黄龙止咳口服液对模型动物炎症及迟发型超敏反应的影响

黄龙止咳口服液对模型动物炎症及迟发型超敏反应的影响

陶迪1，司振阳2*，隆红艳2,张骠2

(1.南京中医药大学，南京 210029;2.南京市中医院，南京 210001)

摘要：目的研究黄龙止咳口服液的抗炎、抗过敏作用。方法建立角叉菜胶致大鼠足趾肿胀模型，测量并比较致炎后不同时间点大鼠的足趾周长，观察黄龙止咳口服液的抗炎作用。采用2，4-二硝基氯苯(DNCB)背部皮下致敏、耳廓发敏的方法建立迟发型超敏反应小鼠模型，观察黄龙止咳口服液的抗过敏作用。结果抗炎实验表明，黄龙止咳口服液对角叉菜胶所致大鼠足爪炎性水肿有显著抑制作用，能抑制炎症的发展，加速其消退，并显示一定的量-效关系。抗过敏实验表明，与对照组比较,黄龙口服液各剂量组均可使DNCB所致的小鼠耳肿胀程度明显减轻。结论黄龙止咳口服液具有显著的抗炎和抗过敏作用。

关键词：黄龙止咳口服液;抗炎;抗过敏;祛风解痉;宣肺化痰;清热降逆

DOI::10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.07.019

中图分类号：R392.8文献标志码： A

文章编号：1003-5699(2015)07-0710-03

基金项目:江苏省中医药局科技项目(LZ13100)。

作者简介:陶迪(1988-),女,硕士研究生，主要从事小儿肺系疾病研究。

收稿日期:(责任编辑：张瑞彬2014-10-20)

*通信作者:司振阳,电话-1391295104,电子信箱-sizhenyang@126.com

Huanglongzhike oral liquid on model animal inflammation and influence

of delayed-type hypersensitivity

TAO Di1,SI Zhenyang2*,LONG Hongyan2,ZHANG Biao2

(1.Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210029，China;

2.Chinese Medicine Hospital of Nanjing，Nanjing 210001,China)

Abstract:ObjectiveTo study the anti-inflammatory,anti-allergic effect of huanglong cough oral liquid.MethodsEstablish carrageenan to toes swelling of rats’ model,measure and compare the different time points after inflammatory rats toes circumference,anti-inflammatory effect of observation of huanglong cough oral liquid.The 2.4-2 nitrochlorobenzene (DNCB) back under the skin sensitization,auricle of sensitive method to establish delayed-type hypersensitivity in mice model,to observe the allergy of huanglong cough oral liquid.ResultsAnti-inflammatory experiments show that the huanglong cough oral liquid diagonal inflammatory edema caused by carrageenan in rats foot claw has significant inhibitory effect,can restrain the development of inflammation,accelerate its faded,and displays a certain amount-effect relationship.Allergy experiments show that,compared with control group,the yellow dragon oral liquid in each dose group can make the mouse ear swelling caused by DNCB significantly reduce.ConclusionHuanglong cough oral liquid has significant anti-inflammatory and anti-allergic effects.

Keywords:Huanglongzhike oral liquid;anti-inflammatory;anti-allergy;expelling wind to relieve convulsion;ventilating the lung and resolving phlegm;reducing fever and lowering the adverse

黄龙止咳口服液由炙麻黄、地龙、杏仁、紫苏子、桑白皮、前胡、旋覆花、蝉蜕共8味药组成,具有祛风解痉、宣肺化痰、清热降逆之功。临床研究结果表明[1]，黄龙止咳口服液治疗小儿咳嗽变异性哮喘(风热夹痰证)在改善患儿总体疗效、主症、次症及证候等诸方面均优于对照组。为进一步研究提供实验依据，以冀探明其临床疗效的药理学基础及作用机理，本文报告黄龙止咳口服液的抗炎及抗迟发型超敏反应的作用。

1实验材料

1.1动物及分组SPF级SD大鼠，60只，雄性，体质量(180±10)g；SPF级ICR小鼠,60只，雌雄各半，体质量(20±2)g，均购于北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号:SCXK(京)2012-0001，适应性饲养1周后用于实验。大鼠与小鼠各随机均分为6组:空白对照组，黄龙止咳口服液低、中、高剂量组，先声咳喘宁组和布地奈德组，每组10只。

1.2试验药品与仪器黄龙止咳口服液由炙麻黄、地龙、杏仁、紫苏子、桑白皮、前胡、旋覆花、蝉蜕共8味药组成,中药汤剂饮片来源于南京市中医院中药房,用蒸馏水煎至生药1.5 g/mL，实验时以蒸馏水按剂量配制成所需浓度。先声咳喘宁(江苏先声制药有限公司,国药准字Z32020967)，普米克令舒(吸入用布地奈德混悬液，批号3144771)，角叉菜胶(美国SIGMA公司，批号1001660420)，2，4-二硝基氯苯(DNCB，南京都莱生物技术有限公司，批号：J130920)，超声雾化器402AI型(江苏鱼跃医疗设备股份有限公司)，METTLER TOLEDO电子天平PL83-S/01(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司制造)，打孔器。

