黑逍遥散联合肾四味对乳腺癌大鼠类更年期症状的影响

黑逍遥散联合肾四味对乳腺癌大鼠类更年期症状的影响

付烊1,运强2,朱学明1*

(1.襄阳市中医院肿瘤科，湖北 襄阳 441000;2.湖北中医药大学附属襄阳医院检验科，湖北 襄阳 441000)

摘要：目的观察黑逍遥散联合肾四味预防他莫昔芬引起的乳腺癌大鼠的类更年期症状的影响。方法60只大鼠腹腔注射MNU溶液,构建大鼠的乳腺癌模型。大鼠随机分为3组：A组(空白对照组)20只，B组(他莫西芬对照组)20只，C组(黑逍遥散联合肾四味组)20只。比较3组大鼠的生存率、行为学评分、体质量、血脂和激素水平的变化。结果经过24周,A组大鼠生存率35.00%(7/20),B组和C组大鼠生存率均为75.00%(15/20)。3组大鼠的生存率有统计学意义(P<0.05)。A组和C组大鼠的行为学评分和雌激素、孕激素水平无统计学意义(P>0.05)，与A、C组大鼠相比，B组大鼠的行为学评分和雌激素、孕激素明显下降(P<0.05)。A组和B组大鼠的体质量无统计学意义(P>0.05),C组大鼠的体质量明显高于A、B组大鼠(P<0.05)。各组大鼠的CHO、TG、HDL-C和LDL-C水平无统计学意义(P>0.05)。结论黑逍遥散联合肾四味能有效预防乳腺癌大鼠因应用他莫昔芬导致的类更年期症状，且安全性较高。

关键词：乳腺癌;黑逍遥散;肾四味;他莫昔芬;类更年期症状

DOI::10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.07.021

中图分类号：R737.9文献标志码： A

文章编号：1003-5699(2015)07-0716-03

基金项目:襄阳市科技局指导性项目(2014襄科业)。

作者简介:付烊(1979-)，女，主治医师，主要从事中医药防治肿瘤研究。

收稿日期:(责任编辑：张瑞彬2014-11-13)

*通信作者:朱学明，电子信箱-fuyang197901@163.com

<1)，且各件产品是否为不合格品相互独立．

Effect of Heixiaoyaosan combined with Shensiwei on climacteric syndrome of rats with breast cancer

FU Yang1,YUN Qiang2,ZHU Xueming1*

(1.Oncology Department,Xiangyang Hospital of TCM,Xiangyang 441000,Hubei Province,China;

2.Clinical Laboratory,Xiangyang Hospital Affiliated to Hubei University of Chinese Medicine,

Xiangyang 441000,Hubei Province,China)

Abstract:ObjectiveTo study the preventive effect of heixiaoyaosan combined with shensiwei on the climacteric syndrome of rats induced by tamoxifen during the treatment of breast cancer.Methods60 S-D rats were given MNU through ntraperitoneal injection to build breast cancer models,all rats were dividened into 3 groups randomly,20 in group A (control group),20 in group B (Tamoxifen group) and 20 in group C (Heixiaoyaosan combined with Shensiwei group).Compare the survival rate,behavioral grade,body mass,blood fat and concentration of estrogen and progestin among 3 groups.ResultsAfter 24 w,the survial rate of group A is 35.00%(7/20),of group B and C are both 75.00%(15/20),the difference among 3 groups has statistical significance(P<0.05).Group A and group C have no statistical difference in behavioral grade as well as blood fat and concentration of estrogen and progestin(P>0.05),those in group B lower,the difference has statistical significance(P<0.05).Group A and group B have no statistical difference in body mass(P>0.05),it is higher in group B,the difference has statistical significance(P<0.05).The difference of CHO,TG,HDL-C and LDL-C among three groups has no statistical significance(P>0.05).ConclusionHeixiaoyaosan combined with Shensiwei can prevent the climacteric syndrome of rats induced by tamoxifen,and security is reliable.

