三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡生长性能、血液生化指标及抗氧化能力的影响

2016-01-09谢佳倩谭灵琳丁斌鹰杨书慧

饲料工业 2016年10期

■廖满段瑞谢佳倩谭灵琳易丹丁斌鹰杨书慧

（动物营养与饲料安全湖北省协同创新中心动物营养与饲料科学湖北省重点实验室武汉轻工大学动物科学与营养工程学院，湖北武汉 430023）

应激被认为是一种脆弱的体内平衡状态，恶劣的环境和不良管理容易引起应激。因环境低温所导致的冷应激常引起肉鸡机体抵御能力减弱，表现为肉鸡生长缓慢、发病率高及死亡率高等[1-4]。寒冷应激常常会使养禽场造成严重的经济损失。因此，冷应激问题已成为制约当前养禽业发展的重要因素之一，研究冷应激肉鸡的调控措施对于家禽的健康养殖具有重要意义。

三乳酸甘油酯由乳酸和甘油酯化而成[5]，能够作为机体的能源物质，并且具有良好的抑菌效果，能抑制炎性因子的分泌[6]。橄榄油富含脂溶性多种维生素、胡萝卜素及多种微量元素等天然营养物质，油中不饱和脂肪酸达82%～87%，有独特芳香和美味，对机体具有多种保健功效，特别对减少心血管疾病和促进幼儿骨骼及神经系统发育、健美肌肤具有特殊功效。橄榄油中含有角鲨烯物质，是一种天然的抗氧化剂[7]。肖颖等[8]报道，橄榄油对大鼠高血胆固醇、甘油三酯有降低作用,并能改善高脂所致体内过氧化状态异常，减轻对机体的过氧化损伤。黄惠娟等[9]研究表明，橄榄油能有效地减轻大鼠卵巢切除术引起的骨质丢失，可能通过补充植物雌激素发挥拟雌激素样作用。但是，关于三乳酸甘油酯和橄榄油在肉鸡冷应激方面的研究尚未见报道。因此，本试验旨在探索三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡生长性能、血液生化指标、血液抗氧化功能的改善作用，为三乳酸甘油酯和橄榄油在肉鸡生产中的应用提供理论依据，并为探寻营养手段缓解肉鸡冷应激提供思路。

1 材料与方法

1.1 试验材料与基础日粮

三乳酸甘油酯和橄榄油为市售产品（纯度≥99%）。基础日粮采用玉米-豆粕型日粮，基础日粮组成及营养水平见表1。乳酸甘油酯组的三乳酸甘油酯添加量为500 mg/kg，添加剂量的选择依据本课题组的前期研究结果（李娇龙等，2014），而橄榄油组日粮配方中豆油全部由橄榄油替代，用玉米调整各组能量平衡。

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.2 试验动物及设计

选用200只1日龄科宝肉鸡（45±0.5）g，按体重相近原则随机分为4组（对照组、冷应激组、乳酸甘油酯组、橄榄油组），每组5个重复，每个重复10只鸡。对照组和冷应激组饲喂基础日粮，乳酸甘油酯组饲喂添加500 mg/kg三乳酸甘油酯的基础日粮，橄榄油组饲喂以橄榄油替代配方中豆油的基础日粮。试验于2014年12月5日至2015年1月15日进行，试验周期42 d。

1.3 饲养管理

肉鸡采用网上平养的方式，每笼10只。试验前将鸡舍、鸡栏、料槽、饮水器等彻底打扫干净消毒，并且对鸡舍整体进行熏蒸消毒。于第7、21日龄接种新城疫疫苗，14、28日龄接种法氏囊疫苗。肉鸡自由采食和饮水，24 h光照，定期打扫并消毒。试验第1周（1～7日龄）各组温度控制在32～34℃，第2周（8～14日龄）控制在30～32℃。试验第3～6周（15～42日龄）冷应激组、乳酸甘油酯组、橄榄油组控制在(10±2)℃，而对照组维持在(26±2)℃，湿度50%～60%。