2实验方法

2.1对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响造模方法[2]:实验前每只大鼠右后爪踝关节处用油性笔画一清晰横线，先测出各鼠正常的鼠爪周长。各组药物以蒸馏水配成相应浓度的混悬液，空白对照组予等体积蒸馏水，布地奈德组配等量生理盐水雾化吸入，各组均给药6 d，1次/d。第6天各组(正常组除外)均在给药1 h后于右后肢足跖部皮下注射1%角叉菜胶0.1 mL/只，造模成功标准以与正常组肿胀度比较有显著差异为准，诱发足趾炎性肿胀。致炎前及致炎后1，2，4，6 h分别测量大鼠右后足周长，以致炎前后周长之差为肿胀指标。肿胀度计算公式为：肿胀度=致炎后足趾周长-致炎前足周长。

2.2对DNCB所致小鼠迟发型超敏反应的影响造模方法[3]：各组灌胃给药1次/d，连续9 d。采用首次给药第2天小鼠背部皮下注射1.25% DNCB丙酮液20 μL/只致敏，末次给药后1 h，在小鼠右耳两面涂抹1.25% DNBC丙酮液20 μL/只进行攻击,诱发小鼠迟发型超敏反应模型。攻击后24 h，颈椎脱臼处死小鼠，用直径8 mm打孔器于左右耳相同部位打下圆形耳片，精密称重后分别计算小鼠耳肿胀度及肿胀抑制百分率。计算公式:肿胀度(mg)=右耳片重量-左耳片重量;抑制率(%)=(空白对照组平均肿胀度-各给药组平均肿胀度)/空白对照组平均肿胀度×100%。

3实验结果

3.1黄龙止咳口服液对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响结果见表1。黄龙高剂量组在致炎后1、2、4、6 h抗炎作用均优于黄龙中、低剂量组，表明随着黄龙剂量的增加，其抗炎作用在逐渐增强，提示黄龙止咳口服液对角叉菜胶所致大鼠足爪炎性水肿有显著抑制作用，能抑制炎症的发展,加速其消退,并显示一定的量-效关系。

表1　黄龙止咳口服液对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响 ± s, n=10)

注：与空白对照比较，##P<0.01

3.2黄龙止咳口服液对2，4-二硝基氯苯(DNCB)所致小鼠迟发型超敏反应的影响结果见表2。与空白对照组比较,黄龙各剂量组均可使DNCB所致的小鼠耳肿胀程度明显减轻。说明在致敏前至激发后全程给药的情况下，黄龙止咳口服液对DNCB所致小鼠迟发型超敏反应有显著抑制作用，随剂量加大，作用增强。

组 别剂量/(g生药/kg)肿胀度/mg抑制率/%空白对照组 —12.4±2.7 黄龙低剂量组8.4610.3±1.6# 16.9黄龙中剂量组16.929.4±1.7##24.2黄龙高剂量组33.848.1±1.4##34.6先声咳喘宁组6.1mL/kg7.6±1.6##38.7布地奈德组 0.3mg/kg11.9±2.2 4.1

注：与空白对照比较，#P<0.05,##P<0.01

4讨论

目前对咳嗽变异性哮喘(CVA)的发病机制尚不明确，现代医学认为，儿童CVA的发病机制可能为[4]变应原致敏引起的多种炎症细胞、炎症介质、细胞因子共同参与相互作用所致的慢性非特异性炎症，其间接表现为气道高反应性。临床上用抗生素治疗无效，用支气管扩张剂可缓解。 黄龙止咳口服液是治疗小儿咳嗽变异性哮喘(风热夹痰证)的临床经验用方。现代药理学[5]认为，麻黄中麻黄碱是平喘的有效成分，有松弛支气管平滑肌的作用，而挥发油具有很强的抑制流感病毒的作用。孙晓东等[6]通过动物实验证实地龙对豚鼠过敏性哮喘有部分缓解作用，而且地龙作为一种外源蛋白，在发挥平喘功能的同时不会引起过敏反应；杏仁的胃蛋白酶水解产物及苦杏宁球蛋白和苦杏宁白蛋白，具有明显抑制实验动物的炎症反应的作用[7]。苏子[8]具有祛痰镇咳的作用，并能使过敏反应受到抑制。冯冰虹等[9]证实，桑白皮的氯仿提取物和碱提取物镇咳、祛痰作用明显。前胡经化学纯化后可提取多种有效化合物成分，其中最为主要的化合物为香豆素类[10]，有活血平压、降气化痰等功效，临床多用于治疗风热郁肺、干咳痰黄、胸闷呕逆等症[11]。蝉蜕[12]对组胺参与的致喘模型有明显的平喘作用，缓解慢性炎症、改变“微观血瘀”状态，进而缓解支气管平滑肌的痉挛。旋覆花黄酮[13]有显著保护由组胺引起的豚鼠支气管痉挛性哮喘的作用，同样有对抗组胺引起的离体豚鼠气管痉挛的作用。

角叉菜胶致大鼠足肿胀模型是一个经典的炎症模型，常用于抗炎药物的筛选及评价，其应用十分广泛。迟发型超敏反应运动模型类似于人类发生的病理生理过程，是评价药物疗效的较为理想的模型之一。本实验根据该药的功能主治进行了抗炎、抗过敏等药效学试验研究，设置高、中、低3个剂量组，结果黄龙各剂量组均可明显减轻角叉菜胶所致的大鼠足肿胀及DNCB所致的小鼠耳肿胀程度，与对照组比较有显著性差异；中、高剂量组给药2 h后可明显减轻角叉菜所致的大鼠足肿胀，与对照组比较差异有显著性。随着黄龙止咳口服液对角叉菜胶所致的大鼠足肿胀及DNCB所致小鼠迟发型超敏反应抑制作用不断增强，显示一定的量-效关系。提示黄龙止咳口服液具有良好的抗炎、抗过敏作用，为其临床应用提供了药理学实验依据。

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