Keywords:breast cancer;Heixiaoyaosan;Shensiwei;Tamoxifen(TMX);climacteric syndrome

现代医学研究表明乳腺癌的发生发展与内分泌有关，采用雌激素受体拮抗剂或芳香化酶抑制剂成为治疗乳腺癌的重要手段[1-2]。目前常用雌激素拮抗剂来阻断与其受体的结合，代表药是他莫昔芬(TMX)[3]，他莫昔芬抗雌激素和弱雌激素作用会导致患者体内激素水平紊乱，患者体内雌激素水平降低，出现一系列类更年期症状，严重影响患者的生活质量，不利于治疗的顺利进行[4-5]。本研究中，观察黑逍遥散联合肾四味联合应用对他莫昔芬引起的类更年期症状的预防作用，探讨中医治疗的可行性。

1实验材料

1.1实验动物选用60只未育的健康的雌性SD大鼠作为实验材料，由重庆医科大学实验动物中心提供，合格证号14-0702。将60只大鼠分为3组：A组(空白对照组)20只，B组(他莫西芬对照组)20只，C组(黑逍遥散联合肾四味组)20只。

1.2药物及试剂药品：枸橼酸他莫西芬片(江苏扬子江药业公司生产，批号：20140511)，甲基亚硝脲(MNU，美国Sigmal公司，纯度>99%)，黑逍遥散(方剂组成:柴胡、白芍、归身、白术、茯苓、甘草、熟地黄)和肾四味(方剂组成:枸杞子、菟丝子、淫羊藿、补骨脂)由本院肿瘤科准备。试剂：大鼠雌激素试剂盒(上海抚生实业有限公司)。

2实验方法

2.1模型构建及药物处理所有大鼠均进行适应性喂养1周，60只大鼠从6周龄开始按照50 mg/kg的剂量腹腔注射MNU(溶于pH=6.0的乙酸溶液)，每周注射1次，持续4次，构建大鼠的乳腺癌模型[6]。造模完成后，B组大鼠按照10 mg/kg的剂量用TMX进行灌胃，隔日1次，治疗持续24周；C组大鼠在TMX灌胃的基础上使用黑逍遥散(10 mg/kg)和肾四味(10 mg/kg)溶液灌胃，隔日1次，持续24周。

2.2各组大鼠的生存率变化统计治疗期间和治疗后总24周内3组大鼠死亡例数,并绘制生存曲线。

2.3各组大鼠治疗期间的行为观察所有大鼠均在模型构治疗6周后进行行为学评分,比较各组大鼠的抑郁情况。1)Open-field行为学评分:采用立柱体敞箱,高为40 cm，长、宽各为80 cm,周壁、底面为黑色，底面用白线划分为面积相等的25块。将大鼠置于敞箱底面的中心方格内，以大鼠穿越底面块数为水平活动积分，动物穿越1格为1次，如动物沿线行走，以每10 cm为1次。以直立次数为垂直活动积分，动物双足离开底面为标志直至放下双足为1次活动。每只动物进行1次，每次时间为3 min[7]。2)糖水消耗实验:所有动物均单笼饲养，每只动物给予1%蔗糖溶液150 mL，同时禁食24 h，计算动物饮用1%蔗糖溶液的量[8]。

2.4各组大鼠的体质量、血脂和激素水平变化药物治疗6周后进行1次体质量的测量，记录大鼠的体质量变化。药物治疗第6周空腹采大鼠尾静脉血，离心并分离大鼠血浆,样本分装于1.5 mL的EP管中，置于-80 ℃保存。解冻样品后由本院检验科测空腹血脂，包括总胆固醇(CHO)、三酰甘油(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;同时，免疫放射法测量大鼠的血液雌二醇(E)和孕酮，操作严格按照说明书进行。记录各组大鼠的血脂和激素水平。

3实验结果

3.1各组大鼠生存率的变化经过24周，A组共13只大鼠死亡，大鼠生存率35.00%;B组和C组各5只大鼠死亡，大鼠生存率均为75.00%。与A组比较，大鼠的生存率差异均具有统计学意义(P<0.05)。

3.2各组大鼠治疗期间的行为变化A组和C组大鼠的水平、垂直活动积分和糖水消耗量比较差异无统计学意义(P>0.05)，与A、C组大鼠相比，B组大鼠的水平活动水平、垂直活动积分和糖水消耗量明显下降(P<0.05)。见表1。

表1　3组大鼠的水平、垂直活动积分和糖水消耗量 ± s)分

注：与A组相比，△P<0.05；与C组相比，#P<0.05

3.3各组大鼠治疗期间的体质量和激素水平A组和B组大鼠的体质量差异无统计学意义(P>0.05),C组大鼠的体质量明显高于A、B组大鼠(P<0.05)。A组和C组大鼠的激素水平差异无统计学意义(P>0.05),B组大鼠的激素水平明显低于A、C组(P<0.05)。见表2。

表2　3组大鼠的体质量和激素水平变化 ± s)