1.4 样品采集与处理

试验开始后，每周对试验肉鸡称重并记录每天采食量。于第43日龄时每重复随机取2只体重相近肉鸡称重，并翅下静脉采血，离心（3 000 r/min、10 min）取血清置于-20℃冰箱待测，采血完后屠宰，取胸腺、脾脏、法氏囊、心脏、肝脏、肺脏、胸肌、腿肌等称重并记录。

1.5 指标测定及方法

1.5.1 生长性能测定

生长性能包括1～21日龄、22～42日龄和1～42日龄肉鸡平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、料重比（F/G）等。

1.5.2 器官组织相对重量

器官组织相对重量（%）=器官组织重量/个体活重×100。器官组织包括胸腺、脾脏、法氏囊、心脏、肝脏、肺脏、胸肌、腿肌等。

1.5.3 血液生化指标

采用日立7020全自动生化分析仪测定血液中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、总胆红素（TBIL）含量及谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）活力。

1.5.4 血清抗氧化能力

血清中总超氧化物歧化酶（superoxidase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSHPx）的活力和丙二醛（malonald-ehyde，MDA）含量的测定参照Yi等[10]方法，用试剂盒法（南京建成生物工程研究所）测定。

1.6 数据统计与分析

试验结果用“平均值±标准差”表示。试验数据采用统计软件SPSS17.0进行单因素方差（one-way ANOVA分析）和Duncan's法多重比较检验，以P＜0.05为差异显著性标准。

2 结果与分析

2.1 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡生长性能的影响（见表2）

表2 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡生长性能的影响

由表2可知，与对照组相比，冷应激处理降低了肉鸡（1～21、22～42及1～42日龄）平均日增重（ADG）（P＜0.05），提高了料重比（F/G）（1～21、22～42及1～42日龄）（P＜0.05）；与冷应激组相比，乳酸甘油酯降低了22～42和1～42日龄肉鸡的平均日采食量（P＜0.05），但对平均日增重、料重比均无影响（P＞0.05）；与冷应激组相比，橄榄油组对生长性能无影响（P＞0.05）。

2.2 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡组织器官相对重量的影响（见表3）

由表3可知，与对照组相比，冷应激处理降低了42日龄肉鸡的胸腺、法氏囊和腿肌相对重量（P＜0.05），但提高了心脏相对重量（P＜0.05）。而与冷应激组相比，乳酸甘油酯组及橄榄油组组织器官相对重量均无显著差异（P＞0.05），表明在日粮中添加500 mg/kg三乳酸甘油酯或以橄榄油替代日粮中豆油未能改善由冷应激引起的组织器官发育不良及免疫功能下降。

表3 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡组织器官相对重量的影响（42日龄）（%）

2.3 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡血液生化指标的影响（见表4）

由表4可知，与对照组相比，冷应激处理提高了血液ALP活力（P＜0.05）；与冷应激组相比，乳酸甘油酯组显著降低血液中ALT、ALP的活力和TBIL含量（P＜0.05），而橄榄油组显著提高了血液中TP、GLB含量（P＜0.05），降低血液中TBIL含量（P＜0.05）。

2.4 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡血清抗氧化能力的影响(见表5)

表4 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡血液生化指标的影响

表5 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡血清抗氧化能力的影响

由表5可知，与对照组相比，冷应激处理组显著降低了血清中SOD酶活力（P＜0.05）；而与冷应激组相比，日粮中添加500 mg/kg三乳酸甘油酯或以橄榄油替代日粮中大豆油均能显著提高血清中SOD和GSH-Px的酶活力（P＜0.05），且两组之间无显著差异（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡生长性能的影响

有关三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡生长性能的报道很少。冷应激显著降低了肉鸡的采食量和日增重，同时增大了料重比，给肉鸡生产带来显著的负面影响。研究表明，在寒冷环境中，肉鸡需要消耗大量的饲料用于维持产热调节体温，只有部分用于脂肪沉积，使得整个饲养期间料重比升高[3,11]，增大养殖成本，同时冷应激使得肉雏鸡发病率和死亡率明显提高。本研究结果与前人研究结果一致。另外，本试验结果还表明，日粮中添加500 mg/kg三乳酸甘油酯能显著降低冷应激肉鸡的平均日采食量（22～42和1～42日龄），可能与三乳酸甘油酯有一定气味有关，但对平均日增重及料重比无显著影响，与李娇龙等[12]的结果一致，而以橄榄油替代日粮中豆油对冷应激肉鸡的生长性能无显著影响。

