-1)、栀子苷对照液(浓度为0.031 9 mg·mL-1)分别进样5次，按上述试验方法项下的色谱条件测定，结果见表3。

表3　穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、栀子苷精密度考察

从上述结果可以看出，仪器测定具有良好的精密度。

2.3.3稳定性试验取清火栀麦片按“2.2”项下条件测定其穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、栀子苷的峰面积，每隔1 h测定1次，连续5次，其测定结果见表4。

表4　穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、栀子苷稳定性考察

结果表明，样品具有良好的稳定性，符合要求。

2.3.4重复性试验取同批清火栀麦片按上述条件提取5份，按含量测定项下的方法分别制备供试液并测定，结果见表5。

表5　穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、栀子苷测定重复性考察

结果表明，样品测定具有良好的重复性。

2.3.5回收率试验取已知含量的清火栀麦片约0.3 g(穿心莲内酯含量为5.67 mg·g-1，脱水穿心莲内酯含量为7.29 mg·g-1，栀子苷含量为11 mg·g-1)，精密称定，分别精密加入等量的对照品，按上述供试品的制备方法制备，一式5份，结果见表6。

表6　穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、栀子苷回收率考察

结果表明，本方法穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、栀子苷的平均回收率和RSD值都符合规定。

3加速稳定性试验

按药物稳定性试验指导原则要求，取本品3批样品，在温度为(40±2)℃，相对湿度75%±5%的条件下放置6个月，在试验期间第1、2、3、6个月末取样1次，考察本品的含量质量指标。将3批样品平均含量测定结果与0月平均含量比较，确定本品的质量稳定性。

结果表明，本品3批样品在上市销售包装条件下，经温度(40±2)℃，相对湿度为75%±5%条件下进行加速试验6个月考察，结果表明：本品经6个月加速试验，清火栀麦片中栀子苷的含量无显著变化，而穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量则发生了一些变化，穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯总量有所下降，但在合格范围内。

4讨论

据文献报道，栀子药材的有效成分栀子苷是比较稳定的[6,7]。而穿心莲药材的有效成分穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯是不稳定的，且久储后穿心莲内酯含量降低，脱水穿心莲内酯含量升高[8,9]。穿心莲药材作为清火栀麦片的君药，其有效成分含量稳定性直接关系到药品的质量稳定性。

本试验采用高温高湿环境，对清火栀麦片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量变化进行考察。试验结果表明，清火栀麦片在温度(40±2)℃，相对湿度为75%±5%条件下考察6个月，穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量都发生了变化。其中每放置一个月，穿心莲内酯含量相应降低，6月与0月相比平均含量降低了17.7%。脱水穿心莲内酯含量则随着放置时间的延长先增加而后趋于平缓，但其增加的量与穿心莲内酯降解的量并不成正比，提示在高温下，穿心莲内酯可能一部分转换成脱水穿心莲内酯。制剂清火栀麦片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯平均总量6月与0月相比降低了10%左右，提示清火栀麦片不适宜存放于高温高湿环境。

参考文献：

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