注:与A组相比，△P<0.05；与B组相比，▲P<0.05；与C组相比，#P<0.05

3.4各组大鼠的血脂水平变化各组大鼠的CHO、TG、HDL-C和LDL-C水平无统计学差异(P>0.05)。见表3。

表3　3组大鼠的血脂水平 　mmol/L

4结语

乳腺癌的发生发展与内分泌有关，对于雌激素受体阳性的患者常需要进行进一步的内分泌治疗，雌激素拮抗剂是常用的治疗手段，代表药是他莫昔芬。但他莫昔芬用于乳腺癌患者的内分泌治疗的毒副作用较为明显，患者常出现雌激素水平降低和类更年期症等不良反应。本研究通过动物实验，对黑逍遥散联合肾四味联合应用对他莫昔芬引起的类更年期症状的预防作用进行观察。所有大鼠均进行适应性喂养1周，60只大鼠从6周龄开始按照50 mg/kg的剂量腹腔注射MNU,构建乳腺癌大鼠模型。模型构建6周后进行行为学评分，B组大鼠的水平活动水平、垂直活动积分和糖水消耗量明显下降，大鼠的表现较为明显。C组大鼠在应用TMX治疗的同时再用黑逍遥散和肾四味,C组大鼠的水平活动水平、垂直活动积分和糖水消耗量与A组相近，明显高于B组,说明黑逍遥散联合肾四味可以有效预防TMX引起的类更年期症状。根据中医理论,他莫昔芬抗雌激素治疗可导致患者出现肾精亏虚,肾水不足而不能上济心火，从而表现出心火亢盛的证候；心为脏器之主，主藏神，主神明，故乳腺癌服用他莫昔芬后出现的一系列症状主要与心肾失调相关[9-11]。因此,中医药治疗本病有较大优势。本研究以疏肝益肾，宁心安神为法，以黑逍遥散及肾四味化裁长期临床使用，干预乳腺癌他莫昔芬治疗引起类更年期症状，可以很好改善心烦易怒、潮热盗汗、神疲乏力、心情抑郁、失眠、记忆力下降、肌肉关节酸痛、月经失调等。

综上所述，黑逍遥散联合肾四味能有效预防乳腺癌大鼠因应用他莫昔芬导致的类更年期症状，且无明显的不良反应。

参考文献：

[1]赵翌,刘基巍,WANG Xinshelly,等.肿瘤常见症状及中医症状调查量表的设计[J].中华肿瘤防治杂志,2008,15(11):861-863.

[2]刘端祺,李小梅,王艳梅.奥施康定治疗中重度癌痛疗效观察[J].中国肿瘤临床,2006,33(16):934-936.

[3]FISHER B,CONSTANTINO J P,REDMOND C K,et al.Endometrial cancel in tamoxifen treated breast carwA:rpatients.Findings from the National Surgical Adjuvant Breast and Bowel Project(NSABP) B-14[J].J Nan Ca/leer lnst,1994,86(7):527-537.

[4]张培宇.乳腺癌患者非医嘱停用三苯氧胺原因及中药疗效[J].中国中西医结合外科杂志,2005,12(6):493-494.

[5]张健.三苯氧胺序贯来曲唑治疗绝经后晚期乳腺癌疗效观察[J].中国医学创新,2009,6(18):50-51.

[6]杨剑敏,王颀,李文萍,等.Suramin对实验性大鼠乳腺癌化学预防作用的研究[J].中华肿瘤防治杂志,2011,18(7):494-497.

[7]罗文,马庆阳,韦丽佳,等.美洛昔康对慢性应激大鼠抑郁行为的影响[J].中国药理学通报,2012,28(1):123-127.

[8]陈利平,孙艳,王发渭,等.舒郁散对慢性应激抑郁大鼠神经肽及海马神经元5-HT表达的影响[J].南方医科大学学报,2011,31(1):113-116.

[9]徐英,吴彩云,吴爱勤,等.心理社会因素与妇女更年期情绪障碍的相关性研究[J].中国心理卫生杂志,2000,14(1):37-39.

[10]林雪,周斌,甘庆雷,等.虚燥更平散对更年期高血压大鼠血压及血压变异性影响的研究[J].中国全科医学,2013,16(5):567-571.

[11]侯文静,马健,姜宝法,等.坤更欣胶囊对雌性“更年期”大鼠血清E2、FSH、LH水平的影响[J].山东医药,2014(15):28-30.