3.2 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡组织器官相对重量的影响

研究表明，冷应激会导致肉鸡免疫器官发育不良，免疫功能降低[13]，抗病力下降，最终导致死亡率升高。本试验中，冷应激抑制了肉鸡免疫器官（胸腺、法氏囊）的发育及肌肉（腿肌）生长，并促使心脏增大（见表3），而日粮中添加500 mg/kg三乳酸甘油酯或以橄榄油替代日粮中的豆油，并未改善由冷应激引起的器官发育不良和免疫力下降等不良影响。

3.3 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡血液生化指标的影响

TP是反映动物营养状况的重要指标之一，主要包括白蛋白和球蛋白，良好的营养状况可以促进血浆蛋白的合成。TP主要维持血浆胶体渗透压与pH值平衡，具有运输、凝血、免疫、供应能量等作用。ALB是最重要的特异性蛋白，具有调节渗透压、运输代谢产物、贮存物质等生理功能。GLB则主要与免疫有关。ALT是在肝细胞内合成的，主要分布在肝细胞的胞质中，当肝细胞受损时会释放入血，是反映肝细胞炎症受损最敏感的指标。AST可以从受损的肝细胞、心肌细胞、肌肉细胞或脑细胞中释放入血。肝脏中的AST主要存在于线粒体中，AST升高说明细胞器受损，肝脏损害严重。肝脏中含有高浓度的ALP，血液中ALP升高是肝脏受损的一种表现。TBIL主要用来诊断肝脏或胆道是否发生异常，当肝脏受损时，TBIL会升高。由此可见，血液中ALT、AST、ALP和TBIL浓度升高可能是由肝脏受损所导致[12]。而营养物质在肝脏修复方面起着重要作用[14]。李娇龙等[12]的研究表明，日粮中添加三乳酸甘油酯能够降低LPS刺激肉鸡的血清ALT、AST、ALP水平。高珊等[15]的研究表明，橄榄油能够提高小鼠血清中ALB含量。在本试验中，冷应激显著升高了血液ALP酶活力，添加500 mg/kg三乳酸甘油酯能够降低冷应激肉鸡血液中ALT、ALP和TBIL含量，可能是缓解了冷应激肉鸡肝脏损伤情况。而橄榄油组则提高了血清中TP，主要是GLB含量，降低TBIL含量，提示橄榄油可能对冷应激肉鸡的免疫力及肝脏功能具有积极作用。

3.4 三乳酸甘油酯和橄榄油对冷应激肉鸡血液抗氧化能力的影响

机体清除自由基的主要抗氧化酶有SOD、GSHPx等。因此，测定SOD和GSH-Px活性的高低可以间接反映机体清除自由基的能力。而MDA作为脂质氧化反应的稳定终产物，其含量高低反映自由基对机体脂肪的损伤程度[16]。据报道，冷应激可以改变生物体的促氧化和抗氧化间的平衡，通过黄嘌呤氧化酶活性的升高和髓过氧化物酶活性的降低使机体产生过多的自由基，导致脂质过氧化作用增强，诱发氧化损伤，对机体造成损伤[17-19]。关于三乳酸甘油酯对冷应激肉鸡抗氧化影响方面的研究尚未见报道。研究表明，橄榄油中含有多种抗氧化剂，橄榄油酚类化合物具有抗氧化、抗炎、抗菌的作用[20-21]。本试验研究表明，冷应激显著降低了肉鸡血液中SOD酶活力水平，而乳酸甘油酯及橄榄油组均显著提高血液中SOD和GSH-Px酶活力水平，对MDA含量无显著影响，表明在日粮中添加三乳酸甘油酯或以橄榄油替代日粮中豆油均能提高冷应激肉鸡的血液抗氧化能力。